9. Задание на самоподготовку.

9.1. Вопросы для повторения, необходимые для успешного усвоения данной темы (истоки знаний):

1. . Микроскопический метод исследования:

- цели, задачи, диагностические возможности;

- виды микроскопов, их назначение, разрешающая способность;

- ход лучей в световом и тёмнопольном микроскопах с иммерсионной системой и без неё;

- микрометрические приспособления и их назначение.

2. Морфология микроорганизмов:

- понятие, основные морфологические группы бактерий;

- методы изучения морфологии микроорганизмов.

3. Микроскопический анализ препаратов:

- способы подготовительной обработки предметных стёкол;

- приготовление мазков из агаровых и бульонных культур микроорганизмов, жидкого

(кровь) и вязкого (мокрота) материала;

- фиксация (назначение, методы);

- простая окраска;

- определение размеров бактерий.

9.2. Перечень контрольных вопросов:

№	Вопросы для самоподготовки	Целевые установки ответа на вопрос
1	Морфология микроорганизмов.	Рассказать об особенностях морфологии: - спирохет - микоплазм - хламидий - грибов - простейших
2.	Микрофлора полости рта.	Постоянная флора: Непостоянная флора: - Стрептококки Гр(-) палочки Гр(+) спорообр. - Стафилококки Эшерихии Бациллы - Вейлонеллы Аэробактер Клостридии - Нейссерии Клебсиеллы - Лактобациллы Псевдомонады - Бактероиды - Актиномицеты - Спирохеты - Грибы рода Кандида - Простейшие
3.	Роль различных микроорганизмов ротовой полости.	Назвать основных представителей микрофлоры, их роль в поддержании гомеостаза и участие в патологических процессах.

Приложение 1

Методы выявления спирохет и лептоспир

1. Метод изучения спирохет и лептоспир в нативном препарате.

Для исследования живых спирохет и лептоспир используется метод тёмного поля и прямая люминесцентная микроскопия.

Препараты для них готовят одинаково с небольшими различиями

- берут 1 каплю биосубстрата (кровь, вода, соскоб из язвы и пр.), наносят на стекло

- осторожно закрепляют покровным стеклом и устанавливают на столик темнопольного, либо люминесцентного микроскопа

- микроскопируют с иммерсионной системой.

Особенности методов

Микроскопия в тёмном поле

1. Конденсор Аббе в обычном световом микроскопе заменяют на специальный тёмнопольный. При его отсутствии модернизируют обычный. Для этого:

- из чёрной фотографической бумаги вырезают круг размером с 50 копеечную монету;

- наклеивают на середину верхней линзы конденсора строго посередине с круговым зазором для света;

- фиксируют конденсор в микроскопе.

2. Перед микроскопией на конденсор наносят каплю дистиллированной воды для предотвращения рассеивания света, но можно не наносить.

3. На покровное стекло препарата наносят каплю иммерсионного масла и микроскопируют.

4. При работе с большим объектом в биоматериале можно вместо ОИ-90 использовать один из сухих объективов (*7, * 10, *20, *40), а масло заменить дистиллированной водой.

При микроскопии на тёмном фоне видны серебристые движущиеся спирохеты.

Люминесцентная прямая микроскопия.

Особенности:

- При приготовлении препарата к биоматериалу для прижизненной окраски добавляют флюорохром акридин оранжевый в рабочем разведении 1:1000 и только после этого накрывают покровным стеклом. Микроскопируют в люминесцентном микроскопе МЛ-1 или МЛ-2 с набором пропускающих и запирающих фильтров для УФ-лучей.

- Вместо обычного иммерсионного масла используют нелюминисцирующее иммерсионное или его заменители (репелленты - дибутилфталат, диметилфталат). Микроскопируют в затемнённом помещении.

При микроскопии жизнеспособные клетки двигаются, имеют чаще зелёное свечение, нежизнеспособные и умирающие оранжевые и обездвижены. Оба метода особенно удобны при обнаружении лептоспир, которые невозможно окрасить.

Приложение 2