5). Количественное определение общего фибриногена весовым методом.

Диагностическое значение анализа:

Нормальное значение 2 – 4 г/л. Повышение концентрации наблюдается при менструа-ции, беременности; болезни почек; при реакциях острой фазы; коллагенозы; острый инфаркт миокарда; лучевая болезнь; онкологические процессы, особенно рак легкого. Концентрация снижается при наследственном дефиците фибриногена (α -, β – гипофибриногенемия), болез-ни печени на стадии печеночно-клеточной недостаточности; ДВС–синдроме; состояниях после кровотечения; заболеваниях, сопровождающихся поражением костного мозга; после приема препаратов, содержащих фенобарбитал, стрептокиназу, урокиназу.

Ход работы:

В пробирке смешать 100 μл тромбопластина, 100 μл 5% раствора CaCl₂ и 1000 μл плазмы. Инкубировать в водяной бане при температуре 37 ⁰ С до образования сгустка. Полученный сгусток извлекаем из пробирки и высушиваем при комнатной температуре 5 – 7 минут. Затем с помощью фильтровальной бумаги удаляем остатки жидкости из сгустка и взвешиваем его на торсионных весах. Концентрацию фибриногена рассчитать по формуле:

С ф. = m х К

где:

m – масса сгустка;

К – коэффициент пересчета для измерения в г/л. К = 0,222

или по таблице (см. Приложение).

Результаты:

Выводы:

6). Определение протромбинового времени.

Принцип метода:

Тромбопластин (фактор III, тромбокиназа) превращает протромбин плазмы крови в присутствии Ca ²⁺ в активный фермент тромбин, трансформирующий фибриноген плазмы крови в нерастворимый фибрин.

Диагностическое значение анализа:

В норме время потребления протромбина 13 – 18 секунд. Укороченное протромбино-вое время может быть обусловлено дефицитом одного из плазменных белков, участвующих в образовании тромбопластина или дефицитом фактора тромбоцитов (фактор III). Добавле-ние к исследуемой плазме недостающего в ней фактора исправляет дефект тромбопластино-образования.

Ход работы:

В пробирках №1 и №2 прогреть на водяной бане при 37 ⁰ С в течении 1 минуты по 100 μл контрольной и опытной плазмы соответственно. Добавить по 200 μл предварительно доведенного до 37 ⁰ С приготовленного Техпластина и начать отсчет времени свертывания до образования фибрина.

Результаты:

Выводы:

7). Международное нормализованное отношение (мно).

Принцип метода:

МНО определяют исходя из протромбинового отношения (ПО) и международного индекса чувствительности (МИЧ), значение которого индивидуально для каждой серии тромбопластина, указывается в паспорте. Для расчета МНО необходимо предварительно вычислить протромбиновое отношение (ПО) по формуле:

ПО = К х	ПВ опыт
	ПВ контроль

где:

ПВ _опыт – протромбиновое время опытной пробы;

ПВ _{контроль} – протромбиновое время контрольной пробы;

К – нормализованный коэффициент. Конкретное значение К приведено в паспорте.

В норме протромбиновое отношение составляет 0,9 – 1,3.

МНО рассчитывают по формуле:

МНО = ПО МИЧ

или можно воспользоваться таблицей (см. Приложение).

Диагностическое значение анализа:

Нормальное МНО близко к 1,0. МНО определяют при контроле за непрямыми антико-агулянтами. При лечении антикоагулянтами непрямого действия МНО достигает 2,0 – 3,5, в зависимости от клинических показаний. Чем выше МНО, тем значительнее полученная гипокоагуляция и тем чаща и опаснее геморрагические осложнения.

Результаты:

Выводы: