Определение мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов.

Метод основан на способности мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов размножаться на плотном питательном агаре при 30⁰С в течение 72 часов.

Для определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов выбирают те разведения, при посеве которых на чашках вырастает не менее 30 и не более 300 колоний.

Из каждой пробы делают высев на 2-3 чашки, причем каждое из разведений должно быть засеяно в количестве 1,0см³ в одну чашку Петри с заранее маркированной крышкой и залито 10,0-15,0см³ расплавленной и охлажденной до температуры 40-45⁰С питательной среды для определения общего количества бактерий. Допускается посев исследуемого продукта на чашки Петри из одного и того же разведения в количестве 1,0см³ и 0,1см³.

Сразу после заливки агара содержимое чашки Петри тщательно перемешивают путем легкого вращательного покачивания для равномерного распределения посевного материала. После застывания агара чашки Петри переворачивают крышками вниз и ставят в термостат при температуре 30±1⁰С на 72 часа.

Количество выросших колоний подсчитывают на каждой чашке, поместив ее вверх дном на темном фоне, и пользуясь лупой с увеличением в 4-10 раз.

При большом числе колоний дно чашки делят на 4 и более одинаковых секторов, подсчитывают число колоний на 2-3-х секторах, находят среднее арифметическое и умножают на общее количество секторов всей чашки. Таким образом, находят общее количество колоний, выросших на одной чашке, и вычисляют общее количество бактерий в 1,0см³ или 1,0г продукта по следующей формуле:

Х = n ´ 10^m, где

Х – общее количество бактерий в 1,0см³ или 1,0г продукта;

n – число колоний, подсчитанных на чашке Петри;

m – число десятикратных разведений.

Микробиологические нормативы и методы анализа продуктов детского, лечебного и диетического питания и их компонентов Определение е.Coli в продуктах детского питания.

Бактерии вида E.coli, входящие в группу колиформных бактерий и являющиеся индикатором относительно свежего фекального загрязнения, представляют собой грамотрицательные, неспорообразующие палочки, не утилизирующие цитрат, способные расти и ферментировать лактозу при температуре выше температуры тела (от 44⁰С до 45,5⁰С).

Метод основан на выявлении способности кишечной палочки ферментировать лактозу с образованием кислоты и газа при температуре 44⁰С от 24 до 48 часов. Идентификацию E.coli проводят по следующим таксономическим признакам: образование индола, положительная реакция с метиловым красным, отрицательная реакция Фогес-Проскауэра и отсутствие способности утилизировать цитрат.

Асептически взвешивают 10,0г сухого детского продукта «Детолакт», растворяют в колбе в 90,0см³ разбавленного фосфатного буфера; рН доводят до 7,0, для чего используют пастеризованный 1н раствор гидроокиси натрия или 1н раствор соляной кислоты, проверяя рН индикаторной бумажкой.

Колбу помещают в термостат и выдерживают при температуре 37⁰С в течение 24 часов.

1,0см³ смеси из этой колбы засевают в пробирку или колбу с 9,0см³ среды Кесслера с лактозой и поплавком и инкубируют при температуре 44⁰С в течение 24 часов.

При отсутствии газа, помутнения, изменения цвета среды в посевах продуктов, подвергавшихся предварительной инкубации, результат анализа считают отрицательным и дают заключение об отсутствии в нем E.сoli, т.е. соответствии продукта нормативу по этому показателю.