Лабораторные работы

1. Влияние температуры на каталитическую активность амилазы слюны.

2. Специфичность действия ферментов.

3. Влияние рН на действие ферментов.

4. Количественное определение амилазы мочи.

5. Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны.

Ситуационные задачи

1. Салицилат ингибирует каталитическое действие глутаматдегидрогеназы. Определите путем графического анализа приведенных ниже данных, является ли ингибирование конкурентным или неконкурентным. Вычислите К_м для фермента.

Концентрация субстрата, ммоль/л	1,5	2,0	3,0	4,0	8,0	16,0
V образования продукта в отсутствии салицилата, мг/мин	0,21	0,25	0,28	0,33	0,44	0,40
-//- присутствии салицилата, мг/мин	0,08	0,10	0,12	0,13	0,16	0,18

2. Из приведенных ниже данных для ферментативной реакции определите, является ли действие ингибитора конкурентным или неконкурентным. Вычислите К_м для фермента и V_max.

Концентрация субстрата, ммоль/л	2,0	3,0	4,0	10,0	15,0
Скорость образования продукта в отсутствии ингибитора, мкг/ч	139	179	213	213	190
-//- присутствии ингибитора, мкг/ч	88	121	149	213	190

3. Какой кофермент содержит никотиновую кислоту:

а) тиаминпирофосфат;

б) никотинамидадениндинуклеотид;

в) пиридоксальфосфат;

г) флавинаденинмононуклеотид?

4. Для каких ферментов активатором являются ионы Mg:

а) фосфорилазы;

б) амилазы;

в) гексокиназы;

г) креатинкиназы;

д) карбоксипептидазы?

5. Для каких ферментов активатором являются ионы Zn:

а) карбоксипептидазы;

б) лактатдегидрогеназы;

в) алкогольдегидрогеназы;

г) глутаматдегидрогеназы;

д) карбоангидразы?

6. Изобразите графически зависимость [V] от [S] без ингибитора и в присутствии конкурентного ингибитора в концентрациях 1 и 2 ммоль/л. Сопоставьте значения Км. О чем говорит увеличение Км в присутствии ингибитора?

7. Изобразите график зависимости [V] от [S] в присутствии неконкурентного ингибитора в двух концентрациях (1 и 2 ммоль/л). Обратите внимание на неизменность Км!

8. Изобразите, каким образом, избыток субстрата может вызывать торможение ферментативной реакции.

9. Изобразите графики зависимости [V] от [S] для аллостерического фермента в присутствии активатора и ингибитора порознь: как объясняет теория индуцируемой адаптации фермента к субстрату (теория Кошланда) сигмовидный характер кривых?

10. У пациента К. в сыворотке крови повышена активность ЛДГ, ЛДГ₅, АЛТ и ЩФ. Выскажите предположение о том, какой орган вовлечен в патологический процесс.

11. У пациента Н., поступившего в приемное отделение, через 3 ч после острого начала заболевания в сыворотке крови в 1,5 раза повышена активность КФК. К исходу первых суток отмечалось двукратное повышение АСТ, ЛДГ и ЛДГ₁. К 3-й неделе содержание названных ферментов вернулось к норме, но возросла активность -ГТТП. О каком патологическом процессе идет речь, о чем свидетельствует рост активности -ГТТП?

12. Пациента с жалобами на боль в груди в течение 3 дней госпитализировали с подозрением на инфаркт миокарда. Результаты биохимического анализа крови подтвердили диагноз. Опишите метод энзимодиагностики и объясните:

- какие особенности состава и распределения ферментов лежат в основе метода энзимодиагностики;

- активность каких ферментов определяли в крови пациента, и для какого из этих ферментов она была наибольшей на третьи сутки болезни, напишите реакции, катализируемые этими ферментами?

13. С какой целью у пациента с жалобами на резкую боль в груди определяют в крови количество и соотношение изоферментов КК?

14. Сравните структуру прозерина (антихолинэстеразного препарата) и ацетилхолина (медиатора, осуществляющего передачу нервных импульсов в холинергических нервах).

- наличие каких групп позволяет отнести эти вещества к структурным аналогам? Укажите вид ингибирования холинэстеразы прозерином.

- подтверждением диагноза миастении – заболевания, характеризующегося мышечноцй слабостью и патологической утомляемостью, служит улучшение внутримышечного введения прозерина. Почему состояние больного при этом улучшается?

Прозерин:

Ацетилхолин: