I.I. Живые вакцины.

Живые вакцины содержат жизнеспособные штаммы патогенных мик­робов, ослабленные до степени, исключающей возникновение заболе­вания, но полностью сохранившие антигенные и иммуногенные свой­ства. Такие штаммы микроорганизмов называют аттенуированными. Вак­цинные штаммы микроорганизмов, сохраняя способность размножать­ся, вызывают развитие бессимптомной вакцинальной инфекции. Реак­цию организма на введение живой вакцины расценивают не как болезнь, а как вакцинальный процесс.

Живые вакцины используют для профилактики таких заболеваний, как полиомиелит, корь, паротит, грипп, чума, туберкулез, бруцеллез, си­бирская язва и др.

Для получения аттенуированных штаммов микроорганизмов исполь­зуют следующие методы.

1. Культивирование высокопатогенных для человека штаммов путем последовательных пассажей через культуры клеток или организм животных, либо путем воздействия во время роста и размножения микробов физическими и химическими факторами. В качестве та­ких факторов могут быть использованы необычная температура, неблагоприятные для роста питательные среды, ультрафиолето­вое облучение, формалин и др. факторы. Подобным образом бы­ли получены вакцинные штаммы возбудителя сибирской язвы, ту­беркулеза. Путем длительного пассирования через мозг кролика

вируса уличного бешенства Пастер получил фиксированный ви­рус бешенства, который был максимально вирулентен для кроли­ка и минимально вирулентен для человека, собак, сельскохозяй­ственных животных.

2. Выявление и селекция штаммов микроорганизмов, утративших в естественных условиях вирулентность для человека (вирус оспо- вакцины).

3. Создание вакцинных штаммов микроорганизмов с помощью ме­ тодов генной инженерии путем рекомбинации геномов вирулен­ тного и невирулентного штаммов.

Преимуществом живых вакцин является высокая напряженность и длительность создаваемого иммунитета. Недостатком живых вакцин яв­ляется возможность тяжелых осложнений у отдельных привитых (см. разд. 5).

1.2. И нактивированные вакцины.

Инактивированные вакцины делят на корпускулярные и химичес­кие.

Корпускулярные вакцины (убитые) содержат взвесь цельных мик­робных клеток, инактивированных физическими и химическими мето­дами. Для инактивации используют нагревание, ультрафиолетовое об­лучение, формалин, фенол, спирт, ацетон, мертиолят и др. Корпуску­лярные вакцины применяют для профилактики таких заболеваний, как брюшной тиф, холера, коклюш и др.

Химические вакцины содержат специфические антигены, извлечен­ные из микробной клетки с помощью химических веществ. Из микроб­ных клеток извлекают протективные антигены, представляющие собой иммунологически активные вещества, способные при введении в орга­низм обеспечивать формирование специфического иммунитета. Протек­тивные антигены находятся либо на поверхности микробных клеток, ли­бо в клеточной стенке, либо на клеточной мембране. По химической структуре они представляют собой либо гликопротеиды, либо белково-полисахаридно-липидные комплексы. Извлечение антигенов из микроб­ных клеток осуществляется различными способами: экстрагированием кислотой, гидроксиламином, осаждением антигенов спиртом, сернокис­лым аммонием, фракционированием. Полученная таким путем вакцина содержит специфические антигены в высокой концентрации и не содер­жит балластных и токсических субстанций. Химические вакцины вво-

дятся с адъювантами. Адъюванты - это вещества, которые сами по себе не обладают антигенными свойствами, но при введениии с каким-либо антигеном усиливают иммунный ответ на данный антиген.

1.3.Анатоксины.

Анатоксины получают из бактериальных экзотоксинов путем обра­ботки их формалином и теплом. При такой обработке токсины утрачи­вают токсичность, но сохраняют антигенные и иммуногенные свойства. Анатоксины адсорбируют на гидроокиси аллюминия и в таком виде ис­пользуют. Гидроокись аллюминия является примером адъюванта. Ана­токсины применяют для создания искусственного антитоксического им­мунитета. Подобные вакцины используют для профилактики дифтерии, столбняка, газовой гангрены, стафилококковой инфекции.

1.4.Искусственные вакцины.

Работы по получению искусственных вакцин проводятся в несколь­ких направлениях. Одно из них — создание искусственных вакцин пу­тем соединения слабоиммуногенных очищенных антигенов с молекула­ми неприродных полиэлектролитов. Второе направление — создание син­тетических вакцин путем синтеза коротких цепочек аминокислот, ответ­ственных за иммуногенность (вакцина против японского энцефалита).

1.5.Рекомбинантные вакцины.

Рекомбинантные вакцины - это вакцины, разработанные на основе генно-инженерных методов. Принцип создания генно-инженерных вак­цин включает выделение природных генов антигенов или их активных фрагментов, встройку этих генов в геном простых биологических объ­ектов (бактерии, например, кишечная палочка, дрожжи, крупные виру­сы). Необходимые для приготовления вакцины антигены получают при культивировании биологического объекта, который является продуцен­том антигена. Подобные вакцины получены для профилактики гепатита В, герпес-инфекции и др.

Кроме профилактических вакцин в практике используются лечеб­ные вакцины (гонококковая, бруцеллезная, стафилококковая). Это уби­тые вакцины. Также используются аутовакцины. Они готовятся из ус­ловно-патогенных микробов, выделенных из организма больного.

