Лабораторные методы диагностики.

Пат.материал.: при абортах - абортированный плод (желудок плода, печень, легкое), плод. оболочки, часть плаценты. При бесплодии КРС у коров берут влагалищную слизь с помощью специальных приспособлений (полистироловых пипеток, соединённых со шприцом, или стерильным марлевым тампоном при помощи инструментов Жабоедова или (Павловского). От быков, баранов. кобелей – сперму, препуциальные смывы. Транспортировка смывов – в транспортных средах (тиогликолатном бульоне, среде Cary-Blair, щелочной пептонной воде). При подозрении на кишечный кампилобактериоз – фекалии, ректальные мазки.

Морфология: кампилобактеры имеют форму вибрионов или спирилл. Это Грам-, полиморфные, тонкие, извитые микроорганизмы (спирально изогнутые палочки), имеют 1-2 крупных завитка, «~~»; «S» . Активно подвижные, Сп-, Капс-. В мазке располагаются одиночно, беспорядочно или короткими цепочками: «крылья летящей чайки». Для ускоренной ориентировочной диагностики тонкий, фиксир. над пламенем мазок из пат. материала окрашивают водным раствором основного фуксина(1:5) 10-20с. Большая часть находящейся в мазке сопутствующей микрофлоры прокраситься за такой короткий срок не успевает.

Культуральн. свойства: микроаэрофилы. Создают 10% концентрацию СО₂ (СО₂ – инкубаторы, газогенерирующие пакеты или колпак с горящей свечой). На простых пит. средах не растет. Используют, ПЖА на печеночной и сердечной воде, эритрит-агар с 5% гемолизированной крови барана, среду Скирроу, специальные среды с селективными добавками. Посев обильный, уколом.

На ПЖА рост кампилобактеров проявляется в виде серо-голубоватого диска или кольца на 0,1-0,4 см ниже поверхности среды. Со временем диск поднимается вверх, образуя на поверхности пленку. Сама среда остается прозрачной. На плотных специальных средах мелкие - (1мм) округлые, прозрачные, бесцветные влажные колонии.

Чистую культуру получить очень трудно. Для ограничения роста посторонней микрофлоры применяют специальные методики:

1. Используют элективные среды различных фирм с селективными добавками-ингибиторами (рифампицин, фузидин и др.), СЖН - сафранино-железо-новобиомициновую среду. Если культура камп. чистая – СЖН розового цвета, если нет - желтого.

2. Используют способность кампилобактеров проходить через мембранные фильтры с диаметром пор 0,5-0,6 мкм. Стерильные мембранные фильтры помещают на поверхность плотной питательной среды и наносят на них несколько капель 10%-й суспензии иссл. материала. Через 30 мин фильтры убирают, чашки инкубируют.

3. «Метод пастеровских пипеток»: стерильной пастеровской пипеткой набирают в капилляр ПЖА и немного смешанной культуры. Нижнюю часть пипетки запаивают. Инкубируют. Через 3-4 суток кампилобактеры растут в пипетке под поверхностью среды в виде кольца. Затем полученную ЧК, берут другой пипеткой и пересевают на МППА.

4.М-д Шаталова. В пробирку помещают стекл. трубку и заливают ПЖА. В трубку вносят смешанную культуру кампилобактеров. Вследствие подвижности кампилобактеры проникают из трубки в среду и растут в ПЖА в виде кольца, остальные микробы останутся в трубке

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД. Выделенной ЧК заражают м. свинок, хомячков, кроликов (лучше – беременных самок). Для освежения, выделенной ЧК заражают куриные эмбрионы, после чего возбудитель восстанавливает свои свойства.