11. Методы микроскопии: световая, темпнопольная, фазово-контрастная, электронная. Техника микрокопирования с иммерсионным объективом:

• Включить освещение и осветить поле зрения используя вогнутую поверхность зеркала и объектив ×8, поднять конденсатор до уровня столика.

• На мазок нанести небольшую каплю иммерсионного масла, помес­тить препарат на предметный столик.

• Вращая револьвер, установить объектив ×90, осторожно опустить тубус микроскопа макровинтом вниз под контролем зрения сбоку до погружения фронтальной линзы иммерсионного объектива в каплю масла (почти до соприкосновения с предметным стеклом).

• Установить ориентировочный фокус при помощи макровинта (осторожно! не повреди фронтальную линзу объек­тива или предметное стекло).

• Окончательную фокусировку осуществляют микровинтом (вра­щать в пределах одного оборота).

• После окончания работы необходимо вытереть масло с иммерсионного объектива, пере­вести револьвер на объектив ×8, выключить освещение, закрыть диафрагму микроскопа.

Темнопольная микроскопия– используют специальные конденсаторы, которые создают эффект бокового освещения. На темном фоне препарата видны светящиеся бактерии.

Фазово-контрастная микроскопия– это микроскопия живых неокрашенных бактерий, с использованием специальных объективов с фазовыми кольца м и фазовым конденсатором. При этом происходит измерение амплитуды волн невидимой фазы света, до амплитуды видимых.

12. Особенности химического строения бактерий.

Бактерии имеют сложное строение, они представлены и неорганическими и органическими соединениями. Есть простые и сложные вещества.

Вода – 80-90% от бактериальной массы, она может быть свободной и может быть связанная.

Функции воды: Растворитель всех веществ, Вода – источник водородных и гидроксильных ионов, Является дисперсионной средой для протекания реакций в клетке, Связанная вода повышает резистентность бактерии, такая вода не замерзает и не испаряется.

Минеральные вещества– Р, Са,Cu,Fe,K,Na.

1. Входят в структуры клетки.

2. Обеспечивают осмотическое давление

3. Определяют активность ферментов и входят в их состав.

Нуклеиновые кислоты:

1. ДНК – двух цепочечная молекула, хранит генетическую информацию. Особенность – сумма оснований Г+Ц у Гр(+) = 70-80%, а у Гр(–) = 28-30% (а у позвоночных 40%).

2. РНК – одно цепочечная (и-РНК, т-РНК, р-РНК), обеспечивает синтез белков.

Белки: Представлены простыми (протаминами, протеинами) и сложными белками (протеидами, липопротеидами...). Белки составляют 50% сухого остатка и могут содержать необычные аминокислоты (L-диаминопимелиновая кислота(у Гр(–)), мезодиаминопимелиновая к-та (у Гр(+)),D-аланин, D-глютаминовая кислота).

Функции белков: Структурная или пластическая, Образуют ферментные системы и пигменты, Образуют двигательную систему (белок жгутиков – флагелин), Обеспечивают гидрофильность (смачиваемость), Тинкториальные свойства – особенность окраски, Специфичность – антигенные свойства, Токсичность – экзотоксины, Электрический заряд бактерии – (за счет полярности аминокислот) – бактерии способны к электрофорезу – движению в электрическом поле.

Углеводы. Представлены моносахарами, дисахарами и полисахарами. Особенностью является то, что некоторые углеводы встречаются только у некоторых бактерий (тейхоевые к-ты только у Гр(+)).

Функции: Пластический материал, Один из основных источников энергии, Специфичность, Токсичность

Липиды: до 10% могут быть свободными (капли жира) или в комплексе с белками и углеводами. Липиды – нейтральные жиры, фосфолипиды и воска (сложные соединения липидов).

Воска – это жироподобные соединения, состоящие из спирта фтиоцерола, аминокислот и низших жирных кислот. Воска определяют патогенность и болезнетворность (восков много у МБ tbc)

Отличаются липиды наличием необычных соединений: у Гр(–) есть липид А.

Имеются необычные фосфолипиды (аминоацил).

Функции липидов: Структурная или пластическая функция, Предают прочность этим структурам, Липиды определяют болезнетворность, Играют энергетическую роль, Определяют специфичность, с липидами связана устойчивость к антибиотикам и липиды определяют резистентность к кислотам

Особенность строениябактерий является то что в состав их клетки входят только свойственные им соединения – такие как:

• тейхоевые кислоты у Гр (+) бактерий – в составе клеточной стенки

• липополисаханиды у Гр(–) бактерий – в составе клеточной стенки

• пептидогликан – основное вещество оболочка бактерии, его нет у эукариотов – (муреин, мукопептид, состоит из N-ацетилглюкозамина и N-ацетилмурамовой кислоты).

• Тетрапептиды – в основе пептидной связи у пептидогликана, отличается у Гр(+) и Гр(–) бактерий.

• D-изомеры аминокислот в составе белковых и пептидных компонентов.