- •ТЕХНОЛОГІЇ МІКРОБНОГО СИНТЕЗУ
- •. Тема 2. Визначення активності
- •ВИЗНАЧЕННЯ АКТИВНОСТІ АНТИБІОТИКІВ
- •За одиницю антибіотичної активності бензилпеніциліну прийнято
- •МІКРООРГАНІЗМИ, ЯКІ УТВОРЮЮТЬ АНТИБІОТИКИ, ТА ПІДВИЩЕННЯ ЇХНЬОЇ ПРОДУКТИВНОСТІ
- •Пошук продуцентів антибіотиків
- •1. Виділення продуцентів вже відомих антибіотиків;
- •Для виділення мікроорганізмів- продуцентів з природних середовищ використовують:
- •Підвищення антибіотичної продуктивності мікроорганізмів
- •Зберігання штамів-продуцентів
- •Найбільш поширеними методами зберігання продуцентів антибіотиків (ферментів та інших біологічно активних речовин) є
- ••зберігання спор у вигляді водних суспензій в запаяних ампулах;
- •Система депонування штамів- продуцентів
- •Порядок депонування затверджений наказом Держпатенту України та Національної академії наук України в 1995
- •Вплив антибіотиків на штами- продуценти
- •Якщо концентрацію антибіотика в середо- вищі штучно збільшити, то мікроорганізм, що утворює даний
- •Мікроорганізми, що виділені з природ- них джерел і мають невисоку антибіотич-
- •КУЛЬТИВУВАННЯ МІКРООРГАНІЗМІВ ДЛЯ ОДЕРЖАННЯ АНТИБІОТИКІВ
- •Особливості біосинтезу антибіотиків у мікроорганізмів
- •В 2-й фазі (ідіофазі, фазі незбалансова-ного росту) спостерігається уповільнення накопичення біомаси, навіть її
- •Рис. 1. Схема двофазного процесу культивування
- •Основні біосинтетичні шляхи утворення антибіотиків
- •2. Антибіотики, що походять від двох чи трьох різних первинних метаболітів, які модифікуються
- •В результаті полімеризації утворюються антибіотики чотирьох типів:
- •3) терпеноїдні антибіотики, що утворюються з ацетатних субодиниць в шляху синтезу ізопреноїдних сполук;
- •Вплив умов середовища на антибіотичну продуктивність
- •Поживне середовище (ПС) повинно відповідати наступним вимогам:
- •Джерела азоту при культивуванні продуцентів антибіотиків
- •В натуральних середовищах невизначеного складу (кукурудзяний екстракт, меляса, соєве борошно) азот
- •Джерела вуглецю С при культивуванні продуцентів антибіотиків
- •Важливе значення має також співвідношення вуглецю С та азоту N в середовищі. Для
- •Важливе значення для утворення антибіотиків, що містять хлор ( Сl ) (хлортетрациклін, хлорамфенікол),
- •Спеціальні умови культивування для отримання антибіотиків
- •Змішана культура термофільних
- •– продукти обміну одного організму можуть бути використані іншим в якості джерела азоту,
- •– продукти життєдіяльності одного з мік- роорганізмів, що не утворює антибіотик, дещо притримують
- •В останні десятиріччя ХХ століття успішно розвинувся новий напрям у біосинтезі антибіотиків –
- •Спрямований біосинтез антибіотиків
- •Для спрямованого утворення переважно одного антибіотика з тих, що продукує обраний продуцент (або
- ••отримання мутантів вихідного продуцента, що утворюють модифіковані антибіотики.
- •Отримання деяких антибіотиків шляхом спрямованого синтезу:
- ••зміна співвідношення концентрацій джерел вуглецю та азоту (або ступеню аерації культури);
- •ПРОМИСЛОВЕ ОТРИМАННЯ АНТИБІОТИКІВ
- •Промислове виробництво пеніциліну
- •Автор промислового виробництва пеніциліну в СРСР
- •Київський завод медичних препаратів
- •Scientific classification Kingdom: Fungi Division: Ascomycota
- •Склад поживних середовищ, що можуть бути використані для біосинтезу пеніциліну
- •Умови біосинтезу пеніциліну
- •Для отримання бензилпеніциліну в якості попередника додають фенілоцтову кислоту або її похідні –
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (біосинтез)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (попереднє оброблення культуральної рідини)
- •Культуральна рідина містить 3-6% сухих речовин, з них 15 -30% пеніцилін.
- •Концентрування при екстрагуванні базується на великій розчинності бензилпеніциліну у вигляді кислоти в органічних
- •Вимоги до розчинників, що використовують для екстрагування бензилпеніциліну:
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (екстрагування пеніциліну)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (екстрагування пеніциліну)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (отримання кристалічних солей пеніциліну)
- •Технологія виробництва бензилпеніциліну (отримання кристалічних солей пеніциліну)
- •Дякую за увагу!
ТЕХНОЛОГІЇ МІКРОБНОГО СИНТЕЗУ
ЛІКАРСЬКИХ ЗАСОБІВ
Лекцій – 38 годин, лабораторних робіт -38, диф. залік
1
. Тема 2. Визначення активності
антибіотиків
Одиниці біологічної активності антибіотиків.
Визначення антибіотичної активності мікроорганізмів.
Визначення антивірусної дії антибіотиків. Визначення протипухлинної дії антибіотиків.
Методи кількісного визначення антибіотиків
2
ВИЗНАЧЕННЯ АКТИВНОСТІ АНТИБІОТИКІВ
Одиниці біологічної активності антибіотиків
Величину біологічної активності антибіотиків
(протибактеріальної, антифунгальної і т.ін.) зазвичай виражають в умовних одиницях, що
містяться в 1 мл розчину (од/мл) чи в 1мг препарату (од/мг). За одиницю антибіотичної активності приймають мінімальну кількість
антибіотика, здатну пригнічувати розвиток чи затримувати ріст певної кількості клітин стандартного штаму тест-мікроба в одиниці об’єму поживного середовища.
3
За одиницю антибіотичної активності бензилпеніциліну прийнято
мінімальну кількість препарату, здатну
затримувати ріст золотистого стафілокока Staphylococcus aureus
(штам 209) в 50 мл поживного бульйону.
Для стрептоміцину одиниця активності буде іншою: мінімальна кількість антибіотика, що затримує ріст E. coli в 1 мл поживного бульйону.
4
.
5
.
6
МІКРООРГАНІЗМИ, ЯКІ УТВОРЮЮТЬ АНТИБІОТИКИ, ТА ПІДВИЩЕННЯ ЇХНЬОЇ ПРОДУКТИВНОСТІ
7
Пошук продуцентів антибіотиків
Найбільш багатим на організми, що утворюють антибіотики, є ґрунт. З нього найчастіше і виділяють продуценти антибіотиків.
Пошук продуцентів антибіотиків може бути спрямовано на вирішення наступних завдань:
8
1. Виділення продуцентів вже відомих антибіотиків;
2.Пошук нових антибіотиків, здатних проявляти біологічну дію стосовно конкретних організмів;
3.Виявлення продуцентів антибіотиків, що пригнічують в клітині певні мішені.
9
Для виділення мікроорганізмів- продуцентів з природних середовищ використовують:
1. Ізоляцію чистої культури мікроорганізмів та дослідження її антагоністичного впливу на необхідний тест-організм.
2. Висів ґрунту на поживний агар, попередньо засіяний тест-організмом.
3. Використання поживних середовищ, що містять антибіотики.
10