
- •Методические рекомендации для студентов
- •В науке, медицине, народном хозяйстве»
- •9.Учебно-материальное обеспечение:
- •Выделение и идентификация бактериофагов
- •1. Выделение бактериофага из патологического материала больного:
- •3. Обнаружение и титрование бактериофага на плотных средах двухслойным методом Грациа.
- •Титрование бактериофага
- •1 .Титрование бактериофага по Аппельману:
- •Методика фаготипирования бактерий
- •I. Кишечные бактериофаги.
- •II. Раневые бактериофаги.
Методика фаготипирования бактерий
Испытуемую суточную бульонную культуру в количестве 0,5 мл ввести в пробирку с рас плавленным 0,7% и охлажденным до +45 с МПА, перемешать и равномерно распределить по поверхности 2% МПА в чашке Петри.
После застывания среды с культурой чашку слегка подсушить в термостате, затем разделить по дну на сектора или квадраты), пастеровскими пипетками раскапать различные бактериофаги.
После суточной инкубации следует посмотреть чашку и отметить те квадраты, в которых имеется лизис бактерии.
Фаготип бактерий определяют по фагу, вызвавшему их лизис.
Приложение 4
ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ БАКТЕРИОФАГИ
I. Кишечные бактериофаги.
Бактериофаг дизентерийный - активен в отношении дизентерийных бактерий видов Флекснера, Зонне, биовара Ньюкасл. Используют для профилактики и лечения.
Бактериофаг брюшнотифозный - это смесь фагов, активных в отношении всех фаговаров возбудителей брюшного тифа. Используют для профилактики заболеваний брюшным тифом в эпидемических очагах.
Бактериофаг сальмонеллезный групп АВСДЕ - смесь фагов, активных против сальмонелл паратифа А, В и т.д. (еще 8 видов). Применяют для:
лечения детей и взрослых больных;
санации носителей;
профилактики (по эпидемическим показаниям, например работников мясокомбинатов).
Бактериофаг коли-протейный - смесь фагов, активных в отношении наиболее распространенных серологических групп энтеропатогенных кишечных палочек и протея. Применяют для лечения детей, больных кишечными заболеваниями, вызванными энтеропатогенными кишечными палочками, используют при дисбактериозе с преобладанием протея.
Кишечные лечебно-профилактические фаги выпускают нескольких форм: в жидком виде, в виде растворимых таблеток, покрытых кислотоустойчивой оболочкой, в ректальных свечах. Для детей фаг готовят с яблочным пектином (кислотоустойчивое покрытие).
II. Раневые бактериофаги.
1. Бактериофаг стафилококковый - активен в отношении штаммов стафилококка разного происхождения (выделенных с ожоговой, раневой поверхности, изкрови, желчи, остеомиелитных свищей, из носоглотки больных ангинами, от бактерионосителей). Применяют для лечения и профилактики.
Бактериофаг стрептококковый - активен в отношении штаммов стрептококков различного происхождения. Применяют для лечения и профилактики кожных, хирургических стрептококковых инфекций, при ангине, скарлатине.
Бактериофаг протейный - активен против протея. Применяют с лечебной и профилактической целью.
Прогивогангренозный бактериофаг. Раневые фаги готовят в жидком виде.
Бактериофаги применяют с учетом места нахождения микробов-возбудителей. При использовании per os больному дают 1 столовую ложку содового раствора (2,5%) для нейтрализации кислотности желудка.
Бактериофаги против анаэробной газовой гангрены применяют путем обкалывания раны, а против холеры - иногда капельным способом (в фаге не должно быть пептона!).
Приложение 5
ПРИМЕНЕНИЕ УМЕРЕННОГО БАКТЕРИОФАГА И ЛИЗОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ
1.Умеренный бактериофаг:
- фактор изменчивости бактерий применяется для получения ослабленных штаммов и приготовления живых вакцин.
2.Возможно формирование токсичных и атоксичных штаммов дифтерийных бактерий.
3.Лизогенные бактерии используются:
для оздоровления производственных штаммов и их очистки от посторонних культур;
как модель для изучения онкогенеза;
как удобный объект для отбора и испытания противораневых средств;
в космической микробиологии как индикатор излучений.