Добавил:

Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.

Вуз:

Медицинская академия им. С.И. Георгиевского

Предмет:

Микробиология и иммунология

Файл:

шпора по иммунке.docx

Скачиваний:

Добавлен:

05.03.2016

Размер:

304.2 Кб

Скачать

☆

1 / 41 2 3 4 > Следующая >>>

1. Понятие об инфекции. Условия возникновения, стадии развития и характерные признаки инфекционных болезней.

Инфекция или инфекционный процесс – представляет собой совокупность физиологических и патологических адаптационных и репарационных реакций, которые возникают и развиваются в макроорганизме в процессе взаимодействия с патогенными микроорганизмами, выдающими нарушения его внутренней среды и физиологической функции. Аналогичные процессы, вызванные простейшими, называют инвазиями.

Инфекционный процесс характеризуется : наличие возбудителя заболеваний , стадийность, наличие определенного симптомокомплекса, приобретение иммунитета.

Инфекционные заболевания – наиболее выраженная форма инфекционного процесса его краткая степень.

Пути передачи инфекционного агента: фекально – оральный , аэрогенный( респираторный: возд- пыл. , возд –кап.) , контактно – бытовой ( контактный ), ч/з кровь ( парентеральный), трансмиссивный, вертикальный( трансплацентарный).

Факторы необходимые для развития инфекционного заболевания:

Микроорганизмы Макроорганизмы Внешней среды

Инфицирующая доза Восприимчивость Температура, влажность радиация

Вход. ворота ( рецетор взаимодействия Резистентность Экология

Способы и пути проникновения Наличие вход. ворот Питание

Скорость размножения Вред. Привычки, сопутств заболевания Соц. Усл

Патогенность и вирулентность возраст Нац. и религ. обычии

Периоды инфекционного заболевания:

Инкубационный ( зависит от вида) — время, которое проходит с мо¬мента заражения до начала клинических проявлений болезни. В зависимости от свойств возбудителя, иммунного статуса макроорганизма, характера взаимоотношений между макро- и микроорганизмом инкубационный период может колебаться от нескольких часов до нескольких месяцев и даже лет;

Продромальный - время появления первых клини¬ческих симптомов общего характера, неспецифических для данного заболевания, например слабость, быстрая утомляе¬мость, отсутствие аппетита и т. д.

Период острых проявлений и разгар болезни - разгар болезни. В это время проявляются типичные для данного за¬болевания симптомы: температурная кривая, высыпания, местные поражения и т. п.

Период рековалесценции ( выздоровление, исходы) - период угасания и исчез¬новения типичных симптомов и клинического выздоровления

3. Токсины бактерий, их природа , свойства и получение.

Токсины – это факторы агрессии, оказывают токсический эффект. Белки и ЛПС.

Белковые: 1) Экзотоксины – секретируются в окружающую среду 2)эндотоксины

Липополисахариды : эндотоксины. Известно более 80 бактериальных токсинов.

Термолабильные и термостабильные белковые токсины. Термостабильные могут вызвать кратковременное кипячение.

Токсины имеют 2 центра: 1) Лиганд, связывается с рецептором клетки – мишени ( фиксируют) 2)токсический, проникает внутрь клетки, обеспечивая токсический эффект.

Специфичность действия определяется избирательной фиксацией токсина к рецептору.

Характеристика бактериальных токсинов:

Свойства Экзотоксины Эндотоксины

Локализация Внутри бактерии В клеточной стенки бактерий

Химическя природа Белок Липополисахариды

Отношение к высокой t0С Высокочувствительные Умеренные( термостабильные)

Токсичность Высокая Ниже

Органотропность Специфичная Малоспецифическая

Источник получения анатоксина экзотоксины Не обезвреживаются

По молекулярной организации экзотоксины делятся на две группы:

• экзотоксины, состоящие из двух фрагментов;

• экзотоксины, составляющие единую полипептидную цепь.

По степени связи с бактериальной клетки экзотоксины делятся условно на три класса.

• Класс А - токсины, секретируемые во внешнюю среду;

• Класс В - токсины частично секретируемые и частично связанные с микробной клеткой;

• Класс С - токсины, связанные и с микробной клеткой и попадающие в окружающую среду при разрушении клетки.

Экзотоксины обладают высокой токсичностью. Под воздействием формалина и температуры экзотоксины утрачивают свою токсичность, но сохраняют иммуногенное свойство. Такие токсины получили название анатоксины и применяются для профилактики заболевания столбняка, гангрены, ботулизма, дифтерии, а также используются в виде антигенов для иммунизации животных с целью получения анатоксических сывороток.

Эндотоксины по своей химической структуре являются липополисахаридами, которые содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий и выделяются в окружающую среду при лизисе бактерий. Эндотоксины не обладают специфичностью, термостабильны, менее токсичны, обладают слабой иммуногенностью. При поступлении в организм больших доз эндотоксины угнетают фагоцитоз, гранулоцитоз, моноцитоз, увеличивают проницаемость капилляров, оказывают разрушающее действие на клетки. Микробные липополисахариды разрушают лейкоциты крови, вызывают дегрануляцию тучных клеток с выделением вазодилататоров, активируют фактор Хагемана, что приводит к лейкопении, гипертермии, гипотонии, ацидозу, диссеминированной внутрисосудистой коагуляции (ДВК).

Эндотоксины стимулируют синтез интерферонов, активируют систему комплемента по классическому пути, обладают аллергическими свойствами.

При введении небольших доз эндотоксина повышается резистентность организма, усиливается фагоцитоз, стимулируются В-лимфоциты. Сыворотка животного иммунизированного эндотоксином обладает слабой антитоксической активностью и не нейтрализует эндотоксин.

Патогенность бактерий контролируется тремя типами генов: гены - собственной хромосомами, гены, привнесенные плазмидами и умеренными фагами.

4. Теории иммунитета.

Иммунитет – это способ защиты организма от генетически чужеродных веществ – антигенов экзогенного и эндогенного происхождения, направленный на поддержание и сохранение гомеостаза, структурной и функциональной целостности организма, биологической (антигенной)индивидуальности каждого организма и вида в целом.

Различают несколько основных видов иммунитета.

Теория иммунитета Мечникова - теория, согласно которой решающая роль в антибактериальном иммунитете принадлежит фагоцитозу.

Сначала И.И.Мечников как зо¬олог экспериментально изучал морских беспозвоночных фауны Черного моря в Одессе и обратил внимание на то, что опре¬деленные клетки (целомоциты) этих животных поглощают инородные субстанции (твердые частицы и бактерий), проник¬шие во внутреннюю среду. Затем он увидел аналогию между этим явлением и поглощением белыми клетками крови позвоночных животных микробных телец. Эти процессы на¬блюдали и до И.И.Мечникова другие микроскописты. Но толь¬ко И.И.Мечников осознал, что это явление не есть процесс питания данной единичной клетки, а есть защитный процесс в интересах целого организма. И.И.Мечников первым рассмат¬ривал воспаление как защитное, а не разрушительное явление. Против теории И.И.Мечникова в начале XX в. были большин¬ство патологов, так как они наблюдали фагоцитоз в очагах воспаления, т.е. в больных местах, и считали лейкоциты (гной) болезнетворными, а не защитными клетками. Более того, не¬которые полагали, что фагоциты — разносчики бактерий по организму, ответственные за диссеминацию инфекций. Но идеи И.И.Мечникова устояли; ученый назвал действующие таким образом защитные клетки "пожирающими клетками". Его мо¬лодые французские коллеги предложили использовать гречес¬кие корни того же значения. И.И.Мечников принял этот ва¬риант, и появился термин "фагоцит". Эти работы и теорияМечникова чрезвычайно понравились Л. Пастеру, и он пригла¬сил Илью Ильича работать в свой институт в Париже.

Теория иммунитета Эрлиха — одна из первых теорий антителообразования, согласно которой у клеток имеются антигенспецифические рецепторы, высвобождающиеся в качестве антител под действием антигена.

В статье Пауля Эрлиха противомикробные вещества крови автор назвал термином "антитело", так как бактерий в то время называли термином "korper" — микроско¬пические тельца. Но П. Эрлиха "посетило" глубокое теорети¬ческое прозрение. Несмотря на то, что факты того времени свидетельствовали, что в крови неконтактировавшего с кон-кретным микробом животного или человека не определяютсяантитела против данного микроба, П. Эрлих каким-то образом осознал, что и до контакта с конкретным микробом в организ¬ме уже есть антитела в виде, который он назвал "боковыми цепями". Как мы теперь знаем, это именно так, и "боковые цепи" Эрлиха — это подробно изученные в наше время рецеп¬торы лимфоцитов для антигенов. Позже этот же образ мыслей П. Эрлих "применил" к фармакологии: в своей теории химиотерапии он предполагал предсуществование в организме рецеп¬торов для лекарственных веществ. В 1908 г. П. Эрлиху вручили Нобелевскую премию за гуморальную теорию иммунитета.

Также есть ещё некоторые теории.

Теория иммунитета Безредки - теория, объясняющая защиту организма от ряда инфекционных болезней возникновением специфической местной невосприимчивости клеток к возбудителям.

Инструктивные теории иммунитета — общее название теорий антителообразования, согласно которым ведущая роль в иммунном ответе отводится антигену, прямо участвующему в качестве матрицы при формировании специфической конфигурации антидетерминанты либо выступающему в качестве фактора, направленно изменяющего биосинтез иммуноглобулинов плазматическими клетками.

5. Неспецифическая резистентность. И.Мечников и его роль в учении об иммунитете. Виды фагацитов и стадии фагацитоза.

Для возникновения инфицированного процесса важное значение наряду со свойствами возбудителя имеет состояние макрооргаизма. Оноо определяется сложным комплексом факторов и механизмов, тесно связанных между собой, и характеризуются восприимчивостью (чувствительность) или невосприимчивость (резистентность)

Неспецифическая резистентность способность организма противостоять действию чужеродных агентов стереотипными механизмами.

Факторы неспецифической резистентности:

общефизиологические Гуморальные Клеточные

Общ. Реактивность Комплемент Кожа и слизь

Температурная реакция Лизоцим Слизистые оболочки

Секретные и экскретные функции Интерфероны фагоцитоз

Изменения обмена веществ и pH тканей β лизины Натуральные киллеры

Нормальная микробиотика Противвирусные ингибиторы Клетки регионарных лимфоузлов

Белки острой фазы

нормльные атитела

Механические факторы. Кожа и слизистые оболочки ме¬ханически препятствуют проникновению микроорганизмов и других антигенов в организм. Последние все же могут попадать в организм при заболеваниях и повреждениях кожи (травмы, ожоги, воспалительные заболевания, укусы насекомых, живот¬ных и т. д.), а в некоторых случаях и через нормальную кожу и слизистую оболочку, проникая между клетками или через клет¬ки эпителия (например, вирусы). Механическую защиту осуще¬ствляет также реснитчатый эпителий верхних дыхательных пу¬тей, так как движение ресничек постоянно удаляет слизь вмес¬те с попавшими в дыхательные пути инородными частицами и микроорганизмами.

