Инструкция к практической работе тема: Вирусы

ЦЕЛЬ:

• Изучить методы выявления вируса гриппа

• Изучить специфическую профилактику гриппа

• Изучить лабораторную диагностику заболеваний, вызванных парамиксовирусами

• Изучить специфическую профилактику заболеваний вызванных парамиксовирусами

• Изучить лабораторную диагностику заболеваний вызванных вирусом простого герпеса

• Изучить специфическую профилактику заболеваний вызванных вирусом простого герпеса

Задание № 1 Методы выявления вируса гриппа

Грипп - острая инфекция дыхательных путей, периодически приобретающая эпидемический характер. Интенсивные эпидемии вызываются, главным образом, вирусом типа А. Вирусы типа В порождают небольшие эпидемиологические вспышки, а типа С – крайне редкие спорадические заболевания, в основном у детей. Начинается заболевание с общих симптомов, чаще наблюдается лихорадка, озноб, головная и мышечная боль, разбитость, светобоязнь, слезотечение, жжение и боль при движении глаз. Позже присоединяются респираторные проявления болезни – кашель, насморк. С 3-4 дня начинается выздоровление, но возможны тяжелые осложнения (пневмония, бронхиты, поражение ЦНС, сердца и др. органов).

При заболеваниях, вызванных вирусом гриппа в лабораторию доставляется следующий материал: носоглоточная слизь.

Подготовительный этап:

1. Подготовить рабочее место согласно правил работы в вирусологической лаборатории.

2. Подготовить емкости с дез. растворами для обеззараживания предметов, используемых в процессе работы, согласно инструкции.

Основной этап:

В первые 5 дней с начала заболевания вирусы гриппа обнаруживаются в носоглотке. Их выделяют, заражая носоглоточным смывом 10-11-дневные куриные эмбрионы с последующим культивированием при температуре 33⁰С. Через 3-4 дня ставят РГА. При наличии гемагглютинации видовую принадлежность вирусов определяют с помощью РТГА, РН и РСК.

Выявить вирус можно также на первичных культурах почечных клеток обезьян, человека и телят.

Изредка прибегают к культивированию вирусов гриппа в организме хорьков и белых мышей у которых после интраназального заражения может развиваться гриппозная пневмония.

Серодиагностика. Противогриппозные антитела в крови больных появляются поздно, вследствие чего серологические реакции используют для ретроспективной диагностики. Обычно прослеживается динамика нарастания антител. С этой целью изучаются парные сыворотки, одна из них берется в первые дни заболевания, а другая – через 7-15 дней. Диагноз подтверждается четырехкратным увеличением титра антител в РСК, ИФА (у детей – двукратным).

Экспресс-диагностика. Она основана на обнаружении цитоплазматических включений и антигенов вирусов в цилиндрическом мерцательном эпителии носовой полости в РИФ и ИФА.

Риноцитоскопия. Мазки - отпечатки готовят из содержимого нижней носовой раковины. После высушивания препараты обрабатывают флюоресцирующими антигриппозными сыворотками и окрашивают по Романовскому – Гимзе. Исследуют под люминесцентным и иммерсионным микроскопами. Вирусные включения в мазках обработанных антигриппозной сывороткой становятся огненно-красными, а в окрашенных по Романовскому-Гимзе – сине-фиолетовыми.

Задание № 2 Специфическая профилактика гриппа

В настоящее время создано много гриппозных вакцин. Широко используется очищенная и концентрированная цельновирионная вакцина, содержащая гемагглютинин вируса гриппа А и В. Применяется она однократно и вводится подкожно в объеме 0,5 мл или двукратно – интраназально в том же объеме с интервалом 21-28 дней. Применяется также трехвалентная полимер-субъединичная вакцина Гриппол, содержащая поверхностные антигены вируса гриппа трех типов с иммуностимулятором полиоксидонием. Ее вводят детям с 3 лет и взрослым однократно подкожно по 0,5 мл. Специфическую профилактику гриппа у лиц старше 65 лет, взрослых и детей с хроническими заболеваниями почек, легких, сердца следует проводить очищенной инактивированной формолвакциной французской фирмы «Пастер-Мерье» Ваксигрип, содержащей вирус гриппа трех штаммов. Она выпускается в шприцах с одной дозой и во флаконах по 10, 20 и 50 доз. Взрослых и детей вакцинируют однократно, вводя им подкожно или внутримышечно 0,5 мл препарата, детям младше 10 лет – две инъекции по 0,25 мл с интервалом 1 мес.

Ограниченно профилактика гриппа проводится ремантадином, арбидолом, оксолином, интерфероном, иммуноглобулином. Эти же препараты могут назначаться и для лечения, особенно в первые два – три дня заболевания.