1. Инфекция, инфекционный процесс, инфекционная болезнь: отличия от других болезней Инфекция=Инфекционный процесс. Современное научное определение инфекционного процесса дано В.И. Покровским: «Инфекционный процесс - это комплекс взаимных приспособительных реакций в ответ на внедрение и размножение патогенного микроорганизма в макроорганизме, направленных на восстановление нарушенного гомеостаза и биологического равновесия с окружающей средой». Таким образом, участники инфекционного процесса - микроорганизм-возбудитель заболевания, организм хозяина (человека или животного) и определенные, в том числе социальные, условия внешней среды. Общепринятый термин «инфекционные болезни» ввел немецкий врач Кристоф Вильгельм Гуфеланд. Основные признаки инфекционных болезней: - специфический возбудитель как непосредственная причина заболевания;      - бактерии;      - риккетсии;      - хламидии;      - микоплазмы;      - грибы;      - вирусы;      - прионы.      - простейшие      - гельминты. - контагиозность (заразность) или возникновение нескольких (многих) заболеваний, обусловленных общим источником инфекции; - нередко склонность к широкому эпидемическому распространению; - цикличность течения (последовательная смена периодов болезни); - возможность развития обострений и рецидивов, затяжных и хронических форм; - развитие иммунных реакций к Аг возбудителя; - возможность развития носительства возбудителя

2. Принципы классификации инфекционных болезней: по этиологии: вирусные микоплазменные хламидийные риккетсиозные бактериальные спирохетозные микозы протозоозы Гельминтозы и инфестации (болезни, вызванные членистоногими), строго говоря, к инфекционным болезням не относятся.

по экологии: антропонозы (ОРЗ, брюшной тиф, корь, дифтерия) зоонозы (сальмонеллезы, бешенство, клещевой энцефалит) сапронозы(легионеллез, мелиоидоз, холера, НАГ-инфекция, клостридиозы) Эксперты ФАО/ВОЗ (1969) рекомендуют в рамках сапронозов выделять еще и сапрозоонозы, возбудители которых имеют две среды обитания – организм животных и внешнюю среду, а их периодическая смена и обеспечивает нормальную жизнедеятельность этих возбудителей как биологического вида. Некоторые авторы предпочитают называть сапрозоонозы зоофильными сапронозами. К этой группе инфекций в настоящее время относят сибирскую язву, синегнойную инфекцию, лептоспироз, иерсиниоз, псевдотуберкулез, листериоз и др.

классификация Громашевского: 1) кишечные инфекции (с фекально-оральным механизмом передачи); 2) инфекции дыхательных путей (с аэрозольным механизмом передачи); 3) кровяные, или трансмиссивные, инфекции (с трансмиссивным механизмом передачи с помощью переносчиков-членистоногих); 4) инфекции наружных покровов (с контактным механизмом передачи).

По степени клинических проявлений:

1. манифестные; 2. инаппарантные.

Инаппарантные формы инфекционных болезней протекают бессимптомно, хотя в организме человека наблюдаются иммунологические, а также функциональные и морфологические изменения, типичные для соответствующего заболевания. Выраженные в малой степени, они не приводят к манифестации патологического процесса, и внешне человек остается здоровым.

По степени тяжести:

1. легкие; 2. Средней тяжести 3 тяжелые 4 крайне тяжелые

По течению:

1. типичные;

2. атипичные;

3. циклические;

4. ациклические;

5. молниеносные;

6. острые;

7. подострые, или затяжные;

8. хронические.

3. Цикличность инфекционного процесса, обострения и рецидивы Цикличность течения свойственна большинству инфекционных заболеваний. Она выражается в последовательной смене определенных периодов болезни: - 1)инкубационного (скрытого); Скрытый промежуток времени между моментом заражения (проникновения возбудителя в организм) и появлением первых клинических симптомов заболевания. Длительность инкубационного периода различна при разных инфекциях и даже у отдельных больных с одним и тем же инфекционным заболеванием.

