Санитарно-микробиологическое исследование почвы Определение титра нитрифицирующих бактерий.

Появление и увеличение содержания нитрифицирующих бактерий в почве указывает на развитие процессов ее самоочищения.

Методика проведения анализа.

Готовят 10-кратные разведения почвенной суспензии (от 1:100 до 1:10⁴) и затем производят посев во флаконы с жидкой синтетической средой Виноградского. В качестве контроля используют два флакона с незасеянной средой Виноградского. Посевы и контрольные флаконы инкубируют при температуре 28⁰С в течение 14-15-ти суток.

Уже на 5-7-е сутки культивирования с помощью качественной пробы с дифениламином проверяют образование азотистой или азотной кислоты. Для этого к капле среды, помещенной на стеклянную пластинку, добавляют несколько капель раствора дифениламина в концентрированной серной кислоте – появление синего окрашивания указывает на присутствие нитратов. В контрольной среде изменения окраски не происходит.

Для более полной оценки процесса самоочищения почвы можно также определять группы микроорганизмов, быстро разлагающих органический субстрат: бациллы, актиномицеты, грибы.

На свежее фекальное загрязнение почвы указывают:

– обнаружение энтерококков;

– большое количество БГКП при отсутствии нитрифицирующих бактерий и термофилов;

– относительно высокое содержание вегетативных форм клостридий.

Загрязнение почвы навозом, компостом или сточными водами и стадию разложения их органического субстрата помогает оценить определение термофильных бактерий.

Санитарно-микробиологическое исследование пищевых продуктов

Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты, в том числе на продукты детского лечебного питания, мясо, включая мясо птицы, субпродукты и мясные продукты, рыбу, молоко и молочные продукты, маргарин, майонез, свежие и свежезамороженные овощи, картофель и т.д.

Определение бактерий группы кишечных палочек (бгкп).

К бактериям группы кишечных палочек (БГКП) относятся грамотрицательные, не образующие спор палочки, сбраживающие глюкозу с образованием кислоты и газа при температуре 37-44⁰С в течение 24-48 часов, в основном являющиеся представителями родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia.

Посев пробы продукта проводят в среду Кесслера с лактозой и поплавками с соблюдением соотношения продукта и среды 1:10 и инкубируют при температуре 37⁰С в течение 24 часов.

При отсутствии признаков роста (газообразование или помутнение среды Кесслера) дают заключение об отсутствии БГКП в данной пробе продукта.

При наличии признаков роста из подозрительных колб или пробирок производят высев на чашки со средой Эндо или Левина. При этом посев выполняют петлей из каждой колбы или пробирки так, чтобы получить рост изолированных колоний – на отдельный сектор, а лучше – на отдельную чашку.

Посевы инкубируют при температуре 37⁰С в течение 18-24 часов.

Учет результатов анализа.. При отсутствии на среде Эндо и Левина колоний, типичных для бактерий группы кишечных палочек, дающих на среде Эндо крупные с металлическим блеском или без него, розовые или бледно-розовые колонии, на среде Левина – черные с металлическим блеском, темные с черным центром, сиреневые с черным центром, засеянная навеска продукта считается незагрязненной ими, т.е. исследуемый продукт соответствует нормативу на БГКП (колиформные бактерии).

При наличии на среде Эндо и Левина типичных или подозрительных для кишечной палочки (колиформных бактерий) колоний продолжают их изучение. Для этого из изолированных колоний, характерных или подозрительных на БГКП, делают мазки, окрашивают их по Граму и на наличие спор, и затем микроскопируют.

Обнаружение в мазке грамотрицательных палочек, не содержащих спор, указывает на наличие БГКП в анализируемой массе продукта и его несоответствие микробиологическому нормативу.

Исследуемый продукт считается соответствующим нормативу на БГКП при подтверждении принадлежности подозрительных колоний к роду Erwinia и отсутствии других микроорганизмов, типичных для БГКП.

Для определения принадлежности к роду Erwinia типичные для БГКП колонии, выросшие на среде Эндо или Левина пересевают на питательный агар с 5% сахарозой, на котором бактерии рода Erwinia дают выраженный мукоидный рост, не свойственный колиформным бактериям.