Физико-химические факторы. Антимикробными свой¬ствами обладают уксусная, молочная, муравьиная и другие кис¬лоты, выделяемые потовыми и сальными железами кожи; соля¬ная кислота желудочного сока, а также протеолитические и другие ферменты, имеющиеся в жидкостях и тканях организма. Особая роль в антимикробном действии принадлежит ферменту лизоциму. Этот протеолитический фермент получил название «мурамидаза», так как разрушает клеточную стенку бактерий и других клеток, вызывая их гибель и способствуя фагоцитозу. Лизоцим вырабатывают макрофаги и нейтрофилы. Содержится он в больших количествах во всех секретах, жидко¬стях и тканях организма (кровь, слюна, слезы, молоко, кишеч¬ная слизь, мозг и т. д.). Снижение уровня фермента приводит к возникновению инфекционных и других воспалительных заболе¬ваний. В настоящее время осуществлен химический синтез лизоцима, и он используется как медицинский препарат для лече¬ния воспалительных заболеваний.

Иммунобиологические факторы. В процессе эволюции сформировался комплекс гуморальных и клеточных факторов не¬специфической резистентности, направленных на устранение чу¬жеродных веществ и частиц, попавших в организм.

Гуморальные факторы неспецифической резистентности со¬стоят из разнообразных белков, содержащихся в крови и жид¬костях организма. К ним относятся белки системы комплемен¬та, интерферон, трансферрин, β-лизины, белок пропердин, фибронектин и др.

Белки системы комплемента обычно неактивны, но приоб¬ретают активность в результате последовательной активации и взаимодействия компонентов комплемента. Интерферон оказы¬вает иммуномодулирующий, пролиферативный эффект и вызы¬вает в клетке, инфицированной вирусом, состояние противови¬русной резистентности. β-лизины вырабатываются тромбоцита¬ми и обладают бактерицидным действием. Трансферрин конку¬рирует с микроорганизмами за необходимые для них метаболи¬ты, без которых возбудители не могут размножаться. Белок пропердин участвует в активации комплемента и других реакциях. Сывороточные ингибиторы крови, например р-ингибиторы (р-липопротеины), инактивируют многие вирусы в результате неспецифической блокады их поверхности.

Отдельные гуморальные факторы (некоторые компоненты ком¬племента, фибронектин и др.) вместе с антителами взаимодей¬ствуют с поверхностью микроорганизмов, способствуя их фагоцитозу, играя роль опсонинов.

Большое значение в неспецифической резистентности имеют клетки, способные к фагоцитозу, а также клетки с цитотоксической активностью, называемые естественными киллерами, или NK-клетками. NK-клетки представляют собой особую популяцию лимфоцитоподобных клеток (большие гранулосодержащие лим¬фоциты), обладающих цитотоксическим действием против чужеродных клеток (раковых, клеток простейших и клеток, поражен¬ных вирусом). Видимо, NK-клетки осуществляют в организме противоопухолевый надзор.

Мечников внёс огромный вклад в развитие иммунологии. Он обосновал учение о фагоцитозе и фагоцитах. Доказал, что фагоцитоз - явление универсальное, наблюдается у всех живот¬ных, включая простейших, и проявляется по отно¬шению ко всем чужеродным веществам (бактерии, органические частицы и т. д.). Теория фагоцитоза заложила краеугольный камень клеточной теории иммунитета и процесса иммуногенеза в целом с учетом клеточных и гуморальных факторов. За разработку теорий фагоцитоза И. И. Мечникову в 1908 г присуждена Нобелевская премия. Л. Пастер на своем портрете, подаренном И. И. Мечникову, написал: «На память знаменитому Мечникову — творцу фагоцитарной теории».

Наиболее важной функцией нейтрофилов и макрофагов является фагоцитоз — поглощение клеткой вредоносного агента. Фагоциты избирательны в отношении материала, который они фагоцитируют; иначе они могли бы фагоцитировать нормальные клетки и структуры организма. Осуществление фагоцитоза зависит главным образом от трех специфических условий.

Во-первых, большинство естественных структур имеют гладкую поверхность, которая препятствует фагоцитозу. Но если поверхность неровная, возможность фагоцитирования возрастает.

Во-вторых, большинство естественных поверхностей имеют защитные белковые оболочки, отталкивающие фагоциты. С другой стороны, большинство погибших тканей и инородных частиц лишены защитных оболочек, что делает их объектом фагоцитоза.

В-третьих, иммунная система организма образует антитела против инфекционных агентов, например бактерий. Антитела прикрепляются к мембранам бактерий, и бактерии становятся особенно чувствительными к фагоцитозу. Для осуществления этой функции молекула антитела также соединяется с продуктом СЗ каскада комплемента — дополнительной частью иммунной системы, обсуждаемой в следующей главе. Молекулы СЗ, в свою очередь, прикрепляются к рецепторам на мембране фагоцитов, инициируя фагоцитоз. Этот процесс выбора и фагоцитоза называют опсонизацией.

Стадии фагацитоза:

-Хемотаксис – целенаправленное передвижение фагоцитов в направлении химического градиента хемоаттрактантов в окр. среде.

-Адгезия ( приклеивание) опосредована рецепторами, но может протекать с законами не специфического физико – химического взаимодействия .Адгезия непосредственно предшествует эндоцитозу ( захвату)

-Эндоцитоз

-Внутриклеточное периваривание происходит в фаголизосомах. Захваченные фагоцитами микроорганизмы погибают в результате осуществления механизмов микробиоциодности этих клеток. Различают кислородзависимые механизмы микробиоциодности, связанные с «окислительным взрывом» и кислороднезависимые механизмы, опосредованные катионными белками и ферментами (в том числе и лизоцим), попадающими в фагосому в результате её слияния с лизосомами.

Фагоцитоз, осуществляемый нейтрофилами. Нейтрофилы, входящие в ткани, являются уже зрелыми клетками, способными к немедленному фагоцитозу. При встрече с частицей, которая должна быть фагоцитирована, нейтрофил сначала прикрепляется к ней, а затем выпускает псевдоподии во всех направлениях вокруг частицы. На противоположной стороне частицы псевдоподии встречаются и сливаются друг с другом. При этом образуется замкнутая камера, содержащая фагоцитируемую частицу. Затем камера погружается в цитоплазматическую полость и отрывается от наружной стороны клеточной мембраны, формируя свободно плавающий фагоцитарный пузырек (также называемый фагосомои) внутри цитоплазмы. Один нейтрофил обычно может фагоцитировать от 3 до 20 бактерий, прежде чем он сам инактивируется или погибает.

Фагоцитоз, осуществляемый макрофагами. Макрофаги представляют собой конечную стадию развития моноцитов, входящих в ткани из крови. При активации иммунной системой они становятся гораздо более мощными фагоцитами, чем нейтрофилы, и часто могут фагоцитировать до 100 бактерий. Макрофаги также способны поглощать гораздо более крупные частицы, даже целые эритроциты и иногда малярийных паразитов, тогда как нейтрофилы не могут фагоцитировать частички, размер которых значительно превышает размер бактерии. Кроме того, макрофаги могут выталкивать конечные продукты и часто живут и функционируют в течение многих месяцев.

6. Комплемент, его структура, функции, пути актива¬ции, роль в иммунитете. Другие гуморальные факторы неспецифической резистентности.

Природа и характеристика комплемента. Комплемент является одним из важных фак¬торов гуморального иммунитета, играющим роль в защите организма от антигенов. Комплемент представляет со¬бой сложный комплекс белков (βглобулины) сыворотки крови, находящийся обычно в неактивном состоянии и активирующийся при соедине¬нии антигена с антителом или при агрега¬ции антигена. В состав комплемента входят 20 взаимодействующих между собой белков, девять из которых являются основными ком¬понентами комплемента; их обозначают циф¬рами: С1, С2, СЗ, С4...С9. Важную роль играют также факторы В, D и Р(пропердин). Белки комплемента относятся к глобулинам и отличаются между собой по ряду физико-химических свойств. В частности, они сущес-твенно различаются по молекулярной массе, а также имеют сложный субъединичный состав: C1-C1q, C1r, C1s; СЗ-СЗа, СЗb; С5-С5а, С5b и т. д. Компоненты комплемента синтези¬руются в большом количестве (составляют 5—10% от всех белков крови), часть из них образуют фагоциты.

Функции комплемента многообразны: а) участвует в лизисе микробных и других клеток (цитотоксическое действие); б) обладает хемотаксической активностью; в) принимает учас¬тие в анафилаксии; г) участвует в фагоцитозе. Следовательно, комплемент является компонен¬том многих иммунологических реакций, направ¬ленных на освобождение организма от микробов и других чужеродных клеток и антигенов (на¬пример, опухолевых клеток, трансплантата).

Механизм активации комплемента очень сложен и представляет собой каскад фер¬ментативных протеолитических реакций, в результате которого образуется активный цитолитический комплекс, разрушающий стен¬ку бактерии и других клеток. Известны три пути активации комплемента: классический, альтернативный и лектиновый.

По классическому пути комплемент активирует¬ся комплексом антиген-антитело. Для этого достаточно участия в связывании антигена одной молекулы IgM или двух молекул IgG. Процесс начинается с присоединения к ком¬плексу АГ+АТ компонента С1, который рас¬падается на субъединицы C1q, C1r и С1s. Далее в реакции участвуют последовательно активированные «ранние» компоненты комплемента в такой последовательности: С4, С2, СЗ. Эта реакция имеет характер усиливающе¬гося каскада, т. е. когда одна молекула пре¬дыдущего компонента активирует несколько молекул последующего. «Ранний» компонент комплемента С3 активирует компонент С5, который обладает свойством прикрепляться к мембране клетки. На компоненте С5 путем последовательного присоединения «поздних» компонентов С6, С7, С8, С9 образуется литический или мембраноатакующий комплекс который нарушает целостность мембраны (образует в ней отверстие), и клетка погибает в результате осмотического лизиса.

Альтернативный путь активации комплемен¬та проходит без участия антител. Этот путь характерен для защиты от грамотрицательных микробов. Каскадная цепная реакция при аль¬тернативном пути начинается с взаимодействия антигена (например, полисахарида) с протеи¬нами В, D и пропердином (Р) с последующей активацией компонента СЗ. Далее реакция идет так же, как и при классическом пути — образу¬ется мембраноатакующий комплекс.

Лектиновый путь активации комплемента также происходит без участия антител. Он ини¬циируется особым маннозосвязывающим белком сыворотки крови, который после взаимодейс¬твия с остатками маннозы на поверхности мик¬робных клеток катализирует С4. Дальнейший каскад реакций сходен с классическим путем.

В процессе активации комплемента обра¬зуются продукты протеолиза его компонен¬тов — субъединицы СЗа и СЗb, С5а и С5b и дру¬гие, которые обладают высокой биологической активностью. Например, СЗа и С5а принимают участие в анафилактических реакциях, являют¬ся хемоаттрактантами, СЗb — играет роль в опсонизации объектов фагоцитоза, и т. д. Сложная каскадная реакция комплемента происходит с участием ионов Са2+ и Mg2+.