зависит: - от вирулентности возбудителя и его инфицирующей дозы; - локализации входных ворот; - состояния организма человека перед заболеванием, его иммунного статуса. Определение сроков карантина, проведение профилактических мероприятий и решение многих других эпидемиологических вопросов проводят с учетом продолжительности инкубационного периода инфекционного заболевания. - 2)продромального (начального); Обычно продолжается не более 1-2 дней болезни, его наблюдают не при всех инфекциях. В продромальном периоде клинические признаки заболевания не имеют четких специфических проявлений: повышение температуры тела; головная боль; миалгии; артралгии; недомогание; разбитость; снижение аппетита и т.д. - 3)периода основных проявлений (разгара болезни); Этот период характеризуется появлением и (часто) нарастанием наиболее характерных, специфических для конкретного инфекционного заболевания клинических и лабораторных признаков. Степень их выраженности максимальна при манифестных формах инфекции. Различная диагностическая значимость симптомов позволяет подразделить их на решающие, опорные и наводящие. Решающие симптомы характерны именно для конкретной инфекционной болезни (например, пятна Филатова-Коплика-Бельского при кори, геморрагическая звездчатая сыпь с элементами некроза при менингококцемии). Опорные симптомы типичны для данного заболевания, но их можно встретить и при некоторых других (желтухи при вирусных гепатитах, менингеальные симптомы при менингитах и т.д.). Наводящие симптомы менее специфичны и сходны при ряде инфекционных заболеваний (лихорадка, головная боль, озноб и др.). - 4)угасания симптомов (ранней реконвалесценции); Следует за периодом разгара при благоприятном течении инфекционного заболевания. Характеризуется постепенным исчезновением основных симптомов. Одно из его первых проявлений - снижение температуры тела. Оно может происходить быстро, в течение нескольких часов (кризис), или постепенно, на протяжении нескольких дней заболевания (лизис). -5) выздоровления (реконвалесценции). Развивается после угасания основных клинических симптомов. Клиническое выздоровление почти всегда наступает раньше, чем полностью исчезают морфологические нарушения, вызванные заболеванием. В каждом конкретном случае длительность последних двух периодов инфекционного заболевания различна, что зависит от многих причин: - формы болезни и ее тяжести; - эффективности проводимого лечения; - особенностей иммунологического реагирования организма больного и т.д. При полном выздоровлении восстанавливаются все функции, нарушенные вследствие инфекционного заболевания, при неполном выздоровлении сохраняются те или иные остаточные явления. Обострением инфекционного заболевания считают повторное ухудшение общего состояния больного с нарастанием характерных клинических признаков заболевания после их ослабления или исчезновения. Если основные патогмоничные признаки заболевания вновь развиваются у больного уже после полного исчезновения клинических проявлений болезни, говорят о ее рецидиве.

3. Носительство патогенных микроорганизмов, его виды; лечебно-профилактические мероприятия: Носительство - это своеобразная форма инфекционного процесса, при которой макроорганизм после интервенции возбудителя не способен полностью его элиминировать, а микроорганизм не в состоянии больше поддерживать активность инфекционного заболевания.

Механизмы развития носительства до настоящего времени изучены недостаточно, методы эффективной санации хронических носителей до сих пор в большинстве случаев не разработаны. Предполагают, что в основе формирования носительства лежит изменение иммунных реакций, при котором проявляются избирательная толерантность иммунокомпетентных клеток к Аг возбудителя и неспособность мононуклеарных фагоцитов к завершенному фагоцитозу.

Виды носительства: транзиторное и реконвалесцентное Транзиторное (бессимптомное, здоровое) носительство - однократное (случайное) обнаружение в организме человека патогенного (или любого другого) микроорганизма в тканях, считающихся стерильными (например, в крови). Факт транзиторного носительства определяют в серии последовательных бактериологических анализов. При этом существующие в настоящее время методы обследования не позволяют выявить клинические, патоморфологические и лабораторные признаки заболевания. Носительство патогенных микроорганизмов возможно на этапе выздоровления от инфекционной болезни (реконвалесцентное носительство). Оно характерно для ряда вирусных и бактериальных инфекций. В зависимости от длительности реконвалесцентное носительство разделяют на острое (до 3 мес после клинического выздоровления) и хроническое (свыше 3 мес). В этих случаях носительство протекает бессимптомно или эпизодически проявляется на субклиническом уровне, но может сопровождаться формированием функциональных и морфологических изменений в организме, развитием иммунных реакций. Профилактика: Лиц,  переболевших инфекционной   болезнью,   выписывают из инф. б-цы только после неоднократной проверки на носительство возбудителей  перенесенного  заболевания.   Выявленные в коллективе носители возбудителей инфекции проходят курс лечения для освобождения от болезнетворных микроорганизмов.  Ведется учет и лабораторное  обследование  лиц,   перенесших инфекционное кишечное заболевание. Установлена система обследования на носительство лиц, по характеру работы    представляющих    опасность   в распространении   инфекционных   заболеваний    (работников    пищевых    предприятий   и  водоснабжения,   детских  и леч.    учреждений).    Лиц,    работающих в указанных учреждениях, при выявлении у них Н. в. и. отстраняют от работы до   прекращения   носительства

