- •Учебно-методический комплекс
- •Раздел 3. Методические рекомендации для студентов, в том числе для самостоятельной аудиторной и внеаудиторной работы Ижевск 2008
- •Раздел 1: морфология микроорганизмов. Лабораторное занятие №1.
- •Работа № 1: Правила работы в бактериологической лаборатории.
- •Работа №2: Устройство оптического микроскопа. Иммерсионная система.
- •Работа №3: Правила приготовления микропрепаратов. Приготовление микропрепаратов из чистой культуры.
- •Работа № 4: Приготовление мазков из культур с плотной питательной среды и окраска их простым методом.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №2.
- •Работа №1: Отличия прокариот и эукариот:
- •Работа №2: Сложные методы окраски бактерий. Метод Грама.
- •Работа № 4: Методы определения подвижности микробов. Темнопольная микроскопия.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №3.
- •По Граму.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие № 4.
- •Раздел 2. Физиология микроорганизмов. Лабораторное занятие № 5
- •Работа № 1: Способы получения чистых культур бактерий.
- •Работа № 2: Основные требования к питательным средам
- •Работа № 3: Жидкие и плотные питательные среды.
- •Работа № 4: Методы механического разобщения бактерий. Техника посева бактерий бак.Петлей.
- •Работа № 5: Схема выделения чистой культуры аэробных бактерий (зарисовать)
- •Работа № 6: Характер роста бактерий на жидких питательных средах
- •Работа №7: Описание полонии (паспорт колонии).
- •Работа №1: Среды для определения сахаролитических свойств бактерий.
- •Работа № 2: «Пестрый ряд» кишечной палочки
- •Работа № 3: Факторы патогенности стафилококка
- •Работа 5: Среды для выращивания анаэробов
- •Работа № 7: Схема выделения чистой культуры анаэробов.
- •Работа № 8: Изучение чистой культуры, выделенной самостоятельно при проведении уирс
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие № 7
- •Работа № 1: Техника овоскопии, заражения и вскрытия куриного эмбриона.
- •Работа №2: Культуры клеток для культивирования вирусов.
- •Работа №3: Питательные среды для культур клеток:
- •Работа №4: Методы индикации вирусов
- •Работа №5: Строение бактериофага.
- •Работа № 6: Получение бактериофагов.
- •Работа № 7: Методы титрования фагов.
- •Работа №8: Методы фагодиагностики:
- •Работа № 9: Диагностические и лечебно-профилактические фаги.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №8.
- •Лабораторное занятие №9
- •Работа № 4: определение лизоцима в биологических жидкостях методом титрования
- •Основные понятии по теме
- •Работа № 1: ориентировочная реакция агглютинации (ра) для определения неизвестной культуры
- •Работа №2: развернутая реакция агглютинации (ра) при определении неизвестной культуры
- •Работа № 4: Реакция непрямой гемагглютинации (рнга) при серодиагностике инфекций
- •Работа № 5: Реакция иммунофлюоресценции (риф)
- •Работа № 7: диагностические препараты, используемые для постановки изучаемых реакций
- •Вопросы для самоконтроля
- •Лабораторное занятие № 11
- •При определении антител в сыворотке больного
- •Работа №6: реакция нейтрализации in vivo на белых мышах при диагностике ботулизма
- •Работа №7: иммунопрепараты по теме занятия
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторное занятие №12
- •Работа №1: кожно-аллергические пробы (кап) с инфекционными аллергенами
- •Иммуномодуляторы:
- •Работа №2: иммуноферментный анализ (ифа) для определения антител в парных сыворотках
- •Работа №3: реакции розеткообразования (е-рок, еас-рок) и бластной трансформации лимфоцитов (рбтл)
- •Работа №4: оценка иммунного статуса человека и иммунограмма здорового человека
- •Работа №5: реакция торможения гемагглютинации (ртга) для идентификации вируса гриппа
- •Работа №6: ртга в парных сыворотках на определение антител при серодиагностике гриппа
- •Работа №7: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» при идентификации вируса полиомиелита
- •Работа №8: реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» на определение антител при серодиагностике полиомиелита
- •Работа №9: иммунопрепараты по изучаемой теме
- •Вопросы для самоконтроля
- •Лабораторное занятие № 16
- •Работа № 1: классификация вакцин
- •Работа №2: Календарь профилактических прививок приказ от 27.06.2001 № 229
- •Работа №3: приготовление убитой вакцины
- •Других иммунопрепаратов
- •Вопросы для самоконтроля
- •Лабораторное занятие № 17
- •Цель: оценить степень усвоения теоретического материала и практических навыков по теме: «Инфекция и иммунитет»
- •Практическое занятие № 2
- •Возбудители брюшного тифа и паратифов а и в
- •Лабораторная диагностика брюшного тифа
- •Возбудители сальмонеллезных токсикоинфекций
- •Возбудители внутрибольничных сальмонелезных инфекций
- •Возбудитель кишечного иерсиниоза
- •Возбудители кишечного кампилобактериоза
- •Возбудитель холеры
- •Методы экспресс- диагностики:
- •Возбудитель ботулизма
- •Лабораторная диагностика ботулизма
- •Возбудитель протейной токсикоинфекции
- •Стафилококки
- •Лабораторная диагностика
- •Проблема госпитальной стафилококковой инфекции
- •Возбудители:__________________________________________________________________________________________________________
- •Стрептококки
- •Гломерулонефрит
- •Менингококковая инфекция
- •Менингококковый сепсис
- •Менингит
- •Практическое занятие № 6
- •Микоплазмы пневмонии
- •Хламидии пневмонии
- •Лабораторная диагностика
- •Гемофильная палочка
- •Бактериологический метод диагностики
- •Возбудитель столбняка
- •Возбудители анаэробной газовой инфекции
- •Диагностика раневой анаэробной инфекции
- •Лабораторная диагностика
- •Практическое занятие № 8
- •Возбудитель дифтерии
- •Лабораторная диагностика
- •Определение антитоксического иммунитета:
- •Лабораторная диагностика
- •Рнга практическое занятие № 9
- •Возбудители туберкулеза
- •Лабораторная диагностика
- •Возбудители актиномикоза
- •Лабораторная диагностика
- •Бактериологический.
