
- •Содержание
- •Тема 1 Общая физиология крови 2
- •Тема 1Общая физиология крови л/р1. Методы механического обездвиживания мелких грызунов. Техника взятия крови, подсчета форменных элементов у человека и крысы.
- •Методы обездвиживания мелких грызунов
- •Устройство смесителя
- •Устройство и подготовка счетной камеры (гемоцитометра)
- •Техника взятия капллярной крови у крыс
- •Техника взятия капллярной крови у человека
- •Л/р2. Определение гематокрита методом Уинторба.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Тема 2Физиология эритроцитов л/р3. Подсчет эритроцитов.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Л/р4. Определение содержания гемоглобина в крови.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Л/р5. Определение границ осмотической устойчивости эритроцитов, наблюдение осмотического гемолиза.
- •1. Пластиковые пеналы для обездвиживания крыс, скарификаторы, ножницы, вата, спирт этиловый 96%, диствода, йод, моток ниток, фильтровальная бумага.
- •Л/р6. Агрегация эритроцитов в микроциркуляторном русле.
- •Тема 3Физиология лейкоцитов л/р7. Подсчет лейкоцитов крови.
- •Л/р8. Освоение техники приготовления мазка крови, его фиксации и окраски. Подсчет лейкоцитарной формулы и лейкоцитарного профиля.
- •Тема 4Физиология тромбоцитов л/р9. Коагулометрия.
- •Тема 5Иммунные реакции л/р10. Определение групповой принадлежности крови
- •Основные источники, использованные при подготовке методических рекомендаций:
Устройство и подготовка счетной камеры (гемоцитометра)
Камеры предназначены для подсчета форменных элементов крови и клеточных элементов спинно-мозговой жидкости. Камеры состоят из толстого предметного стекла с нанесенными на него поперечными прорезями, образующими три поперечно расположенные плоские площадки (рис. 1).
Средняя площадка камеры продольной прорезью разделена на две, каждая из которых имеет выгравированную на ней сетку. Ее плоскость ниже боковых площадок на 0,1 мм в камере Горяева и на 0,2 мм в камере Фукса-Розенталя. Плоскости боковых площадок служат для притирания покровного стекла до появления т.н. Ньютоновских колец. После притирания покровного стекла над средней площадкой создается камера, закрытая с двух боковых сторон. С двух других сторон остаются щели (капиллярные пространства), через которые заполняют камеру.
Сетка Горяева (рис. 1) содержит 225 больших квадратов (15 рядов по 15 больших квадратов в каждом). 25 из 225 больших квадратов разделены на маленькие со стороной 1/20 мм и площадью 1/400 мм2. Высота столба жидкости над маленьким квадратиком составляет 1/10 мм, а объем – 1/4000 мм3. Для определения количества форменных элементов в мм3 используют формулу (1).
Х=4000Ах/В (1)
где Х — искомое количество форменных элементов в 1 мм3; х – количество сосчитанных форменных элементов; В — количество сосчитанных малых квадратов; А — разведение крови.
Сетка Фукса-Розенталя (рис. 1) разделена на одинаковые квадраты, которые не разграфлены и сгруппированы по 16. Каждая такая группа ограничена тройными линиями. Для определения количества форменных элементов в мм3 используют формулу (2).
Х=хА (2)
где Х — количество форменных элементов в 1 мм3; х — количество подсчитанных форменных элементов.
Перед заполнением камеры ее и покровное стекло необходимо вымыть водой и насухо вытереть. Затем шлифовальное стекло притереть к камере так, чтобы появились радужные кольца, т.к. только при этих условиях будут соблюдены необходимая высота и тем самым объем камеры. Перед заполнением камеры первую каплю из смесителя снимают фильтровальной бумагой. Подносят кончик смесителя к краю покровного стекла, капиллярными силами капля затягивается под стекло и заполняет камеру. После заполнения камеры выжидают 1-2 минуты (пока осядут форменные элементы) и начинают подсчет. Во время подсчета форменных элементов недопустимо наличие пузырей воздуха на сетке камеры – это снижает точность.
Техника взятия капллярной крови у крыс
Кровь для исследования берут из хвоста белой крысы, которую обездвиживают в пластиковом пенале. В течение 1-2 минут мягко массируют хвост крысы, потом дезинфицируют его спиртом и отрезают ножницами мягкие ткани кончика хвоста (1,0-1,5 мм). Первую каплю вытирают ватой, а следующую используют для работы. После взятия крови ранку обрабатывают йодом.
Техника взятия капллярной крови у человека
Безымянный палец левой руки легко массируют, подушечку пальца обрабатывают спиртом, потом слегка сжимают и делают прокол кожи. Первую каплю вытирают ватой, а следующую используют для работы. После взятия крови ранку обрабатывают спиртом.
Рекомендации к оформлению.
Коротко запишите название л/р, ее цель и ход работы. Зарисуйте фрагмент сетки Горяева и Фукса-Розенталя, смесители. В выводах обоснуйте необходимость использования различных камер. Возможно, какие-то особенности отдельных этапов взятия крови не описаны в методичке. Укажите их в выводах.