3. Правила изоляции и госпитализации инфекционных больных Изоляция инфекционных больных противоэпидемическое мероприятие, направленное на разобщение с окружающими людьми больных инфекционными болезнями, а также лиц, подозрительных на эти болезни или имевших контакт с больными, для предупреждения дальнейшего распространения инфекции. Больные изолируются на весь период заразности; при подозрении на инфекционную болезнь — в зависимости от уточненного диагноза; общавшиеся с больным — на срок, равный максимальной продолжительности инкубационного периода. Применяются следующие формы разобщения: госпитализация, изоляция на дому, помещение в изолятор, обсервация. При одних инфекционных болезнях госпитализация является обязательной, при других — проводится по эпидемиологическим и клиническим показаниям. Направление на госпитализацию оформляется врачами поликлиники или службы скорой помощи. В направлении указываются сведения об общении с инфекционными больными, о выезде в страны, где регистрируется подозреваемая инфекционная болезнь, у детей — данные о плановых прививках. Госпитализация осуществляется специальным транспортом, по экстренным показаниям — службой скорой помощи. После транспортировки больного автомашина подвергается санобработке. Больные карантинными болезнями госпитализируются в специально оборудованные стационары. Изоляции в индивидуальных боксах подлежат больные преимущественно капельными инфекционными болезнями при не уточненном диагнозе (например, подозрение на корь, краснуху), при смешанной инфекции, наличии контакта с больным другой инфекционной болезнью (больной вирусным гепатитом имел контакт с больным ветряной оспой), а также при отсутствии соответствующего профильного отделения. В остальных случаях госпитализация осуществляется в профилированные по нозологическому принципу отделения (например, отделения для больных гепатитом, дизентерией, гриппом). Устройство и режим инфекционного отделения (больницы) должны обеспечивать предупреждение внутрибольничной инфекции (Внутрибольничные инфекции), заражения персонала, а также распространения возбудителя инфекции за пределы стационара. Во избежание внутрибольничной инфекции в рамках отделения организуются диагностические палаты, изоляторы. Больные инфекционной болезнью, вызванной разными серотипами (подтипами) возбудителя (например, при вирусном гепатите, дизентерии), помещаются в разные палаты. С целью профилактики реинфекции применяют принцип одномоментного заполнения палат (например, при скарлатине). Сроки выписки из стационара помимо клинических показаний определяются продолжительностью заразного периода при данной инфекционной болезни или устанавливаются на основании бактериологических исследований фекалий, мочи, желчи, мазков из зева, мокроты. При изоляции на дому больному следует выделить отдельную комнату или часть комнаты, отделенную ширмой, посуду и другие бытовые принадлежности, проводить текущую дезинфекцию, проветривать помещения. Лица, осуществляющие уход за больным, информируются о необходимых мерах профилактики возможного заражения (ношение марлевой маски, мытье рук после контакта с больным и его выделениями и т.д.). Помещение в изолятор является временной мерой разобщения больного до госпитализации или изоляции на дому, применяется в коллективах (например, в детских учреждениях), а также в поликлиниках. Для изоляторов используют специально оборудованные или приспособленные помещения. Лица, имевшие контакт с больными карантинными болезнями, подлежат обсервации . При других инфекционных болезнях контактировавшие с больным работники, связанные с производством, хранением и реализацией пищевых продуктов, а также работники детских учреждений и некоторых коммунальных служб (водоснабжение, парикмахерские и т.п.) отстраняются от работы, детям запрещается посещать детские учреждения; с целью ранней диагностики проводятся бактериологическое, серологическое и другие исследования, устанавливается медицинское наблюдение, включающее выяснение жалоб, осмотр, термометрию. Лица, перенесшие некоторые инфекционные болезни (брюшной тиф, дизентерию, вирусные гепатиты, бруцеллез и др.), также находятся под медицинским наблюдением для выявления возможных рецидивов, хронического течения болезни, хронического носительства возбудителей болезни.

