- •Билет 1.
- •Билет 2.
- •Билет 3.
- •Билет 6.
- •Билет 7.
- •Биологическое значение сверхспирализации днк
- •Билет 8.
- •Некоторые общие закономерности горизонтального переноса у прокариот:
- •Билет 15.
- •Секвенирование по Сэнгеру
- •Высокопроизводительное секвенирование
- •Молекулярно-генетические методы исследования микрофлоры
- •Билет 20.
Билет 6.
Репарация повреждений ДНК у прокариот. Гомологичная рекомбинация.
Генетическая рекомбинация – это взаимодействие между двумя ДНК, обладающими различными генотипами, которое приводит к образованию рекомбинантной ДНК, сочетающей гены обоих родителей.
По молекулярному механизму генетическая рекомбинация у бактерий делится на 3 вида:
- гомологичную;
- сайтспецифическую;
- незаконную.
При гомологичной рекомбинации в процессе разрыва и воссоединения ДНК происходит обмен между участками ДНК, обладающими высокой степенью гомологии. Процесс гомологичной рекомбинации находится под контролем генов, объединенных в REC-систему, состоящую из генов recA, В, С. D. Продукты этих генов производят расплетание нитей ДНК и их периориентацию с образованием полухиазмы, структуры Холидея, а также разрезают структуру Холидея для завершения процесса рекомбинации.
Бактериальные цитотоксины, механизмы действия, примеры бактерий-продуцентов.
Билет 7.
Структура ДНК прокариот. Суперспирализация ДНК. Ферменты, участвующие в ее поддержании.
Сверхспирализация ДНК — явление пере- или недоскручивания топологически замкнутых цепей ДНК, в результате которого ось двойной спирали ДНК сама закручивается в спираль более высокого порядка. Под «топологически замкнутыми» понимают молекулы, свободное вращение концов которых затруднено (кольцевые молекулы ДНК либо линейные молекулы, концы которых зафиксированы белковыми структурами)[1]. Образующаяся в результате сверхспирализации ДНК иногда называется суперскрученной.
Сверхспирализация важна во множестве биологических процессов, таких как, например, компактизация ДНК. Определённые ферменты, в частноститопоизомеразы, обладают способностью изменять топологию ДНК, например для репликации ДНК или транскрипции.
Биологическое значение сверхспирализации днк
Свехспирализация является важным свойством ДНК, от которого зависит протекание практически всех ДНК-зависимых процессов в клетке, таких какрепликация ДНК, транскрипция и рекомбинация. ДНК в клетках большинства исследованных мезофильных организмов отрицательно сверхспирализована[2]. Отрицательная сверхспирализация способствует облегчению локального плавления двойной спирали, что обеспечивает нормальную инициацию транскрипции и репликации. Напротив, положительная сверхспирализация может препятствовать инициации транскрипции и продвижению репликативной вилки. Особые белки и ферменты поддерживают ДНК в состоянии отрицательной сверхспирализации. В эукариотических клетках ДНК закручена в отрицательные сверхвитки вокруг гистоновых комплексов, у большинства мезофильных архей есть гистоноподобные белки, которые выполняют ту же функцию, а у бактерий за это отвечают белки, ассоциированные с нуклеоидом (например, HU и HNS).
Кроме того, существуют специальные ферменты класса изомераз, которые могут изменять топологическое состояние ДНК. Они получили названиетопоизомераз, или ДНК-топоизомераз, и были обнаружены у прокариот, эукариот, а также у некоторых вирусов. Топоизомеразы могут вносить в замкнутую ДНК положительные и отрицательные сверхвитки, а также обеспечивать её релаксацию.
Клостридиальные нейротоксины, механизмы действия.