- •Практический навык по микробиологии
- •Общая микробиология Правила работы на кафедре микробиологии
- •Запрещается
- •Перед началом работы студент обязан:
- •Обязанности студентов и дежурных во время лабораторной работы:
- •Обязанности студентов и дежурных по окончании работы:
- •Самостоятельная работа студентов на лабораторных занятиях:
- •Микроскопирование
- •Окончание работы (микроскопирования)
- •Микробиология как наука Бактериоскопический метод исследования. Простые методы окраски Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Приготовление мазка
- •Простые методы окраски
- •Морфология и ультраструктура бактериальной клетки Окраска по Граму
- •Сложные методы окраски
- •Морфология и ультраструктура бактериальной клетки (продолжение). Особенности морфологии актиномицетов, спирохет, риккетсий, хламидий, микоплазм Окраска по Цилю-Нильсену
- •Сложные методы окраски
- •Физиология прокариот Окраска по Нейссеру
- •Сложные методы окраски
- •Физиология прокариот (продолжение). Бактериофаги Культуральный метод исследования. Фаготипирование бактерий
- •Первый этап культурального метода исследования – получение изолированного роста чистой культуры
- •Второй этап культурального метода исследования – накопление чистой культуры
- •Третий этап культурального метода исследования – окончательная идентификация чистой культуры
- •Изучение культуральных признаков
- •Фаготипирование бактерий.
- •Генетика бактерий Изучение бактерий в живом состоянии
- •Приготовление препаратов для изучения микроорганизмов в живом состоянии.
- •Метод «раздавленной» капли.
- •Этапы приготовления препарата «раздавленная капля»
- •Экология микроорганизмов Изучение микрофлоры ротовой полости
- •Приготовление мазка из зубного налета
- •Окраска мазка простым методом с использованием метиленового синего:
- •Основы учения об инфекции Биологический метод исследования
- •Микробиологические основы химиотерапии бактериальных инфекций Методы изучения чувствительности бактерий к антибиотикам
- •Качественный метод определения чувствительности бактерий к антибиотикам (метод дисков).
- •Иммунология
- •Иммунология как наука. Естественный иммунитет Оценка функционального состояния фагоцитов
- •Иммунная система организма человека Определение активности системы комплемента
- •Клеточный иммунный ответ. Антигены Пластинчатая реакция агглютинации
- •Гуморальный иммунный ответ. Иммуноглобулины Объемная реакция агглютинации
- •Аллергия (гиперчувствительность) Реакция преципитации Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Иммунопрофилактика и иммунотерапия инфекционных болезней. Возрастные особенности иммунитета
- •Серологические реакции с использованием метки.
- •Постановка прямой и непрямой риф.
- •Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Стафилококки. Стрептококки. Нейссерии
- •Кишечная палочка. Шигеллы. Сальмонеллы
- •Вибрионы. Бруцеллы. Франциселлы. Yersinia pestis. Бациллы Микробиологическая диагностика холеры, бруцеллеза, туляремии, чумы, сибирской язвы Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
- •Микобактерии. Актиномицеты. Листерии
- •Анаэробные бактерии
- •Содержание
Клеточный иммунный ответ. Антигены Пластинчатая реакция агглютинации
Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
-
Постановка и учет пластинчатой реакции агглютинации (РА) на стекле.
Пластинчатая (или ориентировочная) РА.
Пластинчатая РА выполняют перед постановкой развернутой реакции для того, чтобы получить предварительное представление о выделенном виде или сероваре бактерий, отобрать положительно реагирующие с ними колонии (культуры) и исключить из дальнейших исследований неагглютинирующиеся.
Пластинчатую РА ставят при комнатной температуре на предметных стеклах.
Для этого пастеровской пипеткой наносят на стекла раздельно друг от друга капли сыворотки в небольших разведениях (1:10 - 1:20) и две капли 0,5 % раствора натрия хлорида (контроль РА).
В каждую каплю (за исключением одной контрольной) вносят колонии, снятые с поверхности плотной питательной среды, или петлю суточной жидкой культуры бактерий.
Внесенные микроорганизмы тщательно перевешивают в каплях жидкости до равномерного их помутнения.
Результаты реакции учитывают через 5-10 мин простым глазом или с помощью лупы (5х).
При положительной реакции в капле с сывороткой появляются крупные или мелкие хлопья, при отрицательной - жидкость остается равномерно мутной.
Занятие № 14
Гуморальный иммунный ответ. Иммуноглобулины Объемная реакция агглютинации
Практические навыки, осваиваемые студентами на занятии:
1. Постановка и учет объемной реакции агглютинации для определения титра антител.
Алгоритм постановки и учёта объемной (развернутой) реакции агглютинации для определения титра антител.
В агглютинационные пробирки предварительно разливают по 1 мл изотонического раствора натрия хлорида.
В первую из них доливают 1 мл сыворотки, разведенной 1:100, и, смешав ее, 1 мл переносят во вторую, из второй - в третью пробирку и т.д.
Получив двукратные разведения сывороток ((двукратные – 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024), вносят в них по 1 - 2 капли антигена (1-2 млрд бактерий).
Контролями служат изотонический раствор натрия хлорида с антигеном и исследуемая сыворотка без него.
Пробирки энергично встряхивают и помещают на 2 ч в термостат при температуре
37 °С, затем ведут предварительный учет, начиная с контрольных.
Отсутствие агглютинации в контрольных пробирках и наличие взвешенных хлопьев в двух-трех и более пробирках опыта свидетельствует о положительной реакции.
Окончательные результаты учитывают через 18 - 20 ч, выдерживая штатив с пробирками при комнатной температуре.
Интенсивность реакции выражается плюсами: "++++" – сыворотка прозрачная, с хлопьевидным осадком склеившихся бактерий на дне пробирки; "+++","++" и "+" –убывающие просветления с уменьшением бактериального осадка.
Заостряя внимание на образовании и характере осадка, следует указать, что атрихиальные бактерии и риккетсии, имеющие лишь соматические антигены, склеиваются через 18 - 20 ч с образованием мелкозернистых, трудно разбиваемых при встряхивании осадков; жгутиконосные бактерии агглютинируются спустя 2 - 4 ч в виде рыхлых, легко взбиваемых хлопьев.
Занятие № 15