4. Основные виды лабораторной диагностики инфекционных болезней. методы прямого обнаружения — микроскопическое и бактериологическое исследования; методы косвенного доказательства — серологические исследования, направленные на обнаружение специфических антигенов или антител в сыворотке крови и различных секретах организма больного. Существует 6 основных методов микробиологической диагностики: 1) микроскопический — позволяет обнаружить возбудителя непосредственно в материале, взятом от больного. Для этого мазок окрашивают различными способами. Он используется, в частности, для обнаружения в крови возбудителей малярии, возвратного тифа, лептоспироза. Спинномозговую жидкость исследуют при гнойном и туберкулезном менингите, слизь из зева и носа — при дифтерии, ангине Венсана, кал — при амебиазе, балантидиазе, лямблиозе; мочу — при лептоспирозе. Палочки чумы, сибирской язвы можно увидеть в пунктате чумного бубона и мазках-отпечатках, взятых из сибиреязвенного карбункула; при микроскопии мазка пунктата из костного мозга и селезенки, грануляций из язвы можно обнаружить лейшмании; в мокроте — микобактерии туберкулеза. Преимущество микроскопического метода заключается в его быстроте. 2) бактериологический — заключается в посеве исследуемого материала на питательные среды. Этот метод позволяет выделить возбудителя в чистом виде и изучить его морфологические признаки, ферментативную активность и идентифицировать его (гемокультуры палочки брюшного тифа, паратифов А и В, при обнаружении менингококков, пневмококков, палочки инфлюэнцы в спинномозговой жидкости.); 3) биологический метод — осуществляют путем выделения возбудителя при заражении лабораторных животных, которые восприимчивы к данному заболеванию. Этот метод дорогостоящий, поэтому применяется ограниченно; 4) серологические методы исследования — основаны на выявлении специфических иммунных антител в сыворотке крови больного, т.е. иммунологические реакции: РСК, РНГА, ИФА - используются при большинстве инфекционных заболеваний, но могут давать ложные результаты. Кроме того, часто могут быть использованы только для ретроспективной диагностики - нарастание титра антител в несколько раз через 2 недели заболевания гриппом, когда клинические проявления заболевания уже практически сошли на нет. 5) аллергический метод — ставятся кожно-аллергические пробы, введение аллергена накожно или внутрикожно; используются для диагностики туберкулеза, туляремии, лепры и т. д. 6) молекулярно-биологический (ПЦР): Также остаются актуальными биохимические, клинические анализы крови, мочи, др. жидкостей.

5. Использование ПЦР в диагностике инфекционных болезней: Широко определяются: Вирусы: герпес-вирусы(I,II,IV,V,VIII), папиллома-вирус, гриппа. Бактерии: микобактерии, нейсерии, хеликобактер, хламидии, микоплазмы. Грибы: кандида.   Плюсы: + можно сравнительно быстро (неск. суток) диагностировать медленно растущие и трудновыращиваемые микроорганизмы: tbc, вирусы + возбудитель инфекции можно обнаружить в любой биологической среде организма, в том числе и материале, получаемом при биопсии; + возможна диагностика инфекционных болезней на самых ранних стадиях заболевания; + возможна диагностика болезней вызываемых УПМ + возможна количественная оценка результатов исследований (сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале); + возможно определение чувствительности к антибиотикам + высокая чувствительность метода; Минусы: - из-за высокой чувствительности могут быть ложноположительные результаты. - могут быть ложноотрицательные результаты в случае некорректного направления на анализ. - высокая цена.

