Ситуационные задачи

1. Концентрация свободных аминокислот в растворе белка равна 0,01 мкмоль/л. Растворитель удален нагреванием и замещен таким же объемом серной кислоты. Через 24 ч концентрация свободных аминогрупп оказалась равной 0,04 мкмоль/л. Какой процесс происходит, можно ли его выразить количественно?

2. Как выяснить, произошло ли полное осаждение белка из биологической жидкости, в которой создано 50%-ное насыщение сульфатом аммония (после отделения осадка жидкость прозрачна)?

3. Укажите суммарный заряд (+, 0 или -) для лейцина, треонина, цистеина и лизина при следующих рН: а) 1,5; б) 6,0; в) 8,5; г) 11,0; исходя из данных о значении их рI.

4. В каком направлении будут двигаться в электрическом поле (к катоду, аноду или оставаться на старте) следующие белки:

а) яичный альбумин при рН 5,0;

б) лактоглобулин при рН 5,0 и 7,0;

в) химотрипсиноген при рН 5,0; 9,5 и 11?

Изоэлектрические точки белков соответственно равны: а) 4,6; б) 5,2; в) 9,5.

5. При определении молекулярной массы белка методом ультрацентрифугирования получены следующие величины: 13100, 13640, 13250, 13790. Вычислите среднее квадратическое отклонение и среднюю ошибку опыта. Представьте данные о молекулярной структуре белка в виде показателя М  т.

6. Необходимо из смеси белков сконцентрировать (не нарушая нативности) один из белков с известным значением изоэлектрической точки. Как действовать, располагая набором кислот, оснований и этанолом?

7. Определите суммарный заряд пентапептида при рН 7,0:

Глу – Арг – Лиз – Вал – Асп

Как изменится суммарный заряд этого пептида:

а) при рН <<7,0;

б) при рН >>7,0.

8. Сравните направление движения в электрическом поле двух пептидов при рН 7,0:

а) Вал – Глу – Ала;

б) Лей – Асн – Арг.

8. Сравните растворимость двух пептидов при рН 7,0: Сер–Цис–Глу–Тир–Асп и Вал–Арг–Мет–Фен–Тир.

8. Подберите к пронумерованному методу разделения и очистки белков их соответствующие свойства, на которых основан данный метод:

а) различия по величине заряда;

б) различия по молекулярной массе;

в) оба свойства;

г) ни одно из свойств.

А) гель – фильтрация;

Б) электрофорез в полиакриламидном геле;

В) аффинная хроматография;

Г) ионообменная хроматография.

8. В ядерных белках – гистонах содержится большое количество аминокислотных остатков аргинина и лизина, а в белке крови альбумине – много остатков глутаминовой и аспарагиновой кислот. Ответьте на вопросы:

- в каких средах (>, < или = 7,0) лежит ИЭТ этих белков;

- с каким из двух белков может взаимодействовать Са²⁺?

8. Установите соответствие:

а) ультрацентрифугирование;

б) гель – фильтрация;

в) электрофорез в полиакриламидном геле;

г) ионообменная хроматография;

д) аффинная хроматография.

А) используется для отделения белка от соли;

Б) метод основан на присоединении белка к иммобилизованному лиганду;

В) в основе метода лежит использование различий в молекулярной массе и заряде белков.

8. Смесь аминокислот, содержащая лизин, валин, лейцин, аспарагиновую кислоту, гистидин, серин, была подвергнута фракционированию методом электрофореза на бумаге при рН 6,2. Какие аминокислоты будут перемещаться к аноду (А), катоду (К), останутся на линии старта (С)?

8. В каком направлении будут мигрировать в процессе электрофореза на бумаге при рН 1,6; 6,5; 11,0 следующие пептиды:

а) арг-гли-ала-ала;

б) лиз-ала-гли-асп;

в) гис-гли-ала-глу;

г) асп-гли-ала-глу;

д) глн-гли-ала-арг?

15. Почему кислое молоко в отличие от свежего при кипячении сворачивается (т.е. белок молока казеин выпадает в осадок)? В свежем молоке молекулы казеина имеют отрицательный заряд.