12. Определение ов в воде и пищевых продуктах с помощью

ПХР-МВ.

А. ИНДИКАЦИЯ ФОВ В ВОДЕ производится ампульным набором по холинэстеразной реакции, которая основана на способности этих веществ в очень малых концентрациях ингибировать активность холинэстеразы. Сущность метода заключается в том, что исследуемая вода вносится в ампулу, в которой находится сухая сыворотка с активной холинэстеразой при щелочной рН и индикатор (бромтимолблау), дающий в этой среде синюю окраску. Сюда же из другой ампулы добавляется раствор ацетилхолина.

Параллельно ставится такая же проба с чистой водой (контрольная проба). В контрольной пробе с чистой водой под действием холинэстеразы происходит гидролиз ацетилхолина с образованием уксусной кислоты, рН раствора сдвигается в кислую сторону и индикатор через 5-7 мин. окрашивается в зеленый, а затем в желтый цвет. Если исследуемая вода заражена ФОВ, то произойдет угнетение фермента, гидролиз ацетилхолина замедляется или вовсе не происходит и изменение окраски запаздывает по сравнению с контрольной пробой. Ампульный набор размещен в бумажной кассете с прорезным окном и содержит 2 ампулы с дополнительным реактивом (зеленая метка), ампулу с жидкостью синего цвета (калометрический стандарт 16 соответствующий начальной окраске проб и ампулу с жидкостью зеленого цвета (стандарт 2, соответствующий регистрируемой окраске проб).

После подготовки к работе, вскрытия ампул, приготовления реактивов и наполнения ампул зараженной водой и реактивами, следует внимательно наблюдать по часам за скоростью изменения цвета (от синего к зеленому) в пробах, сравнивая их на белом фоне с цветными стандартами 1 (синим) и 2 (зеленым).

Признаком зараженности воды является отставание в скорости изменения синего цвета на зеленый в ампулах с исследуемой водой по сравнению с незараженной (контролем). Это отставание обычно можно выявить в течение 2 мин., когда содержание контрольной ампулы принимает зеленоватый цвет, а содержимое ампул с зараженной водой сохраняет сине-зеленый цвет (малая степень заражения) или даже насыщенно-синий цвет (большая степень). В дальнейшем различные цвета содержимого ампул с чистой и зараженной водой, как правило, усиливается. Ампулы с чистой водой принимают желто-зеленый цвет и, наконец, желтый цвет. Цвет зараженной воды применяется значительно медленнее.

По часам можно более точно определить различие обесцвечивания содержимого ампул с чистой и исследуемой водой, сравнивая их с цветом стандарта 2. Одновременное позеленение проб до окраски стандарта 2 означает, что ОВ в исследуемой воде отсутствует; запоздание позеленения опытной пробы по сравнению с контрольной до 2 мин. означает слабую степень заражения (0,0005 мг/л);

запоздание до 0,5 мин. - среднюю степень заражения (0,005 мг/л). Если окраска исследуемой воды существенно не изменяется в течение 30 мин., значит вода содержит большое количество ФОВ (больше 0,05 мг/л).

При низких температурах кассету с ампульным набором и пробирку с незараженной водой во избежании замерзания рекомендуется вынуть из прибора ПХР-МВ и держать в кармане обмундирования.

Б. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИПРИТА И ТРИХЛОРВГРИЭТИЛАМИНА В ВОДЕ.

Индикация иприта и азотистого иприта в воде осуществляется синим реактивом, который находится в ампулах- В состав синего реактива входит тимолфталеин, который в щелочной среде вступает в реакцию с ипритом, образуя соединение желтого или желто-оранжевого цвета.

Методика реакции: в градуированную пробирку налить пипеткой исследуемую воду до второй метки (2 мл) и добавить к ней содержимое одной ампулы реактива на иприты. После добавления реактива и взбалтывания смесь в пробирке должна окраситься в синий цвет. Пробирку закрепить на держателе и содержимое ее осторожно кипятить на огне горючей таблетки, помещенной на лопатку для взятия проб, в течение 2-3 мин. (с момента закипания). После этого, не дожидаясь охлаждения, добавить к раствору одну ложечку кислотного порошка и встряхнуть пробирку до исчезновения синей окраски. В случае заражения исследуемой воды ипритом или трихлорприэтиламином раствор в пробирке начинает принимать желтую (при малых концентрациях заражения) или желто-оранжевую (при больших концентрациях заражения) окраску. Если окрашивание выражено слабо, то в ту пробирку после ее охлаждения влить содержимое одной ампулы с толуолом. Пробирку плотно закрыть пробкой и содержимое перемешать, перевернув пробирку 10-12раз. После расслаивания жидкостей вверхнемслое (толуол) при наличии иприта или трихлорприэтиламина наблюдается более интенсивное желтое окрашивание.