6. Экспресс-методы диагностики инфекционных болезней Иммунохроматография(тест-полоски QuickVue) визуально напоминают тесты на беременность. Принцип схожий: определяется: антигены вируса гепатита В, антитела к вирусам гепатитов В и C, ВИЧ 1 и ВИЧ 2, вирусу Эпштейна-Барра, сифилис, туберкулез, хламидиоз, стрептококках А и В, клостридийный токсин, Helicobacter pylori Реакция иммунофлюоресценции (РИФ, Реакция Кунса): АТ метятся флюорохромом. Видны в люминисцентный микроскоп. Существует два типа реакции иммунофлюоресценции — прямая и непрямая. - Прямая иммунофлюоресценция (ПИФ) — в этом случае непосредственно специфическое антитело мечено флюорохромом и реакция проходит в один этап, что значительно сокращает сроки исследования. - Непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ) — в этом случае специфическое антитело не имеет метки, а для выявления комплекса антиген-антитело, образовавшегося на первом этапе, используют вторые меченые антитела, специфичные к конкретным антителам. определяются: - почти все типичные возбудители. Иммуноферментный анализ - исследуются антитела к известному антигену. Используется планшетка с фиксированным очищенным антигеном и антительные антитела связанные с ферментом К, который заставляет окрашиваться краситель: определяется: уровень АТ при большинстве инфекций. Наиб. часто - ВИЧ, сифилис.

7. Использование микроскопии в диагностике инфекционных болезней. Методика - ПРИКАЗ МИНЗДРАВА СССР ОТ 22.04.85 N 535 Широко для бактерий, микозов, простейших, гельминтов. Для кишечных инфекций - не информативна. Вирусы - можно цитомегалы обнаружить, тельца Бабеша-Негри (посмертно). Для кала и микозов используется микроскопия неокрашенных препаратов. Окраски: по Граму, Романовскому-Гимзе, Циль-Нильсену. Бактериоскопическое исследование крови, мочи, спинномозговой жидкости, слизи из зева и носа, кала и различных патологических субстратов на присутствие возбудителя применяют при многих инфекционных болезнях. Этот метод имеет довольно ограниченное применение, хотя и очень важен. Он используется, в частности, для обнаружения в крови возбудителей малярии, возвратного тифа, лептоспироза. Спинномозговую жидкость исследуют при гнойном и туберкулезном менингите, слизь из зева и носа — при дифтерии, ангине Венсана, кал — при амебиазе, балантидиазе, лямблиозе; мочу — при лептоспирозе. Палочки чумы, сибирской язвы можно увидеть в пунктате чумного бубона и мазках-отпечатках, взятых из сибиреязвенного карбункула; при микроскопии мазка пунктата из костного мозга и селезенки, грануляций из язвы можно обнаружить лейшмании; в мокроте — микобактерии туберкулеза. Преимущество бактериоскопического метода заключается в его быстроте. Результаты анализа могут быть получены через несколько часов. При некоторых заболеваниях (малярия, эпидемический цереброспинальный менингит и др.) возбудители могут быть обнаружены в организме больного уже в 1-й день болезни, что очень важно для своевременной диагностики и лечения. Значительно расширились возможности, бактериоскопической диагностики благодаря обработке препаратов специфическими сыворотками, содержащими антитела к данному возбудителю, меченные флуорохромами (иммунофлуоресцентный метод) или ферментами (иммуноферментный метод). При этом меченые антитела соединяются с антигеном, который выявляется при иммунофлуоресцентном методе под люминесцентным микроскопом, а при иммуноферментном методе — по окрашиванию продукта ферментативной реакции после введения субстратно-индикаторной смеси.