Помимо системы комплемент к гуморальным факторам не специфической защиты относятся:

ЛИЗОЦИМ- термостабильный белок типа муколитического фермета. Он содержится в тканевых жидкостяхживотных и человека - в слезах, слюне, плазме и сыворотки крови, в лейкоцитах, маеринском молоке. Лизоцим продуцируется моноцитами крови и тканевыми макрофагами.

БЕЛКИ ОСТРОЙ ФАЗЫ – группа белков, обладающих антимикробным действием, способных к фагоцитозу, активации комплемента, формированию и ликвидации восполительного очага. Эти белки продуцируются в пчеи при действии цитокинов, в основном ИЛ-1, ФНО-α, ИЛ-6.

ЦИТОКИНЫ - гормоноподобные медиаторы, продуцируемые разными клетками и способные повлиять на функции этих же групп клеток .

ИЛ – цитокины, регулирующие взаимодействие лейкоцитовмежду собой и другими клеками.

ФАКТОРЫ РОСТА – большая группа гликопротеинов, контролирующих пролиферацию и созревание потомков СКК.

ИФ- противовирусные агенты

1 класс: ИФα иИФβ

2 класс ИФγ

ИФα –продуцируемый лейкоцитами, обладает преимущественно противовирусным, антипролиферативным и противоопухолевым действием

ИФβ образуемый фибробластами, обладает преимущественно противоопухолевы, а так же антивирусным действием.

ИФγ – продукт Т-хелперных и CD8 T –лимфоитов. Они обладают иммуномодулирующим и слабым противовирусным эффектом. 7. Интерфероны, природа. Способы получения и применения. Другие гуморальные факторы неспецифической резистентности.

Интерферон относится к важным защитным белкам иммунной системы. Открыт при изучении интерференции вирусов, т. е. явления, когда животные или культуры клеток, инфициро¬ванные одним вирусом, становились нечувс¬твительными к заражению другим вирусом. Оказалось, что интерференция обусловлена образующимся при этом белком, обладаю¬щим защитным противовирусным свойством. Этот белок назвали интерфероном.

Интерферон представляет собой семейство белков-гликопротеидов, которые синтезируются клетками иммунной системы и соединитель¬ной ткани. В зависимости от того, какими клетками синтезируется интерферон, выделя¬ют три типа: α, β и γ-интерфероны.

Альфа-интерферон вырабатывается лейкоцитами, и он получил название лейкоцитар¬ного; бета-интерферон называют фибробластным, поскольку он синтезируется фибробластами — клетками соединительной ткани, а гамма-интерферон — иммунным, так как он вырабатывается активированными Т-лимфоцитами, макрофагами, естественными киллерами, т. е. иммунными клетками.

Интерферон синтезируется в организме постоянно, и его концентрация в крови де¬ржится на уровне примерно 2 МЕ/мл (1 меж¬дународная единица — ME — это количество интерферона, защищающее культуру клеток от 1 ЦПД50 вируса). Выработка интерферона резко возрастает при инфицировании виру-сами, а также при воздействии индукторов интерферона, например РНК, ДНК, сложных полимеров. Такие индукторы интерферона получили название интерфероногенов.

Помимо противовирусного действия интер¬ферон обладает противоопухолевой защитой, так как задерживает пролиферацию (размноже¬ние) опухолевых клеток, а также иммуномодулирующей активностью, стимулируя фагоцитоз, естественные киллеры, регулируя антителообразование В-клетками, активируя экспрессию главного комплекса гистосовместимости.

Механизм действия интерферона сложен. Интерферон непосредственно на вирус вне клетки не действует, а связывается со спе¬циальными рецепторами клеток и оказыва¬ет влияние на процесс репродукции вируса внутри клетки на стадии синтеза белков.

Применение интерферона. Действие интерферона тем эффективнее, чем раньше он начинает синтезироваться или пос¬тупать в организм извне. Поэтому его использу¬ют с профилактической целью при многих ви¬русных инфекциях, например гриппе, а также с лечебной целью при хронических вирусных инфекциях, таких как парентеральные гепати¬ты (В, С, D), герпес, рассеянный склероз и др. Интерферон дает положительные результаты при лечении злокачественных опухолей и забо¬леваний, связанных с иммунодефицитами.

Интерфероны обладают видоспецифичностью, т. е. интерферон человека менее эффек¬тивен для животных и наоборот. Однако эта видоспецифичность относительна.

Получение интерферона. Получают интерферон двумя способами: а) путем инфи¬цирования лейкоцитов или лимфоцитов кро¬ви человека безопасным вирусом, в результате чего инфицированные клетки синтезируют интерферон, который затем выделяют и конс¬труируют из него препараты интерферона; б) генно-инженерным способом — путем выра¬щивания в производственных условиях рекомбинантных штаммов бактерий, способных продуцировать интерферон. Обычно используют рекомбинантные штаммы псевдомонад, кишечной палочки со встроенными в их ДНК генами интерферона. Интерферон, получен¬ный генно-инженерным способом, носит на¬звание рекомбинантного. В нашей стране рекомбинантный интерферон получил офици¬альное название «Реаферон». Производство этого препарата во многом эффективнее и дешевле, чем лейкоцитарного.

Рекомбинантный интерферон нашел ши¬рокое применение в медицине как профилак¬тическое и лечебное средство при вирусных инфекциях, новообразованиях и при иммунодефицитах.

Помимо интерферона к гуморальным факторам не специфической защиты относятся:

ИЛ – цитокины, регулирующие взаимодействие лейкоцитовмежду собой и другими клеками.

ФАКТОРЫ РОСТА – большая группа гликопротеинов, контролирующих пролиферацию и созревание потомков СКК.

СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТ –многокомпонентная самособирающаяся система белков сыворотки крови. Играет важную роль в поддержании гоместаза.

9. Структура и функции иммунной системы.

Иммунная система – совокупность органов и тканей и клеток, обеспечивающих клеточно-генетическое постоянство организма и его специфическую защиту.

Иммунная система представлена лимфоидной тканью. Это спе-циализированная, анатомически обособленная ткань, разбросан¬ная по всему организму в виде различных лимфоидных образо¬ваний. К лимфоидной ткани относятся вилочковая, или зобная, железа, костный мозг, селезенка, лимфатические узлы (группо¬вые лимфатические фолликулы, или пейеровы бляшки, минда¬лины, подмышечные, паховые и другие лимфатические образо-вания, разбросанные по всему организму), а также циркулиру¬ющие в крови лимфоциты. Лимфоидная ткань состоит из ретикулярных клеток, составляющих остов ткани, и лимфо¬цитов, находящихся между этими клетками. Основными функ¬циональными клетками иммунной системы являются лимфоци¬ты, подразделяющиеся на Т- и В-лимфоциты и их субпопуля¬ции. Общее число лимфоцитов в человеческом организме дос-тигает 1012, а общая масса лимфоидной ткани составляет при¬мерно 1—2 % от массы тела.

Компоненты иммунной системы:

Органы Клетки Биомолекулы

Центральные- ККМ Предствинники иммунокомптент. клеток АТ

Тимус Т-лимфоциты Цитокины

Переферические л/у 1.интерлейкины

Аппендикс 2.итерфероны

Пейровы бляшки 3.ФНО

Миндалины 4.колониестимулирущий фактор

Селезенка

Функции иммунной системы. Иммунная система выполняет функцию специфической защиты от анти¬генов, представ¬ляющую собой лимфоидную ткань, способную комплексом клеточных и гуморальных реак¬ций, осуществляемых с помощью набора иммунореагентов, нейтрализовать, обезвредить, удалить, разрушить генетически чужеродный антиген, попавший в организм извне или об¬разовавшийся в самом организме.

Специфическая функция иммунной системы в обезвреживании антигенов дополняется ком¬плексом механизмов и реакций неспецифичес¬кого характера, направленных на обеспечение резистентности организма к воздействию любых чужеродных веществ, в том числе и антигенов.

8. Понятие об иммунитете. Виды иммунитета. Видовой (наследственный) иммунитет.

Различают несколько основных видов иммунитета.

Врожденный, иди видовой, иммунитет, он же наследственный, генетический, консти¬туциональный — это выработанная в про¬цессе филогенеза генетически закреплен¬ная, передающаяся по наследству невоспри¬имчивость данного вида и его индивидов к какому-либо антигену (или микроорганиз¬му), обусловленная биологическими осо¬бенностями самого организма, свойствами данного антигена, а также особенностями их взаимодействия.

Примером может служить невосприимчи¬вость человека к некоторым возбудителям, в том числе к особо опасным для сельскохо¬зяйственных животных (чума крупного рога¬того скота, болезнь Ньюкасла, поражающая птиц, оспа лошадей и др.), нечувствитель¬ность человека к бактериофагам, поражаю¬щим клетки бактерий. К генетическому им¬мунитету можно также отнести отсутствие взаимных иммунных реакций на тканевые антигены у однояйцовых близнецов; различают чувствительность к одним и тем же антигенам у различных линий животных, т. е. животных с различным генотипом.

Видовой иммунитет может быть абсолют¬ным и относительным. Например, нечувс¬твительные к столбнячному токсину лягушки могут реагировать на его введение, если по¬высить температуру их тела. Белые мыши, не чувствительные к какому-либо антигену, при¬обретают способность реагировать на него, если воздействовать на них иммунодепрессантами или удалить у них центральный орган иммунитета — тимус.

Приобретенный иммунитет — это невос¬приимчивость к антигену чувствительного к нему организма человека, животных и пр., приобретаемая в процессе онтогенеза в результате естественной встречи с этим антигеном организма, например, при вак¬цинации.

Примером естественного приобретенного иммунитета у человека может служить не¬восприимчивость к инфекции, возникающая после перенесенного заболевания, так назы¬ваемый постинфекционный иммунитет (на¬пример, после брюшного тифа, дифтерии и других инфекций), а также «проиммуниция», т. е. приобретение невосприимчивости к ряду микроорганизмов, обитающих в окружающей среде и в организме человека и постепен¬но воздействующих на иммунную систему своими антигенами.

В отличие от приобретенного иммунитета в результате перенесенного инфекционного за¬болевания или «скрытной» иммунизации, на практике широко используют преднамерен¬ную иммунизацию антигенами для создания к ним невосприимчивости организма. С этой целью применяют вакцинацию, а также вве-дение специфических иммуноглобулинов, сывороточных препаратов или иммунокомпетентных клеток. Приобретаемый при этом иммунитет называют поствакци¬нальным, и служит он для защиты от возбу-дителей инфекционных болезней, а также других чужеродных антигенов.

Приобретенный иммунитет может быть ак¬тивным и пассивным. Активный иммунитет обусловлен активной реакцией, активным вовлечением в процесс иммунной системы при встрече с данным антигеном (например, поствакцинальный, постинфекционный им¬мунитет), а пассивный иммунитет формируется за счет введения в организм уже готовых иммунореагентов, способных обеспечить защиту от антигена. К таким иммунореагентам отно¬сятся антитела, т. е. специфические иммуног-лобулины и иммунные сыворотки, а также иммунные лимфоциты. Иммуноглобулины широко используют для пассивной иммуни¬зации, а также для специфического лечения при многих инфекциях (дифтерия, ботулизм, бешенство, корь и др.). Пассивный иммуни¬тет у новорожденных детей создается имму¬ноглобулинами при плацентарной внутриут¬робной передаче антител от матери ребенку играет существенную роль в защите от многих детских инфекций в первые месяцы жизни ребенка.