При проведении исследования, если после добавления к воде реактива на иприты или во время нагревания пробирки с этой водой синяя окраска обесцвечивается, необходимо добавить еще одну ампулу синего реактива и продолжить нагревание.

Исчезновение синей окраски в воде после добавления реактива указывает на высокую кислотность воды, что может быть результатом гидролиза ОВ. Такая вода должна быть исследована в лаборатории.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СИНИЛЬНОЙ КИСЛОТЫ В ВОДЕ.

Индикация синильной кислоты и цианидов проводится в дрексельной склянке с индикаторной трубкой на синильную кислоту (с тремя зелеными кольцами). Методика реакции: в дрексельную склянку налить 203 мл исследуемой воды, добавить ложечку кислотного порошка и закрыть пробирку дрексельной насадкой с присоединенной к ней индикаторной трубкой (при подготовке трубки ампула не разбивается). Свободный конец индикаторной трубки присоединить к насосу и сделать 10-15 качаний, после чего отделить индикаторную трубку от склянки и насоса и сравнить изменение ее цвета с эталоном на кассете.

При наличии в воде хлорциана или синильной кислоты и солей нижний слой наполнителя индикаторной трубки окрашивается в малиновый цвет или красно-фиолетовый.

Г. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЫШЬЯКОСОДЕРЖАЩИХ ОВ В ВОДЕ.

Для индикации в воде люизина, арсинов и солей тяжелых металлов, применяется групповой реактив (сероводородный реактив ГБКЛ),

Методика реакции: в пробирку наливают 2-3 мл исследуемой воды, подкисляют добавлением половины ложечки кислотного порошка и добавляют несколько кристалликов реактива на арсины и соли тяжелых металлов. Если вода заражена люизином, то образуется осадок; если арсинами (солями мышьяка) — желтый осадок, солями тяжелых металлов (сулемой, солями свинца, висмута и др.) -бурый или черный осадок.

Для индикации люизина и др. мышьяковистых соединений может также применяться реакция на мышьяк с индикаторной трубкой на мышьяковистый водород с двумя черными кольцами.

В градуированную дрексельную пробирку налить 2 мл исследуемой воды, прибавить 2-3 ложечки кислотного порошка, к короткой трубке дрексельной насадки присоединить трубку с уксусно-свинцовой ваткой (с двумя черными точками), а к ней - подготовленную индикаторную трубку на мышьяковистый водород. В пробирку с исследуемой водой спустить крупинку цинка, пробирку закрыть дрексельной насадкой с присоединенными к ней трубками и нагревать на огне горючей таблетки в течение 3 мин. не допуская забрызгивания жидкости в трубки. После этого с помощью насоса просасывать воздух через дрексель, сделав насосом 15 плавных качаний. Появление слабожелтого или желтого окрашивания наполнителя индикаторной трубки свидетельствует о наличии мышьякосодержащих ОВ в воде.

Химизм реакции состоит в том, что в результате реакции цинка с кислотой выделяется водород, который образует мышьяковистый водород, последний улетучивается и образует окрашенные соли с сулемовым реактивом наполнителя индикаторной трубки. При реакции с цинком может образоваться сероводород, который поглощается уксусно-свинцовой ватой в целях предупреждения его реакции с сулемовым реактивом. При образовании сероводорода вата приобретает бурую окраску.

Д. ИНДИКАЦИЯ ОВ В СУХИХ ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ.

Для индикации ОВ в пищевых продуктах часть пробы продукта насыпают в склянку для суховоздушной экстракции, к короткой трубке этой склянки присоединяют подготовленную индикаторную трубку на то или иное ОВ, насосом просасывают воздух через пробу продукта и трубку. Для усиления испарения ОВ пробу продукта можно слегка нагреть (40-60°С).