29. Молекулярная диагностика. Цель. Задачи. Методы.

???

30. Молекулярная гибридизация. Полимеразная цепная реакция.

Метод основам на выявлении в биоматериале от больного из внешней среды или препарат из чистых культур после донательноетъю нуклеиновых кислот (МЮ. определение их рода, вила и типа специфичности Применяют два метола:

I. Молекулярная гибридизация (MB) процесс, в котором одноцепочечная ПК исследуемою микроорганизма (мишень) при взаимодействии с комплементарным фрагментом ПК. включающей метку (зонд) образует двухцепочечный комплекс Назначение метода:

выявление степени сходства различных ДНК Применяется для идентификации микроорганизмов, особенно тех, которые трудно и медленно растут (микоплазмы. хламидии. вирусы )

Материал для исследования:

гной; кровь; отделяемое из уретры: моча, испражнении, биопунктаты тканей и органов: объекты окружающей среды (вода, почта). Методы гибридизации:

- в растворе,

- на фильтре,

- на стекле.

Зонд - это двухцепочечные или одноцепочечные фрагменты ДНК меченые затонной, флюорисцентной или ферментной.

II ПЦР (полимеразная цепная реакция) - что способ быстрого получения множественных копий специфической последовательности ДНК бактерий, грибов, вирусов до количество, достаточного для идентификации другими молекулярно-биологическими методами Назначение:

• индикация микроорганизмов в объектах внешней среды, пищевых продуктов, материале от больных,

• идентификация микроорганизмов.

• генетическое типирование,

• выявление генов вирулентности. Материал для исследования тог же Основные компоненты:

• исследуемая проба ДНК;

• смесь ДНТФ (дезоксинуклеотилтрифосфат),

• достраивание с помощью ДНК - полимеразы:

• праймеры - синтетические фрагменты ДНК;

• специфический буфер;

• минеральное масло;

• мембрана.

31. Учение об инфекции. Условия возникновения инфекционного процесса. Отличительные признаки инфекционных заболеваний. Типы инфекций.

Инфекция (лат. infectio— заражение), или инфекционный процесс, представляет собой совокупность физиологических и патологических адаптационных и репарационных реакций, которые возникают и развиваются в макроорганизме в процессе взаимодействия с патогенными микроорганизмами, вызывающими нарушения его внутренней среды и физиологических функций.

Отличия инфекционных заболеваний от неинфекционных:

1. Причина заболевания – живой агент, при этом каждая болнзнь имеет своего возбудителя.

2. Сложные процессы взаимодействия между патогенными микроорганизмами и продуктами их жизнедеятельности – токсинами, ферментами – с одной стороны, и клетками, тканями и органами организма хозяина с друой.

Условия возникновения:

1. Инфицирующая доза заболевания – минимальное количество микробных клеток, способных вызвать инфекционный процесс.

2. Микроб должен попасть во входные ворота, т.е. орган в котором он может размножаться.

3. Патогенность - способность микроба вызывать инфекционный процесс у хозяина.

4. Степень патогенности – вирулентность – индивидуальный штаммовый признак.

Типы инфекций:

1. В зависимости от хозяина:

а) инф. растений;

б) инф. животных;

в) инфекции людей

2. В зависимости от возбудителя:

а) бактериозы

б) микозы

в) вирусные болезни

г) протозоозы

д) паразитозы

3. В зависимости от тяжести:

а) микробоносительство

б) бессимптомные формы инфекций (латентная)

в) сама инфекция.

4. По длительности течения:

а) острые инфекции – короткий инкубационный период, выражены признаки заболевания, относительно короткое течение (2-3 месяца). Иммунный ответ хорошо выражен. (ангина)

б) первично-хронические инфекции – длительный инкубационный период, медленное начало, нет цикличности, иммунный ответ слабо выражен. (склерома)

в) вторично, или острохронические. 1-я стадия протекает остро, часть больных выздоравливает, а у части болезнь переходит в хроническую форму.

г) меделенные инфукции – вирусной или преонной этиологии. 100% летальность (СПИД).

5. По кратности заражения:

а) инфекция с однократным заражением организма

б) суперинфекция – заражение тем же микробом, но до выздоровления.

в) реинфекция – заражение тем же микроорганизмом, но после выздоровления.

г) рецидив – возврат клинических проявлений болезни без повторного заражения за счет оставшихся в организме возбудителей. (остеомиелит, возвратный тиф).

6. По числу возбудителей:

а) моноинфекции

б) смешанные инфекции

в) вторичная ифекция – вторичное заражение другим микробом на фоне продолжительного заболевания.

7. По пути проникновения:

а) экзогенная

б) эндогенная – активация микроба, содержащегося в организме.

в) аутоинфекция – за счет микробов, составляющих микрофлору.

8. По месту заражения:

а) внебольничные

б) внутрибольничные

9. По источнику заражения:

а) антропонозы (корь, коклюш)

б) зоонозы – истинные инфекции животных.

в) сапронозы – истинные заражения – внешняя среда.