Поскольку в формировании иммунитета принимают участие клетки иммунной сис¬темы и гуморальные факторы, принято ак¬тивный иммунитет дифференцировать в за¬висимости от того, какой из компонентов иммунных реакций играет ведущую роль в формировании защиты от антигена. В связи с этим различают клеточный, гуморальный, клеточно-гуморальный и гуморально-клеточный иммунитет.

Примером клеточного иммунитета может служить противоопухолевый, а также транс¬плантационный иммунитет, когда ведущую роль в иммунитете играют цитотоксические Т-лимфоциты-киллеры; иммунитет при токсинемических инфекциях (столбняк, боту¬лизм, дифтерия) обусловлен в основном ан-тителами (антитоксинами); при туберкулезе ведущую роль играют иммунокомпетентные клетки (лимфоциты, фагоциты) с участием специфических антител; при некоторых ви¬русных инфекциях (натуральная оспа, корь и др.) роль в защите играют специфические антитела, а также клетки иммунной системы.

В инфекционной и неинфекционной пато¬логии и иммунологии для уточнения харак¬тера иммунитета в зависимости от природы и свойств антигена пользуются также такой терминологией: антитоксический, противо¬вирусный, противогрибковый, противобактериальный, противопротозойный, трансплан-тационный, противоопухолевый и другие ви¬ды иммунитета.

Наконец, иммунное состояние, т. е. актив¬ный иммунитет, может поддерживаться, со¬храняться либо в отсутствие, либо только в присутствии антигена в организме. В первом случае антиген играет роль пускового фак¬тора, а иммунитет называют стерильным. Во втором случае иммунитет трактуют как не¬стерильный. Примером стерильного иммуни¬тета является поствакцинальный иммунитет при введении убитых вакцин, а нестерильного — иммунитет при туберкулезе, который со¬храняется только в присутствии в организме микобактерий туберкулеза.

Иммунитет (резистентность к антигену) может быть системным, т. е. генерализован¬ным, и местным, при котором наблюдается более выраженная резистентность отдельных органов и тканей, например слизистых верх¬них дыхательных путей (поэтому иногда его называют мукозальным).

Видовой (наследственный) иммунитет.

Объяснить видовой иммунитет можно с разных позиций, прежде всего отсутствием у того или иного вида рецепторного аппарата, обеспечивающего пер¬вый этап взаимодействия данного антигена с клетками или молекулами-мишенями, опре¬деляющими запуск патологического процесса или активацию иммунной системы. Не исклю¬чены также возможность быстрой деструкции антигена, например, ферментами организма или же отсутствие условий для приживления и размножения микроба (бактерий, вирусов) в организме. В конечном итоге это обусловле¬но генетическими особенностями вида, в час-тности отсутствием генов иммунного ответа к данному антигену.

10. Иммунокомпетентные клетки. Т- и В-лимфоциты, макрофаги, их кооперация.

Иммунокомпетентные клетки - клетки, способные специфически распознавать антиген и отвечать на него иммунной реакцией. Такими клетками являются Т- и В-лимфоциты (тимусзависимые и костномозговые лимфоциты), которые под влиянием чужеродных агентов дифференцируются в сенсибилизированный лимфоцит и плазматическую клетку.

Т-лимфоциты – это сложная по составу группа клеток, которая происходит от полипотентной стволовой клетки костного мозга, а созревает и дифференцируется в тимусе из предшественников. Т-лимфоциты разделяются на две субпопуляции: иммунорегуляторы и эффекторы. Задачу регуляции иммунного ответа выполняют Т-хелперы. Эффекторную функцию осуществляют Т-киллеры и естественные киллеры. В организме Т-лимфоциты обеспечивают клеточные формы иммунного ответа, определяют силу и продолжительность иммунной реакции.

B-лимфоциты – преимущественно эффекторные иммунокомпетентные клетки. Зрелые В-лимфоциты и их потомки – плазматические клетки являются антителопродуцентами. Их основными продуктами являются иммуноглобулины. В-лимфоциты участвуют в формировании гуморального иммунитета, В-клеточной иммунологической памяти и гиперчувствительности немедленного типа.

Макрофаги - клетки соединительной ткани, способные к активному захвату и перевариванию бактерий, остатков клеток и других, чужеродных для организма частиц. Основная функция макрофагов сводится к борьбе с теми бактериями, вирусами и простейшими, которые могут существовать внутри клетки-хозяина, при помощи мощных бактерицидных механизмов. Роль макрофагов в иммунитете исключительно важна - они обеспечивают фагоцитоз, переработку и представление антигена T-клеткам.

Кооперация иммунокомпетентных клеток. Иммунная реакция организма может иметь различный характер, но всегда начинается с захвата антигена макрофагами крови и тканей или же со связывания со стромой лимфоидных органов. Нередко антиген адсорбируется также на клетках паренхиматозных органов. В макрофагах он может полностью разрушаться, но чаще подвергается лишь частичной деградации. В частности, большинство антигенов в лизосомах фагоцитов в течение часа подвергается ограниченной денатурации и протеолизу. Оставшиеся от них пептиды (как правило, два-три остатка аминокислот) комплексируются с экспрессированными на внешней мембране макрофагов молекулами МНС.

Макрофаги и все другие вспомогательные клетки, несущие на внешней мембране антигены, называются антигенпрезентирующими, именно благодаря им Т- и В-лимфоциты, выполняя функцию презентации, позволяют быстро распознавать антиген.

Иммунный ответ в виде антителообразования происходит при распознавании В-клетками антигена, который индуцирует их пролиферацию и дифференциацию в плазмоцит. Прямое воздействие на В-клетку без участия Т-клеток могут оказать только тимуснезависимые антигены. В этом случае В-клетки кооперируются с Т-хелперами и макрофагами. Кооперация на тимусзависимый антиген начинается с его презентации на макрофаге Т-хелперу. В механизме этого распознавания ключевую роль имеют молекулы МНС, так как рецепторы Т-хелперов распознают номинальный антиген как комплекс в целом или же, как модифицированные номинальным антигеном молекулы МНС, приобретшие чужеродность. Распознав антиген, Т-хелперы секретируют γ-интерферон, который активирует макрофаги и способствует уничтожению захваченных ими микроорганизмов. Хелперный эффект на В-клетки проявляется пролиферацией и дифференциацией их в плазмоциты. В распознавании антигена при клеточном характере иммунного ответа, кроме Т-хелперов, участвуют также Т-киллеры, которые обнаруживают антиген на тех антигенпрезентирующих клетках, где он комплексируется с молекулами МНС. Более того, Т-киллеры, обусловливающие цитолиз, способны распознавать не только трансформированный, но и нативный антиген. Приобретая способность вызывать цитолиз, Т-киллеры связываются с комплексом антиген + молекулы МНС класса 1 на клетках-мишенях; привлекают к месту соприкосновения с ними цитоплазматические гранулы; повреждают мембраны мишеней после экзоцитоза их содержимого.

В результате продуцируемые Т-киллерами лимфотоксины вызывают гибель всех трансформированных клеток организма, причем особенно чувствительны к нему клетки, зараженные вирусом. При этом наряду с лимфотоксином активированные Т-киллеры синтезируют интерферон, который препятствует проникновению вирусов в окружающие клетки и индуцирует в клетках образование рецепторов лимфотоксина, тем самым повышая их чувствительность к литическому действию Т-киллеров.

Кооперируясь в распознавании и элиминации антигенов, Т-хелперы и Т-киллеры не только активируют друг друга и своих предшественников, но и макрофагов. Те же, в свою очередь, стимулируют активность различных субпопуляций лимфоцитов.

Регуляция клеточного иммунного ответа, как и гуморального, осуществляется Т-супрессорами, которые воздействуют на пролиферацию цитотоксических и антигенпрезентирующих клеток.

Цитокины. Все процессы кооперативных взаимодействий иммунокомпетентных клеток, независимо от характера иммунного ответа, обусловливаются особыми веществами с медиаторными свойствами, которые секретируются Т-хелперами, Т-киллерами, мононуклеарными фагоцитами и некоторыми другими клетками, участвующими в реализации клеточного иммунитета. Все их многообразие принято называть цитокинами. По структуре цитокины являются протеинами, а по эффекту действия — медиаторами. Вырабатываются они при иммунных реакциях и обладают потенциирующим и аддитивным действием; быстро синтезируясь, цитокины расходуются в короткие сроки. При угасании иммунной реакции синтез цитокинов прекращается. 11. Иммуноглобулины, структура и функции.

Природа иммуноглобулинов. В ответ на введение антигена иммунная систе¬ма вырабатывает антитела — белки, способные специфически со¬единяться с антигеном, вызвавшим их образование, и таким образом участвовать в иммунологических реакциях. Относятся ан¬титела к γ-глобулинам, т. е. наименее подвижной в электричес¬ком поле фракции белков сыворотки крови. В организме γ-глобулины вырабатываются особыми клетками — плазмоцитами. γ-глобулины, несущие функции антител, получили название иммуноглобули¬нов и обозначаются символом Ig. Следовательно, антитела — это иммуноглобулины, вырабатываемые в ответ на введение анти¬гена и способные специфически взаимодействовать с этим же антигеном.

Функции. Первичная функция состоит во взаимодействии их активных центров с комплементарными им де¬терминантами антигенов. Вторичная функция состоит в их способности:

• связывать антиген с целью его нейтрализации и элиминации из организма, т. е. принимать участие в формировании защи¬ты от антигена;

• участвовать в распознавании «чужого» антигена;

• обеспечивать кооперацию иммунокомпетентных клеток (мак¬рофагов, Т- и В-лимфоцитов);

• участвовать в различных формах иммунного ответа (фагоци¬тоз, киллерная функция, ГНТ, ГЗТ, иммунологическая то¬лерантность, иммунологическая память).

Структура антител. Белки иммуноглобулинов по химическому составу относятся к гликопротеидам, так как состоят из проте¬ина и сахаров; построены из 18 аминокислот. Имеют видовые отличия, связанные главным образом с набором аминокислот. Их молекулы имеют цилиндрическую форму, они видны в электронном микроскопе. До 80 % иммуноглобулинов имеют константу седиментации 7S; устойчивы к слабым кисло¬там, щелочам, нагреванию до 60 °С. Выделить иммуноглобули¬ны из сыворотки крови можно физическими и химическими ме¬тодами (электрофорез, изоэлектрическое осаждение спиртом и кислотами, высаливание, аффинная хроматография и др.). Эти методы используют в производстве при приготовлении иммунобиологических препаратов.

Иммуноглобулины по структуре, антигенным и иммунобио¬логическим свойствам разделяются на пять классов: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD. Иммуноглобулины М, G, А имеют под¬классы. Например, IgG имеет четыре подкласса (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4). Все классы и подклассы различаются по аминокис¬лотной последовательности.

