100 г

органа

H₂O + H₂SO₄

pH 2,

2 Раза по 2 часа

водное

извлечение

(соли алкалоидов)

(NH₄)₂SO₄

осаждение белков

фильтрат

эфир

экстрагирование

балластных веществ

pH 2

водное извлечение

1. + NaOH, pH 9-10

CHCl₃

3 раза

хлороформный экстракт

(Основания алкалоидов)

3. Выход 50-70%

Разработанный вначале для алкалоидов, метод применим и для изолирования других N-содержащих веществ основного характера (синтетических лекарственных средств).

Метод достаточно быстрый. Преимуществом является хорошая очистка извлечений от соэкстрактивных веществ.

Кроме указанных выше методов изолирования, для отдельных алкалоидов, таких, как жидкие алкалоиды - анабазин, никотин, кониин - рекомендуется перегонка алкалоидов с водяным паром с последующим экстрагированием из дистиллята органическим растворителем. Для стрихнина и пахикарпина предложены такие методы, как электрофорез и электродиализ.

Исследование биологических жидкостей.

1. При исследовании биожидкостей, таких, как кровь, моча, плазма, слюна, сыворотка, промывные воды желудка, для изолирования «нелетучих» ядов используют прямую дробную жидкость - жидкостную экстракцию (ЖЖЭ).

Биожидкость подкисляют хлористоводородной кислотой до рН2-3 и экстрагируют эфиром ( фракция А), а затем подщелачивыают до рН 9-10 и экстрагируют хлороформом (фракция Б). Во фракции А присутствуют вещества кислого и нейтрального характера , а во фракции Б - вещества основного характера.

ЖЖЭ соответствует второй стадии изолирования ядов из биоматериала в рассмотренных ранее общих методах, поэтому все факторы, определяющие эффективность изолирования на этой стадии, имеют здесь место.

Для некоторых веществ основного характера, например, для морфина, при изолировании его из мочи предварительно проводят кислотный гидролиз, чтобы разрушить его комплекс с глюкуроновой кислотой, в виде которого он находится в моче. При прямой ЖЖЭ совместно с ядами из биожидкостей могут экстрагироваться сопутствующие вещества, что заставляет в дальнейшем прибегать к различным методам очистки.

Изолирование биологических жидкостей (жидкость-жидкостная экстракция, ЖЖЭ) проводится по следующей схеме:

биожидкость

(кровь, моча)

+ HCl, pH 2

эфир

эфирный экстракт

(Вещества кислого и нейтрального характера)

фракция А

водный слой

+ NH₄OH, pH 10

CHCl₃

хлороформный экстракт

(Вещества основного характера)

фракция Б

2. В последнее время для изолирования ядов из биожидкостей стали использовать сорбцию их на синтетических смолах, модифицированных силикагелях и активированном угле. Вещества сорбируются на твердом носителе, а потом вымываются (элюируются) из него органическим растворителем (по фракциям). Метод позволяет не проводить дополнительную обработку пробы и изолирование, дает возможность одновременно сконцентрировать вещество и провести очистку. Это приводит к повышению чувствительности метода. Однако, при неизвестном яде сорбция не всегда может быть использована ввиду опасности его потери из-за недостаточной сорбции и проскакивания через колонку сорбента.