1,358 г сулеми розчиняють в 60 мл води, додають розчин 5 г йодиду калію в 10 мл води і доводять об’єм розчину водою до 100 мл.

5.5.1%-ий розчин пікринової кислоти:

1г пікринової кислоти C6H2(OH)(NO2)3 розчиняють у 99 мл води.

5.6.1%-ий розчин кремневовольфрамової кислоти (SiO2·12WO3·n·H2O):

1г кремневольфрамової кислоти розчиняють у воді і доводять об’єм водою до 100 мл.

5.7.10%-ий розчин NaOH:

10 г NaОН розчиняють у 90 мл дистильованої води.

5.8. 3%-ий водний розчин заліза окисного хлориду:

3 г заліза окисного хлориду FeCl3·6H2O розчиняють у воді і доводять об’єм водою до 100 мл.

5.9.1%-ий розчин желатину:

1г желатину розчиняють у 99 мл води.

5.10.10%-ий розчин натрію хлориду:

10 г NaCl розчиняють у 90 мл дистильованої води.

Лабораторна робота № 6

6.1.0,1 н. розчин хлористоводневої кислоти:

8,5 мл концентрованої хлористоводневої кислоти HCl розвести в 1 л води.

6.2. 8,3%-ий розчин хлористоводневої кислоти:

8,3 мл концентрованої хлористоводневої кислоти розвести в 91,7 мл дистильованої води.

Лабораторна робота № 7

7.1. Фосфатний буферний розчин (рН 7,0) стерильний:

Стерилізують в паровому стерилізаторі насиченою парою за температури 121°С протягом 15 хв. Розчин зберігають за температури +4 – 10°С.

7.2. Рекомендовані розчини і живильні середовища.

Нижче наведені склади розчинів і живильних середовищ, рекомендованих для проведення випробування на мікробіологічну чистоту та стерильністьлі карських препаратів.

Допускається використання сухих живильних середовищ того самого або аналогічного складу, які випускаються промисловістю.

Приготування чашок з твердим поживним середовищем. У чашку Петрі стерильно внести 8 – 10 мл розплавленого середовища. Охолодити за кімнатної температури до застигання агару. Швидко відкрити чашку, покласти кришку на

104

лабораторну тацю вниз вінцями та поставити на неї саму чашку із застиглим середовищем. Після того, як всі чашки будуть перенесені на тацю, просушити їх у сушильній шафі за температури 40 – 45°С протягом 40 – 60 хв. Після цього накрити чашки кришками та зберігати їх догори дном.

Густе живильне середовище № 1 (м’ясо-пептонний агар)

Допускається використання густого живильного середовища №1 замість

До м’ясної води додають пептон і натрію хлорид, розчиняють при нагріванні, вносять глюкозу, установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 7,3±0,2, кип’ятять протягом 1 хв, додають замочений заздалегідь агар, нагрівають до повного його розплавлення і фільтрують крізь ватно-марлевий фільтр. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температу-

До м’ясної води додають пептон і натрію хлорид, розчиняють при нагріванні, вносять глюкозу, встановлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило7,3±0,2, кип’ятять протягом 1 хв. Фільтрують крізь

Інгредієнти складу розчиняють у воді, установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 5,6±0,2, додають замочений заздалегідь агар, нагрівають до повного його розплавлення і фільтрують крізь ватномарлевий фільтр. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі 121°С протягом 15 хв. Після стерилізації додають 0,10 г бензилпеніциліну і 0,10 г тетрацикліну на 1 л середовища або перед стерилізацією додають хлорамфенікол із розрахунку 50 мг на 1 л живильного середовища.

105

Рідке живильне середовище № 3 (середовище збагачення для бактерій род. Enterobacteriaceae)

Інгредієнти складу, крім глюкози та індикаторів розчиняють у м’ясній воді при нагріванні, потім вносять глюкозу, додають 8 мл 1%-ого розчину фенолового червоного і 3 мл 0,5% розчину малахітового зеленого, установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 7,3±0,2, кип’ятять 1 хв, фільтрують крізь паперовий фільтр. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі 121°С протягом 15 хв.