Молекулы иммуноглобулинов всех пяти классов состоят из полипептидных цепей: двух одинаковых тяжелых цепей Н и двух одинаковых легких цепей — L, соединенных между собой дисульфидными мостиками. Соответственно каждому классу иммуноглобулинов, т.е. М, G, A, E, D, разли¬чают пять типов тяжелых цепей: μ (мю), γ (гамма), α (альфа), ε (эпсилон) и Δ (дельта), различающихся по антигенности. Легкие цепи всех пяти классов являются общими и бывают двух типов: κ (каппа) и λ (лямбда); L-цепи иммуноглобулинов различных классов могут вступать в соединение (рекомбинироваться) как с гомологичны¬ми, так и с гетерологичными Н-цепями. Однако в одной и той же молекуле могут быть только идентичные L-цепи (κ или λ). Как в Н-, так и в L-цепях имеется вариабельная — V область, в которой последовательность амино¬кислот непостоянна, и константная — С область с постоянным набором аминокислот. В легких и тяжелых цепях различают NH2- и СООН-концевые группы.

При обработке γ-глобулина меркаптоэтанолом разрушаются дисульфидные связи и молекула иммуноглобулина распадается на отдельные цепи полипептидов. При воздействии протеолитическим ферментом папаином иммуноглобулин расщепляется на три фрагмента: два не кристаллизующихся, содержащих детерминантные группы к антигену и названных Fab-фрагментами I и II и один кристаллизующий Fc-фрагмент. FabI- и FabII-фрагменты сходны по свойствам и аминокислотному составу и отличаются от Fc-фрагмента; Fab-и Fc-фрагменты являются компактными образованиями, соеди¬ненными между собой гибкими участками Н-цепи, благодаря чему молекулы иммуноглобулина имеют гибкую структуру.

Как Н-цепи, так и L-цепи имеют отдельные, линейно свя¬занные компактные участки, названные доменами; в Н-цепи их по 4, а в L-цепи — по 2.

Активные центры, или детерминанты, которые формиру¬ются в V-областях, занимают примерно 2 % поверхности мо¬лекулы иммуноглобулина. В каждой молекуле имеются две де¬терминанты, относящиеся к гипервариабельным участкам Н- и L-цепей, т. е. каждая молекула иммуноглобулина может свя¬зать две молекулы антигена. Поэтому антитела являются двух¬валентными.

Типовой структурой молекулы иммуноглобулина является IgG. Остальные классы иммуноглобулинов отличаются от IgG дополнительными элементами организации их молеку¬лы.

В ответ на введение любого антигена могут вырабатываться антитела всех пяти классов. Обычно вначале вырабатывается IgM, затем IgG, остальные — несколько позже. 13. Антигены: определение, основные свойства. Антиге¬ны бактериальной клетки.

Антиген – это биополимер органической природы, генетически чужеродный для макроорганизма, который при попадании в последний распознаётся его иммунной системой и вызывает иммунные реакции, направленные на его устранение.

Антигены обладают рядом характерных свойств: антигенностью, специфичностью и иммуногенностью.

Антигенность. Под антигенностью понимают потенциаль¬ную способность молекулы антигена акти¬вировать компоненты иммунной системы и специфически взаимодействовать с фактора¬ми иммунитета (антитела, клон эффекторных лимфоцитов). Иными словами, антиген дол¬жен выступать специфическим раздражителем по отношению к иммунокомпетентным клет-кам. При этом взаимодействие компоненты иммунной системы происходит не со всей молекулой одновременно, а только с ее не¬большим участком, который получил название «антигенная детерминанта», или «эпитоп».

Чужеродность является обязательным усло¬вием для реализации антигенности. По этому критерию система приобретенного иммунитета дифференцирует потенциально опасные объ¬екты биологического мира, синтезированные с чужеродной генетической матрицы. Понятие «чужеродность» относительное, так как иммунокомпетентные клетки не способны напря¬мую анализировать чужеродный генетический код. Они воспринимают лишь опосредованную информацию, которая, как в зеркале, отражена в молекулярной структуре вещества.

Иммуногенность — потенциальная способ¬ность антигена вызывать по отношению к себе в макроорганизме специфическую за-щитную реакцию. Степень иммуногенности зависит от ряда факторов, которые можно объединить в три группы: 1. Молекулярные особенности антигена; 2. Клиренс антигена в организме; 3. Реактивность макроорганизма.

К первой группе факторов отнесены природа, химический состав, молекулярный вес, струк¬тура и некоторые другие характеристики.

Иммуногенность в значительной степени за¬висит от природы антигена. Важна также оптическая изомерия аминокислот, составляющих молекулу белка. Большое значение имеет размер и молекулярная масса антигена. На степень иммуногенности также оказыва¬ет влияние пространственная структура анти¬гена. Оказалась также существенной стерическая стабильность молекулы антигена. Еще одним важным условием иммуно¬генности является растворимость антигена.

Вторая группа факторов связана с динамикой поступления антигена в организм и его выведе¬ния. Так, хорошо известна зависимость иммуногенности антигена от способа его введения. На иммунный ответ влияет количество пос¬тупающего антигена: чем его больше, тем более выражен иммунный ответ.

Третья группа объединяет факторы, опреде¬ляющие зависимость иммуногенности от со¬стояния макроорганизма. В этой связи на пер¬вый план выступают наследственные факторы.

Специфичностью называют способность ан¬тигена индуцировать иммунный ответ к строго определенному эпитопу. Это свойство обуслов¬лено особенностями формирования иммунно¬го ответа — необходима комплементарность рецепторного аппарата иммунокомпетентных клеток к конкретной антигенной детерминанте. Поэтому специфичность антигена во многом определяется свойствами составляющих его эпитопов. Однако при этом следует учитывать условность границ эпитопов, их структурное разнообразие и гетерогенность клонов антигенреактивных лимфоцитовой специфичности. В результате этого организм на антигенное раз¬дражение всегда отвечает поликлональными им¬мунным ответом.

Антиге¬ны бактериальной клетки. В структуре бактериальной клетки разли¬чают жгутиковые, соматические, капсульные и некоторые другие антигены. Жгутиковые, или Н-антигены, локализуют¬ся в локомоторном аппарате бактерий — их жгутиках. Они представляют собой эпитопы сократительного белка флагеллина. При на¬гревании флагеллин денатурирует, и Н-антиген теряет свою специфичность. Фенол не действует на этот антиген.

Соматический, или О-антиген, связан с клеточной стенкой бактерий. Его основу со¬ставляют ЛПС. О-антиген проявляет термос-табильные свойства — он не разрушается при длительном кипячении. Однако соматичес¬кий антиген подвержен действию альдегидов (например, формалина) и спиртов, которые нарушают его структуру.

Капсульные, или К-антигены, располагаются на поверхности клеточной стенки. Встречаются у бактерий, образующих капсулу. Как правило, К-антигены состоят из кислых полисахаридов (уроновые кислоты). В то же время у бациллы сибирской язвы этот антиген построен из по¬липептидных цепей. По чувствительности к нагреванию различают три типа К-антигена: А, В, и L. Наибольшая термостабильность ха¬рактерна для типа А, он не денатурирует даже при длительном кипячении. Тип В выдержи-вает непродолжительное нагревание (около 1 часа) до 60 оС. Тип L быстро разрушается при этой температуре. Поэтому частичное удале¬ние К-антигена возможно путем длительного кипячения бактериальной культуры.

На поверхности возбудителя брюшного ти¬фа и других энтеробактерий, которые облада¬ют высокой вирулентностью, можно обнару¬жить особый вариант капсульного антигена. Он получил название антигена вирулентнос¬ти, или Vi-антигена. Обнаружение этого ан¬тигена или специфичных к нему антител име¬ет большое диагностическое значение.

Антигенными свойствами обладают также бактериальные белковые токсины, ферменты и некоторые другие белки, которые секретируются бактериями в окружающую среду (на¬пример, туберкулин). При взаимодействии со специфическими антителами токсины, фер¬менты и другие биологически активные моле¬кулы бактериального происхождения теряют свою активность. Столбнячный, дифтерий¬ный и ботулинический токсины относятся к числу сильных полноценных антигенов, поэ-тому их используют для получения анатокси¬нов для вакцинации людей.

В антигенном составе некоторых бактерий выделяется группа антигенов с сильно выра¬женной иммуногенностью, чья биологическая активность играет ключевую роль в формиро¬вании патогенности возбудителя. Связывание таких антигенов специфическими антителами практически полностью инактивирует виру¬лентные свойства микроорганизма и обеспечи¬вает иммунитет к нему. Описываемые антиге¬ны получили название протективных. Впервые протективный антиген был обнаружен в гнойном отделяемом карбункула, вызванного ба¬циллой сибирской язвы. Это вещество являет¬ся субъединицей белкового токсина, которая ответственна за активацию других, собственно вирулентных субъединиц — так называемого отечного и летального факторов.

12. Классы иммуноглобулинов, их характеристика.

Иммуноглобулины по структуре, антигенным и иммунобио¬логическим свойствам разделяются на пять классов: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD.

Иммуноглобулин класса G. Изотип G состав¬ляет основную массу Ig сыворотки крови. На его долю приходится 70—80 % всех сывороточ¬ных Ig, при этом 50 % содержится в тканевой жидкости. Среднее содержание IgG в сыворот¬ке крови здорового взрослого человека 12 г/л. Период полураспада IgG — 21 день.

IgG — мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра (может одновременно свя¬зать 2 молекулы антигена, следовательно, его валентность равна 2), молекулярную массу около 160 кДа и константу седиментации 7S. Различают подтипы G1, G2, G3 и G4. Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и плазматическими клетками. Хорошо опре¬деляется в сыворотке крови на пике первич¬ного и при вторичном иммунном ответе.

Обладает высокой аффинностью. IgG1 и IgG3 связывают комплемент, причем G3 ак¬тивнее, чем G1. IgG4, подобно IgE, обладает цитофильностью (тропностью, или сродс¬твом, к тучным клеткам и базофилам) и участ¬вует в развитии аллергической реакции I типа. В иммунодиагностических реакциях IgG может проявлять себя как не¬полное антитело.

Легко проходит через плацентарный барь¬ер и обеспечивает гуморальный иммунитет новорожденного в первые 3—4 месяца жизни. Способен также выделяться в секрет слизис¬тых, в том числе в молоко путем диффузии.

IgG обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществля¬ет запуск комплемент-опосредованного цито¬лиза и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности.

Иммуноглобулин класса М. Наиболее круп¬ная молекула из всех Ig. Это пентамер, кото¬рый имеет 10 антигенсвязывающих центров, т. е. его валентность равна 10. Молекулярная масса его около 900 кДа, константа седи¬ментации 19S. Различают подтипы M1 и М2. Тяжелые цепи молекулы IgM в отличие от других изотипов построены из 5 доменов. Период полураспада IgM — 5 дней.

