ТОНКОСЛОЙНАЯ

ХРОМАТОГРАФИЯ

(ТСХ)

(Н.А. Измайлов, М.С. Шрайбер

1938 г.)

Техника выполнения ТСХ

Восходящая тонкослойная хроматография

Нисходящая и горизонтальная ТСХ

Двумерная ТСХ

2 Место нанесения 1 пробы

ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

НЕПОДВИЖНАЯ ФАЗА ПОДВИЖНАЯ ФАЗА

Силикагель (полярная фаза).

Оксид алюминия(полярная фаза).

Флорисил. Основной силикат магния - по полярности занимает промежуточное положение между оксидом алюминия и силикагелем. Применяют в анализе флавоноидов, стероидов, ацетилированных углеводородов.

Кизельгур (диатомитовая земля). Применяется главным образом для разделения сильно полярных соединений по адсорбционному механизму.

Целлюлоза

Обращенно-фазовые сорбенты

Различные органические растворители и их смеси:

Пентан

н-Гексан

Циклогексан

Четыреххлористый углерод

Толуол

Хлороформ

Дихлорметан

Диэтиловый эфир

Уксусная кислота

Ацетон

Этанол

Метанол

Пиридин

ДЕТЕКТИРОВАНИЕ В ТСХ

1. УФ детектирование

2. Химические методы -пары йода

-опрыскивание раствором реагента -погружение в раствор реагента

Основные параметры разделения в тсх

l

^L R = у R} = 1 - (1 - Я} у

Ь с*

R_s =

2D l

(W + W₂)

N = 16(—)²

W

Некоторые характеристики тсх- и вэтсх- пластинок

Характеристики	ТСХ	ВЭТСХ
Средний размер частиц, мкм	11-20	5-7
Толщина слоя, мкм	250	5-7
Длина пробега фронта растворителя,	10-15	3-5
см	50	5-10
Количество растворителя, мл	1	0,1
Предел детектирования, мкг:	2-4	1
Диаметр пятна, мм

КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА В ТСХ

1.Определение с удалением зоны вещества с пластинки

2.Определение по площади пятна

3. Метод разбавления

4. Метод денситометрии

5. Метод видеоденситометрии

6. Денситометрия с планшетным

ДЕНСИТОМЕТР ДЕНСКАН-04 (САНКТ-ПЕТЕРБУРГ, НТЦ «ЛЕНХРОМ»)

;(Л,# ™ ,>с^ сф чК¹*eg, « *, .СЛ «^ .{♦>., ’ *^ .>ф . »/Oft ^

ДЕНСИТОМЕТРИЯ

А) ВИДЕОДЕНСИТОМЕТРИЯ; Б) СКАНИРОВАНИЕ

а

ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ

ЖИДКОСТНАЯ

ХРОМАТОГРАФИЯ

(ВЭЖХ)

• ВЭЖХ - это скоростной метод анализа, в котором подвижная фаза (жидкость) подается при высоком давлении, неподвижная фаза имеет размер частиц 3­10 мкм, что обеспечивает высокую эффективность разделения в этом методе

Применение ВЭЖХ

• Г осударственные лаборатории

• Независимые лаборатории

• Органическая химия

• Биотехнология

• Учебные организации

• Фармация

• Прочее