8. Бактериологическая диагностика инфекционных болезней Методика - ПРИКАЗ МИНЗДРАВА СССР ОТ 22.04.85 N 535 Бактериологический метод диагностики основан на выделении возбудителя из крови, спинномозговой жидкости, мокроты, слизи из зева и носа, кала, мочи, желчи больного, а при летальных исходах — из кусочков органов, которые засевают на специальные питательные среды. Бактериологическая диагностика широко используется для исследования слизи из зева и носа на дифтерийные бактерии, для выделения возбудителей кишечных инфекций (например, холеры, дизентерии, сальмонеллезов, эшерихиозов) из кала больного, возбудителей пневмонии — из мокроты и в других случаях. При этом учитывают особенности предполагаемой инфекции, место избирательной локализации возбудителя и пути его выделения в окружающую среду. Исследование дает положительные результаты уже в первые часы или дни болезни. Однако окончательный ответ лаборатория при большинстве инфекционных болезней сообщает лишь через 2—4 дня, а при бруцеллезе, туберкулезе — через 3—4 недель. Это зависит от сроков, требующихся для роста микроорганизмов и их идентификации (биохимической и серологической). Каждый микроб для своего роста требует соответствующей питательной среды. В зависимости от того, какой микроб предполагают выделить (что определяется при клиническом и эпидемиологическом обследовании больного) , выбирают соответствующую питательную среду. Иногда посев производят одновременно на несколько питательных сред. Ценность результатов бактериологических исследований во многом определяется тем, правильно ли взят материал у больного и правильно ли он доставлен в лабораторию. Инфекционный материал собирают в стерильную посуду, соблюдая правила асептики. Материал для исследования в самые короткие сроки должен быть доставлен в лабораторию. Если такой возможности нет, его нужно сохранять в холодильнике при +4 °С или добавлять консервант. В некоторых случаях посев необходимо производить ex tempore (при коклюше, менингококковой инфекции, гонорее). После выделения и идентификации возбудителей, как правило, определяют их чувствительность к антибиотикам и другим химиопрепаратам.

   Инфекция	Материал для исследования	Срок взятия материала	Среда для первичного посева
   Бруцеллез	Кровь на гемокультуру для серологического исследования	С 1-го дня до конца лихорадки С 1-го дня 2—3 раза с недельным интервалом	Бульон с глюкозой и глицерином, бульон D;печеночный и кровяной агар
   Брюшной тиф и пара-тифы А и В	Кровь на гемокультуру	С 1—2-го дня болезни до конца лихорадки	Среда Рапопорт, желчный бульон, бульон с 1 % глюкозы, стерильная дистиллированная вода
   	для серологического исследования	С 1-го дня 2—3 раза с недельным интервалом	—
   	Испражнения	Конец 2-й, начало 3-й недели и конец реконвалесценции	Среды Вильсона — Блера, Левина, Эндо; среды обогащения Мюллера, Кауфмана
   	Моча	Конец 2-й, начало 3-й недели и конец реконвалесценции	Среды Вильсона — Блера, Левина, Эндо; среды обогащения: Мюллера, Кауфмана
   Возвратный тиф	Кровь для микроскопии	Со 2-го дня	—
   Газовая гангрена	Отделяемое раны, ткань, кровь	С 1-го дня до конца заболевания	Глюкозо-кровяной агар, среды Тароцци, Виллиса и Хобса, Вильсона — Блера Анаэробные условия!
   Гонорея	Экссудаты из мочевого канала, шейки матки, конъюнктивы	С 1-го дня до конца заболевания	Кровяной, шоколадный, сывороточный агары
   Дизентерия	Испражнения	С 1-го дня до конца заболевания	Среды Плоскирева, Эндо, Левина; селенитовая среда обогащения
   Дифтерия	Пленка, мазок из глотки	С 1-го дня до конца заболевания	Кровяной агар, среды Леффлера, Ру, Бучина, кровяные среды с тел-луритом, полужидкая сывороточная среда обогащения с теллури-том
   Инфекции, вызываемые бактериями из рода Haemophilus	Слизь из зева, мокрота, спинномозговая жидкость	С 1-го дня до конца заболевания	Агары с гретой кровью по Левинталю, с нативной кровью, среда Файлдса Картофельно-глицериновый или казеиново-угольный агар
   Коклюш	Слизь из зева, мазки из глотки, гортани	С 1-го дня до конца заболевания
   Легионеллез	Мокрота, плевральная жидкость, бронхиальный смыв, легочная ткань		Угольно-дрожжевой агар, ФЖ агар; биологическая проба на гвинейских свинках
   	Кровь для серологического исследования (реакция непрямой иммуно-флуоресценции)	С 1-го дня 3—4 раза с недельным интервалом
   Лептоспироз	Кровь на гемокультуру для серологического исследования	С первых дней »	Сывороточный бульон
   	Моча	На протяжении всей болезни