На его долю приходится около 5—10 % всех сывороточных Ig. Среднее содержание IgM в сыворотке крови здорового взрослого человека составляет около 1 г/л. Этот уровень у человека достигается уже к 2—4-летнему возрасту.

IgM филогенетически — наиболее древний иммуноглобулин. Синтезируется предшест¬венниками и зрелыми В-лимфоцитами. Образуется в начале первичного иммунного ответа, также первым начинает синтезиро¬ваться в организме новорожденного — опре¬деляется уже на 20-й неделе внутриутробного развития.

Обладает высокой авидностью, наиболее эффективный активатор комплемента по клас¬сическому пути. Участвует в формировании сывороточного и секреторного гуморального иммунитета. Являясь полимерной молекулой, содержащей J-цепь, может образовывать сек¬реторную форму и выделяться в секрет сли¬зистых, в том числе в молоко. Большая часть нормальных антител и изоагглютининов относится к IgM.

Не проходит через плаценту. Обнаружение специфических антител изотипа М в сыво¬ротке крови новорожденного указывает на бывшую внутриутробную инфекцию или де¬фект плаценты.

IgM обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществля¬ет запуск комплемент-опосредованного цито¬лиза и антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности.

Иммуноглобулин класса А. Существует в сы¬вороточной и секреторной формах. Около 60 % всех IgA содержится в секретах слизистых.

Сывороточный IgA: На его долю прихо¬дится около 10—15% всех сывороточных Ig. В сыворотке крови здорового взрослого чело¬века содержится около 2,5 г/л IgA, максимум достигается к 10-летнему возрасту. Период полураспада IgA — 6 дней.

IgA — мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра (т. е. 2-валентный), молекуляр¬ную массу около 170 кДа и константу седи¬ментации 7S. Различают подтипы А1 и А2. Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и плазматическими клетками. Хорошо опре¬деляется в сыворотке крови на пике первич¬ного и при вторичном иммунном ответе.

Обладает высокой аффинностью. Может быть неполным антителом. Не связывает комплемент. Не проходит через плацентар-ный барьер.

IgA обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществля¬ет запуск антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности.

Секреторный IgA: В отличие от сывороточ¬ного, секреторный sIgA существует в полимерной форме в виде ди- или тримера (4- или 6-валентный) и содержит J- и S-пeптиды. Молекулярная масса 350 кДа и выше, константа седиментации 13S и выше.

Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и их по¬томками — плазматическими клетками со¬ответствующей специализации только в пре¬делах слизистых и выделяется в их секреты. Объем продукции может достигать 5 г в сутки. Пул slgA считается самым многочисленным в организме — его количество превышает суммарное содержание IgM и IgG. В сыворотке крови не обнаруживается.

Секреторная форма IgA — основной фак¬тор специфического гуморального местного иммунитета слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы и респираторного тракта. Благодаря S-цепи он устойчив к действию протеаз. slgA не активи¬рует комплемент, но эффективно связывается с антигенами и нейтрализует их. Он препятс¬твует адгезии микробов на эпителиальных клетках и генерализации инфекции в преде¬лах слизистых.

Иммуноглобулин класса Е. Называют так¬же реагином. Содержание в сыворотке крови крайне невысоко — примерно 0,00025 г/л. Обнаружение требует применения специаль¬ных высокочувствительных методов диагнос¬тики. Молекулярная масса — около 190 кДа, константа седиментации — примерно 8S, мо¬номер. На его долю приходится около 0,002 % всех циркулирующих Ig. Этот уровень дости¬гается к 10—15 годам жизни.

Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и плазматическими клетками преиму¬щественно в лимфоидной ткани бронхолегочного дерева и ЖКТ.

Не связывает комплемент. Не проходит че¬рез плацентарный барьер. Обладает выражен¬ной цитофильностью — тропностью к тучным клеткам и базофилам. Участвует в развитии гиперчувствительности немедленного типа — реакция I типа.

Иммуноглобулин класса D. Сведений об Ig данного изотипа не так много. Практически полностью содержится в сыворотке крови в концентрации около 0,03 г/л (около 0,2 % от общего числа циркулирующихIg). IgD имеет молекулярную массу 160 кДа и константу се¬диментации 7S, мономер.

Не связывает комплемент. Не проходит че¬рез плацентарный барьер. Является рецепто¬ром предшественников В-лимфоцитов.

14. Антителообразование, первичный и вторичный ответ.

Способность к образованию ан¬тител появляется во внутриутробном периоде у 20-недельного эмбриона; после рождения начинается собственная продукция иммуноглобулинов, которая увеличивается до наступления зре¬лого возраста и несколько снижается к старости. Динамика об¬разования антител имеет различный характер в зависимости от силы антигенного воздействия (дозы антигена), частоты воздействия антигена, состояния организма и его иммунной системы. При первичном и повторном введении антигена динамика антителообразования также различна и протекает в несколько ста-дий. Выделяют латентную, логарифмическую, стацио¬нарную фазу и фазу снижения.

В латентной фазе происходят переработка и представление антигена иммунокомпетентным клеткам, размножение клона клеток, специализированного на выработку антител к данному антигену, начинается синтез ан¬тител. В этот период антитела в крови не обнаруживаются.

Во время логарифмической фазы синтезированные антитела высво¬бождаются из плазмоцитов и поступают в лимфу и кровь.

В ста¬ционарной фазе количество антител достигает максимума и ста-билизируется, затем наступает фаза снижения уровня антител. При первичном введении антигена (первичный иммунный ответ) латентная фаза составляет 3—5 сут, логарифмическая — 7— 15 сут, стационарная — 15—30 сут и фаза снижения — 1—6 мес. и более. Особенностью первичного иммунного ответа является то, что первоначально синтезируется IgM, а затем IgG.

В отличие от первичного иммунного ответа при вторичном введении антигена (вторичный иммунный ответ) латентный период укорочен до нескольких часов или 1—2 сут, логарифми¬ческая фаза характеризуется быстрым нарастанием и значитель¬но более высоким уровнем антител, который в последующих фазах длительно удерживается и медленно, иногда в течение не¬скольких лет, снижается. При вторичном иммунном ответе в отличие от первичного синтезируются главным образом IgG.

Такое различие динамики антителообразования при первич¬ном и вторичном иммунном ответе объясняется тем, что после первичного введения антигена в иммунной системе формирует¬ся клон лимфоцитов, несущих иммунологическую память о данном антигене. После повторной встречи с этим же антиге¬ном клон лимфоцитов с иммунологической памятью быстро раз¬множается и интенсивно включает процесс антителогенеза.

Очень быстрое и энергичное антителообразование при повтор¬ной встрече с антигеном используется в практических целях при необходимости получения высоких титров антител при производстве диагностических и лечебных сывороток от иммунизиро¬ванных животных, а также для экстренного создания иммуни¬тета при вакцинации.

15. Иммунологическая память. Иммунологическая толерантность.

Иммунологическая память. При повторной встрече с антигеном орга¬низм формирует более активную и быструю иммунную реакцию — вторичный иммунный ответ. Этот феномен получил название имму-нологической памяти.

Иммунологическая память имеет высо¬кую специфичность к конкретному анти¬гену, распространяется как на гуморальное, так и клеточное звено иммунитета и обус¬ловлена В- и Т-лимфоцитами. Она обра-зуется практически всегда и сохраняется годами и даже десятилетиями. Благодаря ей наш организм надежно защищен от повторных антигенных интервенций.

На сегодняшний день рассматривают два наиболее вероятных механизма формирова¬ния иммунологической памяти. Один из них предполагает длительное сохранение анти¬гена в организме. Этому имеется множество примеров: инкапсулированный возбудитель туберкулеза, персистирующие вирусы кори, полиомиелита, ветряной оспы и некоторые другие патогены длительное время, иногда всю жизнь, сохраняются в организме, под¬держивая в напряжении иммунную систему. Вероятно также наличие долгоживущих де¬ндритных АПК, способных длительно сохра¬нять и презентировать антиген.

Другой механизм предусматривает, что в про¬цессе развития в организме продуктивного им¬мунного ответа часть антигенореактивных Т- или В-лимфоцитов дифференцируется в малые покоящиеся клетки, или клетки иммунологической памяти. Эти клетки отличаются высокой спе¬цифичностью к конкретной антигенной детер¬минанте и большой продолжительностью жизни (до 10 лет и более). Они активно рециркулируют в организме, распределяясь в тканях и органах, но постоянно возвращаются в места своего про¬исхождения за счет хоминговых рецепторов. Это обеспечивает постоянную готовность иммунной системы реагировать на повторный контакт с антигеном по вторичному типу.

Феномен иммунологической памяти широко используется в практике вакцинации людей для создания напряженного иммунитета и под¬держания его длительное время на защитном уровне. Осуществляют это 2—3-кратными при¬вивками при первичной вакцинации и перио¬дическими повторными введениями вакцинно¬го препарата — ревакцинациями.

Однако феномен иммунологической памяти имеет и отрицательные стороны. Например, повторная попытка трансплантировать уже однажды отторгнутую ткань вызывает быст¬рую и бурную реакцию —криз отторжения.

Иммунологическая толе¬рантность — явле¬ние, противоположное иммунному ответу и иммунологической памяти. Проявляется она отсутствием специфического продуктивного иммунного ответа организма на антиген в связи с неспособностью его распознавания.

В отличие от иммуносупрессии имму¬нологическая толерантность предполагает изначальную ареактивность иммунокомпетентных клеток к определенному антигену.

Иммунологическую толерантность вызы¬вают антигены, которые получили название толерогены. Ими могут быть практически все вещества, однако наибольшей толерогенностью обладают полисахариды.

Иммунологическая толерантность быва¬ет врожденной и приобретенной. Примером врожденной толерантности является отсутс¬твие реакции иммунной системы на свои собственные антигены.Приобретенную толе¬рантность можно создать, вводя в организм вещества, подавляющие иммунитет (иммунодепрессанты), или же путем введения антигена в эмбриональном периоде или в первые дни после рождения индивидуума. Приобретенная толерантность может быть активной и пассив¬ной. Активная толерантность создается пу¬тем введения в организм толерогена, который формирует специфическую толерантность. Пассивную толерантность можно вызвать ве¬ществами, тормозящими биосинтетическую или пролиферативную активность иммунокомпетентных клеток (антилимфоцитарная сыворотка, цитостатики и пр.).

Иммунологическая толерантность отличает¬ся специфичностью — она направлена к строго определенным антигенам. По степени рас¬пространенности различают поливалентную и расщепленную толерантность. Поливалентная толерантность возникает одновременно на все антигенные детерминанты, входящие в со¬став конкретного антигена.

Для расщепленной, или моновалентной, толерантности характер¬на избирательная невосприимчивость каких-то отдельных антигенных детерминант.

Степень проявления иммунологической толе¬рантности существенно зависит от ряда свойств макроорганизма и толерогена.

Важное значение в индукции иммуноло¬гической толерантности имеют доза анти¬гена и продолжительность его воздействия. Различают высокодозовую и низкодозовую толерантность. Высокодозовую толерантность вызывают введением больших количеств вы-сококонцентрированного антигена. Низкодозовая толерантность, наоборот, вызывается очень малым количеством высокогомогенного молекулярного антигена.