- •Серологический.
- •Лабораторная диагностика
- •Практическое занятие № 10
- •Возбудители бруцеллеза
- •Лабораторная диагностика
- •Ра: Реакция Хеддельсона
- •Ифа, рнга, рск, кап
- •Прямая риф, рнга, рск, кап
- •Алгоритм ответа
- •Культивирование: лабораторные животные
- •Работа 1: Культура фибробластов в норме и при цпд вируса.
- •Работа 4. Идентификация вируса гриппа в ртга
- •Работа 6: рск при диагностике кори.
- •Сравнительная характеристика возбудителей вирусных респираторных инфекций (таблица)
- •Лабораторное занятие №13
- •Работа 1: Реакция нейтрализации «цветня проба» при идентификации вируса полиомиелита в исследуемом материале.
- •Работа реакция нейтрализации по типу «цветной пробы» на определение антител при серодиагностике полиомиелита
- •Работа 1: Оценить готовый результат ифа в парных сыворотках при серодиагностике клещевого энцефалита (определение IgM)
- •Работа3.: Метод флюоресцирующих антител-мфа (н риф) при серодиагностике глпс.
- •Практическое занятие № 15.
- •Работа 1: тельца Пашена и тельца Гварниери при натуральной оспе Работа 2: структура вируса вич Антигены вич
- •Работа 3: иммуноблотинг при диагностике вич-инфекции
- •Практическое занятие № 16.
- •Практическое занятие № 17
- •Гонококк
- •Бледная трепонема
- •Возбудители урогенитального хламидиоза
- •Возбудители риккетсиозов
- •Лабораторная диагностика
- •Возбудители возвратного тифа
- •Лабораторная диагностика
- •Список основной литературы
Работа №2: Культуры клеток для культивирования вирусов.
Свойства |
Первичные |
Полупереви- ваемые |
Перевиваемые |
Отличия от исходной ткани |
|
|
|
Набор хромосом
|
|
|
|
Продолжительность жизни |
|
|
|
Время генерации (дни) |
|
|
|
Признаки озлокачествления |
|
|
|
Линии клеток
|
|
|
|
Работа №3: Питательные среды для культур клеток:
1. Сбалансированные солевые растворы - раствор Эрла, Хенкса
2. Ростовые среды:
а) естественные – среда Эндерса:_______________________________
б) гидролизаты – _____________________________________________
в) синтетические – среда Игла:__________________________________
среда 199:___________________________________
_______________________________________________
Перед использованием ко всем средам добавляется________________
_____________________. Большинство сред содержат индикатор – феноловый красный, чтобы оценивать состояние культур клеток (если его нет, то необходимо внести в среду).
Работа №4: Методы индикации вирусов
а) цитопатическое действие (ЦПД)- культуры клеток изучают под малым увеличением микроскопа в исходном состоянии или после окраски анилиновыми красителями. Нормальные клетки фибробластов располагаются на стекле в виде монослоя и имеют четко выраженную структуру. Вирусы при размножении в клетках вызывают их дегенерацию.
нормальные ЦПД -
фибробласты дегенерация
б) реакция гемагглютинации – РГА:
Компоненты:
1) смыв из носа - вируссодержащий материал
2) 1% взвесь куриных эритроцитов.
Механизм реакции:___________________________________________
___________________________________________________________
____________________________________________________________
|
Результат:
Заключение: в исследуемом материале содержится вирус, потому что
___________________________________________________________
___________________________________________________________
в) реакция гемадсорбции – РГадс проводится на ХАО куриного эмбриона или на культуре клеток после внесения на них исследуемого материала. Если в исследуемом материале есть вирус, то после добавлении взвеси куриных эритроцитов, эритроциты приклеиваются – адсорбируются на клетках. Изучают РГадс на ХАО – невооруженным глазом, на культуре клеток – под малым увеличением микроскопа.
г) включения в пораженных клетках
цитоплазматические -
тельца Бабеша-Негри
при бешенстве
тельца Гварниери
при натуральной оспе
внутриядерные -
при аденовирусной
инфекции
д) реакция бляшкообразования
На монослое культуры клеток во флаконах Кареля под агаровым покрытием образуются ограниченные участки разрушенных вирусом клеток - бляшки или негативные колонии, которые отличаются по форме и размерам.
е) «цветная проба» - учесть результат готовой реакции
Культура клеток культура клеток
Среда 199 исследуемый материал
Среда 199
Результат: в исследуемом материале содержится вирус, потому что
___________________________________________________________________________________________________________________________