Другие способы выделения чистых культур.

1. Можно использовать оптимальные температуры (зависит от термофильности бактерии).

2. Выделение спор при прогревании смеси 10 минут при t80⁰C

3. Использование феномена роения – распространение за территорию посева (посев делают в центре, а по мере роста бактерии обрастаю, поверхность агара, край колонии будет ЧК).

4. Метод Шукевича – выделение чистой культуры м/о обладающих ползучим ростом– на дно пробирки со скощенным агаром засевают материал, по мере деления бактерии ползут верх по агару, образую ЧК (Proteus vulgaris).

5. Фильтруемость бактерий – способность проходить через фильтры с определенной величиной спор.

6. Обработка смеси УФ-лучами, ультразвуком, антисыворотками, получение ЧК – устойчивы к этим факторам.

7. При электрофорезе смеси у анода или катода будут скапливать организмы с определенным зарядом.

8. Использование микроманипулятора (под микроскопом берут одну клетку и получают ЧК – клонна элективных питательных сред – потомство одной микробной клетки.

9. В питательные среды добавляют желчь, соли тиурита, NaCl, антибиотики, и выделяют ЧК устойчивых м/о к этим факторам.

10. Можно использовать дифференциально-диагностические среды.

11. Можно использовать биологический метод - внутрибрюшинно заражают смесью бактерий белых мышей и за счет тропизма, бактерии накапливаются в определенном органе.

23. Культуральным свойства бактерий.

Культуральные свойства м/о– это особенности роста бактерий на питательных средах.

На жидких питательных средах – бактерий вызывают:

• помутнение среды

• образование осадка придонного и пристеночного

• образование пленок на поверхности среды

На плотных питательных средах образуются колонии.

Колония– изолированное скопление м/о одного вида на плотной питательной среде, имеет определенный размер, форму, цвет, поверхность, структура, край.

Типы колоний

• S-колонии – гладкие, круглая форма, ровные края, гладкая поверхность.

• R-колонии – шероховатые, неровные края, исчерченная поверхность

• SR-колонии – промежуточные – слегка неровные края и поверхность.

Характеристика колоний.

Признаки	Описание свойств колоний
Размер	Проводится измерение диаметра колоний
Форма	Круглая, неправильная
Цвет	Красный, желтый… Беспигментные колонии имеют оттенок среды (сероватый на МПА)
Поверхность	Выпуклая, плоская, блестящая, матовая, гладкая, морщинистая, шероховатая, исчерченная…
Структура	Структура может быть: гомогенной, мелкозернистой, крупнозернистой, неравномерно-зернистой, волокнистой. При малом увеличении с опущенным конденсором изучается у края колонии изучается структура под малым увеличением, чашка дном вверх
Край	Изучается вместе со структурой. Может быть ровным, изрезанным, волнообразным, фестончатым
Консистенция	Определяется при взятии петлей для приготовления мазка. Консистенция м.б: слизистой (культура тянется – подозрение на наличие капсулы), влажная(легко берется)и сухая(крошится – подозрение на спорообразование)
Тинкториальные и морфологич св.	Изучаются соответствующие свойства бактерий, находящихся в колонии

24. L-формы бактерий, их свойства. Значение L-форм в патологии человека.

Открыты в 1935 г в институте Листера.

L-формы– это м/о лишенные клеточной стенки, но сохранившие способность расти и размножаться, что является их отличием от сферопластов и протопластов.

Lформы образуются у большинства гетеротрофов и грибов.

Факторы L-трансформации:

• а/б (особенно неграмотное применение, низкие дозы)

• аминокислоты – глицин, метионин, лейцин и некоторые другие.

• Фермент лизоцим.

• Факторы макрорганизма – антитела, лизоцим, комплимент – эти факторы разрушают клеточную стенку или действуют на геном клетки и синтез компонентов клеточной стенки.

Свойства L-форм.

• Обеспечивают выживание бактерий при изменении условий среды.

• Морфологически сходны у отдельных видов бактерий

• L-формы полиморфны, шаровидные, всегда Гр(–).

• Образуют колонии 2-х типов:

– тип А – мелкие колонии на поверхности среды

– тип В – колонии с темным центром и приподнятыми краями, врастают в питательную среду.

• По дыханию это анаэробы или микроаэрофилы

• Имеют много способов размножения: бинарное деление, почкование, фрагментация, комбинированное.

• Обладают низкими вирулентными свойствами: низкая адгезии, антигенные свойства изменены.

• Способны реверсировать – возвращаться в исходную бактериальную форму и вызывать более яркое проявление клиники.

• Упорные, торпидные, трудно поддающиеся лечению. Это обусловлено тем, что L-формы, устойчивы к а/б, защитным факторам макроорганизма, к антителам, фагоцитозу и комплименту.