Механизмы толерантности многообразны и до конца не расшифрованы. Известно, что ее основу составляют нормальные процессы регуляции иммунной системы. Выделяют три наиболее вероятные причины развития имму¬нологической толерантности:

1. Элиминация из организма антигенспецифических клонов лимфоцитов.

2. Блокада биологической активности иммунокомпетентных клеток.

3. Быстрая нейтрализация антигена анти¬телами.

Феномен иммунологической толерантнос¬ти имеет большое практическое значение. Он используется для решения многих важных проблем медицины, таких как пересадка ор¬ганов и тканей, подавление аутоиммунных реакций, лечение аллергий и других патоло¬гических состояний, связанных с агрессив-ным поведением иммунной системы.

16. Классификация гиперчувствительности по Джейлу и Кумбсу.

Изучение молекулярных механизмов аллер¬гии привело к созданию Джейлом и Кумбсом в 1968 г. новой классификации. В соответствии с ней различают четыре основных типа аллер¬гии: анафилактический (Iтип), цитотоксический (II тип), иммунокомплексный (III тип) и клеточноопосредованный (IV тип). Первые три типа относятся к ГНТ, четвертый — к ГЗТ. Ведущая роль в запуске ГНТ играют антитела (IgE, G и М), а ГЗТ — лимфоидно-макрофагальная реакция.

Тип реакции Фактор патогенеза Механизм патогенеза Клинический пример

I. анафилактический (ГНТ) IgE

IgG4

Образование рецепторного комплекса IgE (G4)-АсК тучных клеток и базофилов → Взаимодействие эпитопа аллергена с рецепторным комплексом → Активация тучных клеток и базофилов → Высвобождение медиаторов воспаления и других биологически активных веществ Анафилаксия, анафилактический шок, поллинозы

II. цитотоксический (ГНТ) IgM

IgG

Выработка цитотоксических антител → Активация антителозависимого цитолиза

Лекарственная волчанка, аутоиммунная гемолитическая болезнь, аутоиммунная тромбоцитопения

III. иммунокомплексный (ГНТ) IgM

IgG

Образование избытка иммунных комплексов → Отложение иммунных комплексов на базальных мембранах, эндотелии и в соединительнотканной строме → Активация антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности → Запуск иммунного воспаления Сывороточная болезнь, системные заболевания соединительной ткани, феномен Артюса, «лёгкое фермера»

IV. клеточно-опосредованный (ГЗТ) Т-лимфоциты Сенсибилизация Т-лимфоцитов → Активация макрофага → Запуск иммунного воспаления Кожно-аллергическая проба, контактная аллергия, белковая аллергия замедленного типа

17. Механизмы гиперчувствительности замедленного типа. Клинико-диагностическое значение.

К аллергическим реак¬циям относят два типа реагирования на чужеродное вещество: гиперчувствительность немедленного типа (ГНТ) и гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ). К ГНТ относятся аллергические реакции, проявляющиеся уже че¬рез 20—30 мин после повторной встречи с антигеном, а к ГЗТ — реакции, возникающие не ранее чем через 24—48 ч. Механизм и клинические проявления ГНТ и ГЗТ различны. ГНТ связана с вы¬работкой антител, а ГЗТ — с клеточными реакциями.

ГЗТ впервые описана Р. Кохом (1890). Эта форма проявления не связана с антителами, опосредована клеточными механизма¬ми с участием Т-лимфоцитов. К ГЗТ относятся следующие фор¬мы проявления: туберкулиновая реакция, замедленная аллергия к белкам, контактная аллергия.

В отличие от реакций I, II и III типов реакции IV типа не свя¬заны с антителами, а обусловлены клеточными реакциями, прежде всего Т-лимфоцитами. Реакции замедленного типа могут возникать при сенсибилизации организма:

1. Микроорганизмами и микробными антигенами (бактериальны¬ми, грибковыми, протозойными, вирусными); 2. Гельминтами; 3. Природными и искусственно синтезированными гаптенами (лекарственные препараты, красители); 4. Некоторыми белками.

Следовательно, реакция замедленного типа может вызывать¬ся практически всеми антигенами. Но наиболее ярко она про¬является на введение полисахаридов, низкомолекулярных пеп¬тидов, т. е. малоиммуногенных антигенов. При этом реакцию вызывают малые дозы антигенов и лучше всего при внутрикожном введении.

Механизм аллергической реакции этого типа состоит в сен¬сибилизации Т-лимфоцитов-хелперов антигеном. Сенсибилизация лимфоцитов вызывает выделение медиаторов, в частности интерлейкина-2, которые активируют макрофаги и тем самым вов¬лекают их в процесс разрушения антигена, вызвавшего сенсибилизацию лимфоцитов. Цитотоксичность проявляют также и сами Т-лимфоциты. О роли лимфоцитов в возникновении аллер¬гий клеточного типа свидетельствуют возможность передачи ал¬лергии от сенсибилизированного животного несенсибилизированному с помощью введения лимфоцитов, а также подавление реакции при помощи антилимфоцитарной сыворотки.

Морфологическая картина при аллергиях клеточного типа но¬сит воспалительный характер, обусловленный реакцией лимфо¬цитов и макрофагов на образующийся комплекс антигена с сенсибилизированными лимфоцитами.

Аллергические реакции клеточного типа проявляются в виде туберкулиновой реакции, замедленной аллергии к белкам, кон¬тактной аллергии.

Туберкулиновая реакция возникает через 5—6 ч после внутрикожного введения сенсибилизированным туберкулезной палоч¬кой животным или человеку туберкулина, т. е. антигенов туберкулезной палочки. Выражается реакция в виде покраснения, при¬пухлости, уплотнения на месте введения туберкулина. Сопровож¬дается иногда повышением температуры тела, лимфопенией. Раз¬витие реакции достигает максимума через 24—48 ч. Туберкули¬новая реакция используется с диагностической целью для вы-явления заболеваний туберкулезом или контактов организма с туберкулезной палочкой.

Замедленная аллергия возникает при сенсибилизации малы¬ми дозами белковых антигенов с адъювантом, а также конъюгатами белков с гаптенами. В этих случаях аллергическая реак¬ция возникает не раньше чем через 5 дней и длится 2—3 нед. Видимо, здесь играют роль замедленное действие конъюгированных белков на лимфоидную ткань и сенсибилизация Т-лимфоцитов.

Контактная аллергия возникает, если антигенами являются низкомолекулярные органические и неорганические вещества, которые в организме соединяются с белками, образуя конъюгаты. Конъюгированные соединения, выполняя роль гаптенов, вы¬зывают сенсибилизацию. Контактная аллергия может возникать при длительном контакте с химическими веществами, в том числе фармацевтическими препаратами, красками, косметичес¬кими препаратами (губная помада, краска для ресниц). Прояв¬ляется контактная аллергия в виде всевозможных дерматитов, т. е. поражений поверхностных слоев кожи.

Значение. Все реакции гиперчувствительности, в том числе и ГЗТ, имеют большое значение. Их механизмы лежат в основе воспаления, которое способствует локализации инфекционного агента или иного антигена в пределах определённых тканей и формированию полноценной иммунной реакции защитного характера.

18. Аллергические пробы, их сущности, применение.

Аллергические пробы - биологические реакции для диагностики ряда заболеваний, основанные на повышенной чувствительности организма, вызванной аллергеном.

При многих инфекционных заболеваниях за счет активации кле¬точного иммунитета развивается повышенная чувствительность организма к возбудителям и продуктам их жизнедеятельности. На этом основаны аллергические пробы, используемые для диагно¬стики бактериальных, вирусных, протозойных инфекций, мико¬зов и гельминтозов. Аллергические пробы обладают специфично¬стью, но нередко они бывают положительными у переболевших и привитых.

Все аллергические пробы подразделяют на две группы — про¬бы in vivo и in vitro.

К первой группе (in vivo) относятся кожные пробы, осуществ¬ляемые непосредственно на пациенте и выявляющие аллергию немедленного (через 20 мин) и замедленного (через 24 — 48 ч) типов.

Аллергические пробы in vitro основаны на выявлении сенсиби¬лизации вне организма больного. Их применяют тогда, когда по тем или иным причинам нельзя произвести кожные пробы, либо в тех случаях, когда кожные реакции дают неясные результаты.

Для проведения аллергических проб используют аллергены — диагностические препараты, предназначенные для выявления специфической сенсибилизации организма. Инфекционные аллергены, используемые в диагностике инфекционных заболева¬ний, представляют собой очищенные фильтраты бульонных куль¬тур, реже взвеси убитых микроорганизмов или АГ, выделенные из них.

Кожные пробы. Инфекционные аллергены вводят, как правило, внутрикожно или накожно, путем втирания в скарифицированные участки кожи. При внутрикожном способе в среднюю треть передней поверхно¬сти предплечья специальной тонкой иглой вводят 0,1 мл аллерге¬на. Через 28 — 48 ч оценивают результаты реакции ГЗТ, определяя на месте введения размеры папулы.

Неинфекционные аллергены (пыльца растений, бытовая пыль, пищевые продукты, лекарственные и химические препараты) вводят в кожу уколом (прик-тест), накожно путем скарификации и втирания или внутрикожной инъекцией разведенного раствора аллергена. В качестве отрицательного контроля используют ИХН, в качестве положительного — раствор гистамина. Результаты учи¬тывают в течение 20 мин (ГНТ) по величине папулы (иногда до 20 мм в диаметре), наличию отека и зуда. Внутрикожные пробы ставят в случае отрицательного или сомнительного результата прик-теста. По сравнению с последним, дозу аллергена уменьшают в 100-5000 раз.

Кожные пробы на наличие ГЗТ широко применяют для выяв¬ления инфицированности людей микобактериями туберкулеза (проба Манту), возбудителями бруцеллеза (проба Бюрне), лепры (реакция Митсуды), туляремии, сапа, актиномикоза, дерматомикозов, токсоплазмоза, некоторых гельминтозов и др.

Пробы in vitro. Эти методы исследования безопасны для больного, достаточ¬но чувствительны, позволяют количественно оценить уровень аллергизации организма.

В настоящее время разработаны тесты для определения сенси¬билизации, основанные на реакциях Т- и B-лимфоцитов, ткане¬вых базофилов, выявлении общих специфических IgE в сыворот¬ке крови и др. К ним относятся реакции торможения миграции лейкоцитов и бласттрансформации лимфоцитов, специфическое розеткообразование, базофильный тест Шелли, реакция дегрануляции тканевых базофилов, а также аллергосорбентные методы (определение специфических IgE в сыворотке крови).

Реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). РТМЛ ос¬нована на подавлении миграции моноцитов и других лейкоцитов под действием медиаторов, вырабатываемых сенсибилизирован¬ными лимфоцитами, в присутствии специфического аллергена.

Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТ). В основе этой реакции лежит способность нормальных лимфоцитов перифери¬ческой крови вступать в митоз и превращаться в бластные формы при культивировании их in vitro под действием специфических фак¬торов — аллергенов и неспецифических стимуляторов митогенеза — митогенов (фитогемагглютинин, конканавалин А, липополисахариды и другие вещества).

