- •ТЕХНОЛОГІЇ МІКРОБНОГО СИНТЕЗУ
- •. Тема 2. Визначення активності
- •ВИЗНАЧЕННЯ АКТИВНОСТІ АНТИБІОТИКІВ
- •За одиницю антибіотичної активності бензилпеніциліну прийнято
- •МІКРООРГАНІЗМИ, ЯКІ УТВОРЮЮТЬ АНТИБІОТИКИ, ТА ПІДВИЩЕННЯ ЇХНЬОЇ ПРОДУКТИВНОСТІ
- •Пошук продуцентів антибіотиків
- •1. Виділення продуцентів вже відомих антибіотиків;
- •Для виділення мікроорганізмів- продуцентів з природних середовищ використовують:
- •Підвищення антибіотичної продуктивності мікроорганізмів
- •Зберігання штамів-продуцентів
- •Найбільш поширеними методами зберігання продуцентів антибіотиків (ферментів та інших біологічно активних речовин) є
- ••зберігання спор у вигляді водних суспензій в запаяних ампулах;
- •Система депонування штамів- продуцентів
- •Порядок депонування затверджений наказом Держпатенту України та Національної академії наук України в 1995
- •Вплив антибіотиків на штами- продуценти
- •Якщо концентрацію антибіотика в середо- вищі штучно збільшити, то мікроорганізм, що утворює даний
- •Мікроорганізми, що виділені з природ- них джерел і мають невисоку антибіотич-
- •КУЛЬТИВУВАННЯ МІКРООРГАНІЗМІВ ДЛЯ ОДЕРЖАННЯ АНТИБІОТИКІВ
- •Особливості біосинтезу антибіотиків у мікроорганізмів
- •В 2-й фазі (ідіофазі, фазі незбалансова-ного росту) спостерігається уповільнення накопичення біомаси, навіть її
- •Рис. 1. Схема двофазного процесу культивування
- •Основні біосинтетичні шляхи утворення антибіотиків
- •2. Антибіотики, що походять від двох чи трьох різних первинних метаболітів, які модифікуються
- •В результаті полімеризації утворюються антибіотики чотирьох типів:
- •3) терпеноїдні антибіотики, що утворюються з ацетатних субодиниць в шляху синтезу ізопреноїдних сполук;
- •Вплив умов середовища на антибіотичну продуктивність
- •Поживне середовище (ПС) повинно відповідати наступним вимогам:
- •Джерела азоту при культивуванні продуцентів антибіотиків
- •В натуральних середовищах невизначеного складу (кукурудзяний екстракт, меляса, соєве борошно) азот
- •Джерела вуглецю С при культивуванні продуцентів антибіотиків
- •Важливе значення має також співвідношення вуглецю С та азоту N в середовищі. Для
- •Важливе значення для утворення антибіотиків, що містять хлор ( Сl ) (хлортетрациклін, хлорамфенікол),
- •Спеціальні умови культивування для отримання антибіотиків
- •Змішана культура термофільних
- •– продукти обміну одного організму можуть бути використані іншим в якості джерела азоту,
- •– продукти життєдіяльності одного з мік- роорганізмів, що не утворює антибіотик, дещо притримують
- •В останні десятиріччя ХХ століття успішно розвинувся новий напрям у біосинтезі антибіотиків –
- •Спрямований біосинтез антибіотиків
- •Для спрямованого утворення переважно одного антибіотика з тих, що продукує обраний продуцент (або
- ••отримання мутантів вихідного продуцента, що утворюють модифіковані антибіотики.
- •Отримання деяких антибіотиків шляхом спрямованого синтезу:
- ••зміна співвідношення концентрацій джерел вуглецю та азоту (або ступеню аерації культури);
- •ПРОМИСЛОВЕ ОТРИМАННЯ АНТИБІОТИКІВ
- •Промислове виробництво пеніциліну
- •Автор промислового виробництва пеніциліну в СРСР
- •Київський завод медичних препаратів
- •Scientific classification Kingdom: Fungi Division: Ascomycota
- •Склад поживних середовищ, що можуть бути використані для біосинтезу пеніциліну
- •Умови біосинтезу пеніциліну
- •Для отримання бензилпеніциліну в якості попередника додають фенілоцтову кислоту або її похідні –
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (біосинтез)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (попереднє оброблення культуральної рідини)
- •Культуральна рідина містить 3-6% сухих речовин, з них 15 -30% пеніцилін.
- •Концентрування при екстрагуванні базується на великій розчинності бензилпеніциліну у вигляді кислоти в органічних
- •Вимоги до розчинників, що використовують для екстрагування бензилпеніциліну:
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (екстрагування пеніциліну)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (екстрагування пеніциліну)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (отримання кристалічних солей пеніциліну)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (отримання кристалічних солей пеніциліну)
- •Дякую за увагу!
КУЛЬТИВУВАННЯ МІКРООРГАНІЗМІВ ДЛЯ ОДЕРЖАННЯ АНТИБІОТИКІВ
21
Особливості біосинтезу антибіотиків у мікроорганізмів
Особливість біосинтезу антибіотиків мікроорганізмами полягає в тому, що цей процес відбувається за двохфазним принципом (рис. ) Ця закономірність характерна для більшості стрептоміцетів
і міцеліальних грибів. В 1-й фазі (фаза збалансованого росту, тропофаза)
відбувається процес накопичення біомаси продуцента.
22
В 2-й фазі (ідіофазі, фазі незбалансова-ного росту) спостерігається уповільнення накопичення біомаси, навіть її зменшен- ня. В період ідіофази відбувається дерепресія ферментів, що приймають участь у біосинтезі антибіотиків. Починається антибіотикоутворення.
23
Рис. 1. Схема двофазного процесу культивування
Streptomyces griseus
24
Основні біосинтетичні шляхи утворення антибіотиків
Механізми біосинтезу антибіотиків можна розділити на три основні категорії:
1. Антибіотики, що походять від одного первинного метаболіту. Шлях їх біосинтезу складається з послідовності реакцій, які модифікують вихідний метаболіт, як це має місце за синтезу амінокислот та нуклеотидів.
25
2. Антибіотики, що походять від двох чи трьох різних первинних метаболітів, які модифікуються та конденсуються з утворенням складної молекули.
3. Антибіотики, що є продуктами полімеризації декількох схожих метаболітів з утворенням основної структури, що згодом може модифікуватися.
26
В результаті полімеризації утворюються антибіотики чотирьох типів:
1) поліпептидні антибіотики, які утворюються шляхом конденсації амінокислот;
2) антибіотики, утворені з ацетат- пропіонатних одиниць в реакціях полімеризації, схожих на реакції біосинтезу жирних кислот;
27
3) терпеноїдні антибіотики, що утворюються з ацетатних субодиниць в шляху синтезу ізопреноїдних сполук;
4) аміноглікозидні антибіотики, що утворюються в реакціях конденсації, сходних з реакціями біосинтезу полісахаридів.
28
Вплив умов середовища на антибіотичну продуктивність
Для кожного продуценту антибіотика розробляється оптимальне поживне середовище, яке повинне забезпечува- ти максимальне накопичення продуцентом антибіотика.
29
Поживне середовище (ПС) повинно відповідати наступним вимогам:
•повноцінність;
•вміст доступних і дешевих компонентів;
•забезпечувати можливість ефективної фільтрації ;
•використання економічних методів виділення і очищення антибіотика.
30