Феноловий червоний 1%-ий розчин:

Наважку індикатора розтирають у ступці, додають невеликими порціями їдкий натр. Одержаний розчин переносять у мірну колбу на100 мл і доводять об’єм розчину водою до мітки. Зберігають у флаконі нейтрального світлозахисного скла за температури +4 – 10°С.

Малахітовий зелений 0,5% розчин:

Установлюють рН таким чином, щоб після нагрівання його значення становило 7,3±0,2. Нагрівають до повного розплавлення агару і кип’ятять від2 хв до 3 хв. Фільтрують крізь ватно-марлевий фільтр, потім нагрівають до моменту закипання. Охолоджують до температури від 45°С до 50°С і розливають у чашки Петрі.

Густе живильне середовище № 5 (вісмутсульфіт агар)

106

Установлюють рН таким чином, щоб після нагрівання його значення становило 7,6±0,2. Нагрівають до повного розплавлення агару і кип’ятять від3 хв до 5 хв. Охолоджують до температури від45°С до 50°С і розливають у чашки Петрі.

Рідке живильне середовище № 6 (для визначення ферментації глюкози)

Пептон і натрію хлорид розчиняють у м’ясній воді при нагріванні, вносять глюкозу, додають 8 мл 1% розчину фенолового червоного, встановлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 7,2±0,2, кип’ятять 1 хв, фільтрують крізь паперовий фільтр і розливають по4 – 5 мл у пробірки з поплавцями. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі121°С протягом 15 хв. Після закінчення стерилізації середовище швидко охолоджують.

Рідке живильне середовище №7 (для визначення відновлення нітратів у

Інгредієнти складу розчиняють у воді при нагріванні, встановлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 7,2±0,2, кип’ятять 1 хв, фільтрують крізь паперовий фільтр, розливають у пробірки по 4 – 5 мл. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі 121°С протягом 15 хв.

Рідке живильне середовище № 8 (для вирощування Pseudomonas aeruginosa

Інгредієнти складу, крім глюкози розчиняють у воді при нагріванні, вносять глюкозу, встановлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його зна-

107

чення становило 7,3±0,2, кип’ятять 1 хв, фільтрують крізь паперовий фільтр. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі 121°С протягом 15 хв.

Густе живильне середовище № 9 (для виявлення пігменту піоціаніну)

Інгредієнти складу, крім гліцерину, розчиняють у воді і залишають на15 хв. Потім вносять гліцерин, ретельно перемішують, розчиняють при нагріванні, встановлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 7,2±0,2, кип’ятять 1 хв, додають замочений заздалегідь агар, нагрівають до повного його розплавлення, фільтрують крізь ватно-марлевий фільтр. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі 121°С протягом 15 хв.

Інгредієнти складу розчиняють у воді, вносять 2,5 мл 1% розчину фенолового червоного, установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його

збагачення бактерій род. Enterobacteriaceae)

Установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 6,9±0,1. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі121°С протягом 15 хв.

Рідке живильне середовище № 12 (селенітове середовище сухе для виділен-

108

Інгредієнти складу вносять у воду очищену, установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило7,5±0,2. Нагрівають до моменту закипання і розливають у стерильні пробірки.

Густе живильне середовище №13 (трицукровий агар із залізом для іден-

Установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 7,2±0,1. Розливають у пробірки по5 – 7 мл. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі121°С протягом 15 хв. Охолоджують так, щоб одержати стовпчик середовища висотою від 2 см до 2,5 см і скошену поверхню.

Густе живильне середовище № 14 (для виявлення ферментації цитрату)

Усі інгредієнти складу, крім агару і бромтимолового синього, поміщають у посудину місткістю 1500 мл, розчиняють у 500 мл свіжоприготованої очищеної води, додають агар, доводять до 1000 мл свіжоприготованою водою очищеною і нагрівають до розплавлення агару. Установлюють рН таким чином, щоб після стерилізації його значення становило 7,2±0,1, додають 40 мл 0,2%-ого водного розчину бромтимолового синього, перемішують і розливають у пробірки по 5 – 7 мл. Стерилізують у паровому стерилізаторі при температурі121°С протягом 15 хв. Охолоджують так, щоб одержати скошену поверхню.

Рідке живильне середовище №15 (бульйон Хоттінгера для визначення ін-

долу). Використовують готове живильне середовище.

109