Таблица 1

Вакцины, выпускаемые в Российской Федерации

Виды вакцин	Инфекции, для которых применяются вакцины
Живые вакцины	Бруцеллез, грипп, корь, лихорадка Ку, желтая лихорадка, эпидемический па­ротит, полиомиелит, сибирская язва, ту­беркулез, сыпной тиф, туляремия, чума
Убитые(инактивированные)вакцины	Бешенство, брюшной тиф, грипп, кле­щевой энцефалит, коклюш, холера, леп-тоспироз, гепатит А, сыпной тиф, герпес
Химические вакцины	Менингококковая инфекция, холера, брюшной тиф, протейная и стафилокок­ковая инфекции
Анатоксины	Дифтерия, столбняк, газовая гангрена, ботулизм, холера, стафилококковая и синегнойная инфекции
Рекомбинантные вакцины	Гепатит В

2. Препараты, содержащие антитела - сыворо­точные препараты

Классификация препаратов, содержащих антитела

• Лечебные сыворотки.

• Иммуноглобулины.

• Гамма-глобулины.

• Препараты плазмы.

Различают два источника получения специфических сывороточ­ных препаратов:

1. гипериммунизация животных (гетерологичные сывороточные пре­ параты);

2. вакцинация доноров (гомологичные препараты).

2.1. Гетерологичные сывороточные препараты.

5 Для изготовления гетерологичных сывороточных препаратов исполь­ зуют в основном крупных животных, преимущественно лошадей. Лоша­ ди обладают высокой иммунологической реактивностью, от них в срав­ нительно короткий срок можно получить сыворотку, содержащую анти­ тела в высоком титре. Кроме этого, введение лошадиного белка челове­ ку дает наименьшее количество побочных реакций. Животные других видов используются редко. Годные к эксплуатации в возрасте от 3 лет и выше животные подвергаются гипериммунизации, т.е. процессу мно­ гократного введения возрастающих доз антигена с целью накопления в крови животных максимального количества антител и поддержания его на достаточном уровне в течение возможно более длительного време­ ни. В период максимального нарастания титра специфических антител в крови животных осуществляют 2-3 кровопускания с интервалом в 2 дня. Кровь берут из расчета 1 литр на 50 кг веса лошади из яремной ве­ ны в стерильную бутыль, содержащую антикоагулянт. Полученная от лошадей-продуцентов кровь передается в лабораторию для дальней­ шей обработки. Плазма отделяется на сепараторах от форменных эле­ ментов и дефибринируется раствором хлористого кальция. Использо­ вание цельной гетерологичной сыворотки сопровождается аллергичес­ кими реакциями в форме сывороточной болезни и анафилаксии. Одним из путей уменьшения побочных реакций сывороточных препаратов, а также повышения их эффективности является их очистка и концентра­ ция. Сыворотку очищают от альбуминов и некоторых глобулинов, ко­ торые не относятся к иммунологически активным фракциям сывороточ­ ных белков. Иммунологически активными являются псевдоглобулины с электрофоретической подвижностью между гамма- и бета-глобулина­ ми, к этой фракции относятся антитоксические антитела. Также к им­ мунологически активным фракциям относятся гамма-глобулины, в эту фракцию входят антибактериальные и антивирусные антитела. Очистка сывороток от балластных белков проводится по методу «Диаферм-3». При использовании этого метода сыворотка очищается путем осажде­ ния под влиянием сернокислого аммония и путем пептического перева­ ривания. Помимо метода «Диаферм-3», разработаны и другие (Ультра­ ферм, Спиртоферм, иммуносорбции и др.), имеющие ограниченное при­ менение

Содержание антитоксина в антитоксических сыворотках выражает­ся в международных единицах (ME), принятых ВОЗ. Например, 1 ME

противостолбнячной сыворотки соответствует ее минимальному коли­честву, нейтрализующему 1000 минимальных смертельных доз (DLm) столбнячного токсина для морской свинки массой 350 г. 1 ME проти-воботулинического антитоксина - наименьшее количество сыворотки, нейтрализующее 10000 DLm ботулинического токсина для мышей мас­сой 20 г. 1 ME противодифтерийной сыворотки соответствует ее мини­мальному количеству, нейтрализующему 100 DLm дифтерийного токси­на для морской свинки массой 250 г.

В препаратах иммуноглобулинов IgG является основным компонен­том (до 97%). lgA, igM, IgD входят в препарат в очень малых количес­твах. Выпускаются также препараты иммуноглобулинов (IgG), обога­щенные IgM и IgA. Активность препарата иммуноглобулина выражает­ся в титре специфических антител, определяемых одной из серологичес­ких реакций и указывается в наставлении по применению препарата.

Гетерологичные сывороточные препараты применяют для лечения и профилактики инфекционных заболеваний, вызываемых бактериями, их токсинами, вирусами. Своевременное раннее применение сыворотки мо­жет не дать развиться болезни, удлиняется срок инкубации, появивше­еся заболевание имеет более мягкое течение, снижается смертность.

Существенным недостатком использования гетерологичных сыво­роточных препаратов является возникновение сенсибилизации организ­ма к чужеродному белку. Как указывают исследователи, к глобулинам сыворотки лошади в России сенсибилизировано более 10% населения. В связи с этим повторное введение гетерологичных сывороточных пре­паратов может сопровождаться осложнениями в виде различных аллер­гических реакций, самой грозной из которых является анафилактичес­кий шок. Для выявления чувствительности пациента к лошадиному бел­ку ставят внутрикожную пробу с разведенной 1:100 лошадиной сыво­роткой, которую специально изготавливают для этой цели. Перед вве­дением лечебной сыворотки пациенту внутрикожно на сгибательную по­верхность предплечья вводят 0,1 мл разведенной лошадиной сыворотки и наблюдают за реакцией в течение 20 минут.