9. Серологическая диагностика инфекционных болезней

Различают реакции, в которых по известным антителам определяют неизвестные антигены, и реакции, направленные на поиск неизвестных антител по известным антигенам. Перспективны методы, основанные на обнаружении в ранний период болезни микробных антигенов в различных субстратах. Поиска антигена: Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА) с антительным эритроцитарным диагностикумом, которая применяется для диагностики дизентерии и некоторых других инфекций. При этой реакции находящийся на поверхности танизированных эритроцитов специфический иммуноглобулин связывается с гомологичным антигеном. Эритроциты человека и животных (нативные и формалинизированные), предварительно обработанные танином, приобретают повышенную способность адсорбировать на своей поверхности белковые субстанции. В качестве адсорбентов кроме эритроцитов используются латекс, коллодий, бентонит и др. Реакция латекс-агглютинации применяется для выявления антигенов пневмококков, палочки инфлюэнцы, менингококков. При положительной реакции частицы латекса выпадают в осадок. РИФ (р-я Кунса) позволяет непосредственно наблюдать происходящую реакцию в люминесцентный микроскоп и, следовательно, судить о наличии и локализации антигена. Прямой ИФА = ELISA (enzymelinked immunosorbent assay) Антитела, связывающиеся с искомым антигеном, помечены ферментом, который делает видимым краситель. Поиск антител: используется для постановки ретроспективного диагноза, так как такие реакции становятся положительными к концу 1—2-й недели болезни. В дальнейшем их титр обычно нарастает, что является в диагностическом отношении очень важным показателем. Поэтому серологические реакции рекомендуется повторять с интервалом в 5—10 дней. Реакции считаются положительными в том случае, если титр их повышается при повторном исследовании в 4 раза и более. Однако при длительном заболевании (бруцеллез, туляремия, хроническая пневмония) динамика серологических реакций менее отчетлива, поэтому приходится ориентироваться на высоту титра антител. Диагностическую ценность имеют лишь определенные уровни антител. Например, для диагностики кишечных инфекций в РНГА значение имеет титр 1:320—1:640 и выше (сальмонеллезы, дизентерия). При этом необходимо учитывать эпидемическую обстановку в данной местности и принимать во внимание «нормальный» уровень антител у здорового населения. В РНГА, которая используется для поиска антител, при адсорбции на эритроцитах применяются не иммуноглобулины, а полисахаридные или белковые антигенные субстанции. Такие эритроцитарные диагностикумы называют антигенными. Помимо реакций агглютинации в диагностике бактериальных инфекций используют РСК, реакцию непрямого гемолиза, реакцию непрямой иммунофлуоресценции, непрямой иммуноферментный метод, реакцию нейтрализации и другие серологические методы. Для более объективной оценки результатов серологических исследований используют дифференцированное исследование антител различной физико-химической природы. Антитела одной и той же иммунологической специфичности могут принадлежать к различным классам иммуноглобулинов и вследствие этого качественно отличаться по функциональной активности.

12. Биологические методы диагностики инфекционных болезней. состоит в заражении различным материалом (клиническим, лабораторным) лабораторных животных для индикации возбудителя, а также для определения некоторых свойств микроорганизмов, характеризующих их патогенность (токсигенность, токсичность, вирулентность). В качестве лабораторных животных используют белых мышей, белых крыс, морских свинок, кроликов и др.

Воспроизведение заболевания у животного -- абсолютное доказательство патогенности выделенного микроорганизма (в случае бешенства, столбняка и др.). Поэтому биологическая проба на животных является ценным и достоверным диагностическим методом, особенно при тех инфекциях, возбудители которых в исследуемых биологических средах организма человека содержатся в малых концентрациях и плохо или медленно растут на искусственных средах. Классический метод при ботулизме — биологическая проба на мышах. Для опыта отбирают партию из 5 животных. Первое заражают только исследуемым материалом, остальных — исследуемым материалом с введением 2 мл 200 ME антитоксической сыворотки типов А, В, С и Е. При наличии в материале токсина выживает животное, получившее антисыворотку, нейтрализовавшую токсин соответствующего типа. Для идентификации токсинов также используют РПГА с антительным диагностикумом (эритроциты, сенсибилизированные антитоксинами соответствующих типов). Биологическая проба представляет «золотой стандарт» в диагностике туберкулёза. Морским свинкам подкожно или внутрибрюшинно вводят 1 мл исследуемого материала (например, мокрота, отделяемое свищей и т.д.).Через 1-2 мес развивается генерализованная инфекция туберкулеза с летальным исходом.