Краснуха: вирусологическая диагностика Вирусологический метод

Патологический материал:

• носоглоточный смыв

• кровь

• моча

• кал

• органы погибшего плода

Культивирование: в культуре клеток

Индикация: интерференция с цитопатическим вирусом

	заражение культуры клеток патологическим материалом
	
	через 7 - 10 дней заражают её вирусом ЭКХО или везикулярного стоматита
не развивается ЦПД		развивается ЦПД
		
есть рубивирус		нет рубивируса

Идентификация:

• РТГА

• РН

• РСК

• РИФ

Серологический метод

Определение в сыворотке крови антител

• реакция радиального гемолиза (см. выше)

• РН (нейтрализация гемолитической активности вируса краснухи)

Важную роль играет определение в сыворотке пациента IgM (который свидетельствует о свежем случае заболевания, а у новорожденного - о внутриутробном заражении)

Раньше IgM определяли, используя методы фракционирования сыворотки (гель-фильтрацию или центрифугирование в градиенте плотности сахарозы) с последующей постановкой РТГА раздельно с фракцией IgM и IgG.

В последнее время для этой цели используют чисто иммунологические методы, не требующие фракционирования сыворотки:

• Идентификация иммобилизованного антигена:

1. связывание Ag вируса краснухи с поверхностью пластика

2. инкубация с сывороткой крови пациента

3. промывка

4. инкубация с мечеными антителами против IgM (поликлональными)

5. промывка

метка осталась		метка не осталась
		
есть IgM		нет IgM

• Метод «захвата» антител:

1. связывание с поверхностью пластика антител против IgM

2. инкубация с сывороткой пациента

3. промывка

4. инкубация с Ag вирусом краснухи

5. промывка

6. инкубация с мечеными антителами к вирусу краснухи

7. промывка

метка осталась		метка не осталась
		
есть IgM		нет IgM

В качестве метки для антител используется:

• пероксидаза (ИФА)

• ¹²⁵I (РИА).