-
Механизмы регуляции транскрипции. Примеры воздействия на процессы биосинтеза белка лекарственными препаратами.
Далее перечислены лекарственные препараты. Не думаю, что их нужно заучивать все (мы же не мазохисты какие-нибудь), просто усвойте основной принцип действия и заучите парочку.
Дауномицин, доксорибуцин – они встраиваются в структуру ДНК между Г и Ц основаниями. Это изменяет структуру ДНК, что ингибирует репликацию и транскрипцию.
Актиномицин D блокирует синтез ДНК, но оно слишком токсично, так что его в клинике не используют.
Алкилирующие агенты и ингибиторы ДНК-топоизомеразы 2. ДНК может транскрипироваться только при определённой суперспирализации, а за эту спирализацию отвечают ДНК-топоизомеразы, так что ингибирую их можно ингибировать транскрипцию.
Рифамицин – ингибируют ДНК зависимую РНК полимеразу, что препятствует транскрипции.
Тетрациклины, эритромицин, пуромицин, хлорамфеникол и аминогликозиды. К последним относится стрептомицин, который ингибирует инициацию синтеза белка у прокариотов и вызывает ошибки в прочтении информации, закодированной в мРНК.
Тетрациклины – ингибируют синтез в рибосомах. Левомицетин – тоже.
-
Идентификация специфических последовательностей ДНК полимеразной цепной реакцией. Значение для медицины.
Метод ПЦР:
1)Эти методом осуществляют диагностику следующих заболеваний: ВИЧ –инфекции, гепатиты А, В, С, Д, цитомегаловирусную инфекцию, токсоплазмоз, хламидии, то есть многие вирусные и бактериальные инфекции.
2) Используется для ранней диагностики(до рождения) наслед.заболеваний. 3) Применяется в криминалистике для идентификации личности.4) Используется для определения степени сродства.
ПЦР осуществляют в пробирке с помощью термостабильной ДНК-полимеразы при участии дезоксинуклезидтрифосфатов - субстратов и коротких олигонуклеотидных затравок – праймеров.
Праймер - короткие, длиной в 20-30 нуклеотидов одноцепочечные фрагменты ДНК, комплементарные 3’-концевым последовательностям копируемой ДНК-матрицы. Реакция происходит в несколько стадий:
Денатурация: Инкубационную смесь нагревают до 90градусов. При этом происходит разрушение слабых связей в ДНК и из одной двухцепочечной молекулы образуются две одноцепочечные.
Гибридизация: Температуру снижают до 50о.При этом происходит гибридизация цепей ДНК с праймерами.
Полимеризация: Инкубационную смесь нагревают до 70о. При этой температуре полимераза удлиняет оба праймера с их 3’-концов. Праймеры дорастают до размеров матрицы. В результате количество ДНК удваивается
Метод основан на том, что первичная структура ДНК разных видов организмов различна. Подбирается последовательности, характерные для ДНК возбудителей болезни и подобрать такие праймеры, которые будут гибридизоваться с ДНК возбудителя, но не с ДНК человека
В этом случае продуктом амплификации будет ДНК только возбудителя, а не пациента.
-
этапы синтеза белка генно-инженерным способом: 1 введение в клетки микроорганизма рекомбинантной плазмиды 2 - продукция белка культурой трансформированных клеток микроорганизма 3 - выделение белка из культуры трансформированных клеток микроорганизма