Реакция специфического розеткообразования. Розетки — харак¬терные образования, возникающие in vitro в результате прилипа¬ния эритроцитов к поверхности иммунокомпетентных клеток. Розеткообразование может происходить спонтанно, поскольку Т-лимфоциты человека содержат рецепторы к эритроцитам барана. Спон¬танное розеткообразование здоровых людей составляет 52 — 53% и служит показателем функционального состояния Т-лимфоцитов. Этот феномен воспроизводится также и в том случае, если используют эритроциты, на которых фиксированы соответствую¬щие аллергены.

Реакция дегрануляции тканевых базофилов. Методика основа¬на на том, что под действием аллергена происходит дегрануляция тканевых базофилов крысы, предварительно сенсибилизирован¬ных цитофильными AT из сыворотки крови больного.

Базофильный тест Шелли. Известно, что базофильные гранулоциты человека или кролика также дегранулируются в присут¬ствии сыворотки больного и аллергена, к которому чувствителен данный пациент.

Определение антител класса IgE in vitro. Лабораторная диагно¬стика заболеваний, в основе которых лежит ГНТ, основана на определении аллергенспецифических IgEанти-IgE. При использо¬вании радиоактивной метки метод носит на¬звание радиоаллергосорбентного теста (PACT), но чаще в каче-стве метки используют фермент или флюоресцирующее вещество (ФАСТ). Время анализа — 6 — 7 часов. Принцип метода: фиксиро¬ванный на твердой основе известный аллерген инкубируют с сы-вороткой крови больного; находящиеся в сыворотке специфичес¬кие IgEанти-IgE связываются с аллергеном и, таким образом, остаются фиксированными на основе и могут вступать в специ¬фическое взаимодействие с добавляемыми мечеными анти-IgE.

19. Гиперчувствительностъ немедленного типа. Меха¬низмы возникновения, клиническая значимость.

Гиперчувствительность немедленного типа (ГНТ) – ги¬перчувствительность, обусловленная антителами (IgE, IgG, IgM) против аллергенов. Развивается через не¬сколько минут или часов после воздействия аллергена: рас¬ширяются сосуды, повышается их проницаемость, развивают¬ся зуд, бронхоспазм, сыпь, отеки. Поздняя фаза ГНТ дополня¬ется действием продуктов эозинофилов и нейтрофилов.

К ГНТ относятся I, II и III типы аллергических реакций (по Джеллу и Кумбсу): I тип — анафилактический, обусловлен¬ный главным образом действием IgE; II тип — цитотоксический, обусловленный действиемIgG, IgM; III тип — иммунокомплексный, развивающийся при образовании иммунного комплекса IgG, IgM с антигенами. В отдельный тип выделяют антирецепторные реакции.

Основные типы реакций гиперчувствительности

I тип — анафилактический. При первичном контакте с ан¬тигеном образуются IgE, которые прикрепляются Fc-фрагментом к тучным клеткам и базофилам. Повторно вве¬денный антиген перекрестно связывается с IgE на клетках, вызывая их дегрануляцию, выброс гистамина и других медиа¬торов аллергии.

Первичное поступление аллергена вызывает продук¬цию плазмоцитами IgE, IgG4. Синтезированные IgE прикрепляются Fc-фрагментом к Fc-peцепторам (FceRl) базофилов в крови и тучных клеток в слизистых оболочках, соединительной ткани. При повторном поступ¬лении аллергена на тучных клетках и базофилах образуются комплексы IgE с аллергеном (перекрестная сшивка FceRl анти¬геном), вызывающие дегрануляцию клеток.

Клинические проявления гиперчувствительности I типа.

Клинические проявления гиперчувствительности I типа могут протекать на фоне атопии. Атопия — наследственная предрасположенность к развитию ГНТ, обусловленная повы¬шенной выработкой IgE-антител к аллергену, повышенным количеством Fc-рецепторов для этих антител на тучных клет¬ках, особенностями распределения тучных клеток и повы¬шенной проницаемостью тканевых барьеров.

Анафилактический шок — протекает остро с развитием коллапса, отеков, спазма гладкой мускулатуры; часто заканчи¬вается смертью. Крапивница — увеличивается проницае¬мость сосудов, кожа краснеет, появляются пузыри, зуд. Бронхиальная астма — развиваются воспаление, бронхо-спазм, усиливается секреция слизи в бронхах.

II тип — цитотоксический. Антиген, расположенный на клетке «узнается» антителами классов IgG, IgM. При взаимо¬действии типа «клетка-антиген-антитело» происходит актива¬ция комплемента и разрушение клетки по трем направлениям: комплементзависимый цитолиз; фагоцитоз; антителозависимая клеточная цитотоксичность. Время реакции — минуты или часы.

Ко II типу гиперчувствительности близки антирецепторные реакции (так называемый IV тип гиперчувствительности), основой которых являются антирецепторные антитела, на¬пример антитела против рецепторов к гормонам.

Клинические проявления II типа. По II типу гиперчувствительнос¬ти развиваются некоторые аутоиммунные болезни, обуслов¬ленные появлением аутоантител к антигенам собственных тканей: злокачественная миастения, аутоиммун¬ная гемолитическая анемия, вульгарная пузырчатка, синдром Гудпасчера, аутоиммунный гипертиреоидизм, инсулинозависимый диабет II типа.

Аутоиммунную гемолитическую анемию вызывают анти¬тела против Rh-антигена эритроцитов; эритроциты разруша¬ются в результате активации комплемента и фагоцитоза. Ле¬карственно-индуцируемые гемолитическая анемия, гранулоцитопения и тромбоцитопения сопровождаются появле¬нием антител против лекарства — гаптена и цитолизом кле¬ток, содержащих этот антиген.

III тип — иммунокомплексный. Антитела классов IgG, IgM образуют с растворимыми антигенами иммунные комплексы, которые активируют комплемент. При избытке антигенов или недостатке комплемента иммунные комплексы откладывают¬ся на стенке сосудов, базальных мембранах, т. е. структурах, имеющих Fc-рецепторы.

Первичными компонентами III типа гиперчувствительности являются растворимые иммунные комплексы антиген-анти¬тело и комплемент (анафилатоксины С4а, СЗа, С5а). При из¬бытке антигенов или недостатке комплемента иммунные комплексы откладываются на стенке сосудов, базальных мем¬бранах, т.е. структурах, имеющих Fc-рецепторы. Поврежде¬ния обусловлены тромбоцитами, нейтрофилами, иммунными комплексами, комплементом. Привлекаются провоспалительные цитокины, включая TNF-a и хемокины. На поздних стади¬ях в процесс вовлекаются макрофаги.

Реакция может быть общей (например, сывороточная бо¬лезнь) или вовлекать отдельные органы, ткани, включая ко¬жу (например, системная эритематозная волчанка, реакция Артюса), почки (например, волчаночный нефрит), легкие (например, аспергиллез) или другие органы. Эта реакция может быть обусловлена многими микроорганизмами. Она развивается через 3-10 часов после экспозиции антигена, как в реакции Артюса. Антиген может быть экзогенный (хро¬нические бактериальные, вирусные, грибковые или протозойные инфекции) или эндогенный, как при системной эритематозной волчанке.

Клинические проявления III типа. Сывороточная болезнь происходит при введении высоких доз антигена, например лошадиной противостолбнячной сы¬воротки. Через 6-7 дней в крови появляются антитела про¬тив лошадиного белка, которые, взаимодействуя с данным антигеном, образуют иммунные комплексы, откладывающие¬ся в стенках кровеносных сосудов и тканях. Развиваются си-стемные васкулиты, артриты (отложение комплексов в суста¬вах), нефрит (отложение комплексов в почках).

Реакция Артюса развивается при повторном внутрикожном введении антигена, который локально образует иммун¬ные комплексы с ранее накопившимися антителами. Прояв¬ляется отеком, геморрагическим воспалением и некрозом. 20. Анафилактический шок, сывороточная болезнь. Причины возникновения. Механизм. Их предупреждение.

Анафилаксия пред¬ставляет собой реакцию немедленного типа, возникающую при парентеральном повторном введении антигена в ответ на повреждающее действие комплекса антиген — антитело и характеризу¬ющуюся стереотипно протекающей клинической и морфологи¬ческой картиной.

Основную роль в анафилаксии играет цитотропный IgE, име¬ющий сродство к клеткам, в частности базофилам и тучным клеткам. После первого контакта организма с антигеном обра¬зуется IgE, который вследствие цитотропности адсорбируется на поверхности названных выше клеток. При повторном попадании в организм этого же антигена IgE связывает антиген с образо¬ванием на мембране клеток комплекса IgE — антиген. Комплекс повреждает клетки, которые в ответ на это выделяют медиато¬ры — гистамин и гистаминоподобные вещества (серотонин, кинин). Эти медиаторы связываются рецепторами, имеющимися на поверхности функциональных мышечных, секреторных, сли¬зистых и других клеток, вызывая их соответствующие реакции. Это ведет к сокращению гладкой мускулатуры бронхов, кишеч¬ника, мочевого пузыря, повышению проницаемости сосудов и другим, функциональным и морфологическим изменениям, ко¬торые сопровождаются клиническим проявлением. Клинически анафилаксия проявляется в виде одышки, удушья, слабости, беспокойства, судорог, непроизвольного мочеиспускания, дефе¬кации и др. Анафилактическая реакция протекает в три фазы: в 1-й фазе происходит сама реакция антиген — антитело; во 2-й фазе выделяются медиаторы анафилактической реакции; в 3-й фазе проявляются функциональные изменения.

Анафилактическая реакция возникает спустя несколько ми¬нут или часов после повторного введения антигена. Протекает в виде анафилактического шока или как местные проявления. Интенсивность реакции зависит от дозы антигена, количества об¬разующихся антител, вида животного и может закончиться выз¬доровлением или смертью. Анафилаксию легко можно вызвать в эксперименте на животных. Оптимальной моделью для воспро¬изведения анафилаксии является морская свинка. Анафилаксия может возникать на введение любого антигена любым способом (подкожно, через дыхательные пути, пищеварительный тракт) при условии, что антиген вызывает образование иммуноглобу¬линов. Доза антигена, вызывающая сенсибилизацию, т. е. повышенную чувствительность, называется сенсибилизирующей. Она обычно очень мала, так как большие дозы могут вызвать не сенсибилизацию, а развитие иммунной защиты. Доза антигена, введенная уже сенсибилизированному к нему животному и вы¬зывающая проявление анафилаксии, называется разрешающей. Разрешающая доза должна быть значительно больше, чем сен¬сибилизирующая.

Состояние сенсибилизации после встречи с антигеном сохра¬няется месяцами, иногда годами; интенсивность сенсибилизации можно искусственно уменьшить введением малых разрешающих доз антигена, которые связывают и выводят из циркуляции в организме часть антител. Этот принцип был использован для де¬сенсибилизации (гипосенсибилизации), т.е. предупреждения анафилактического шока при повторных введениях антигена. Впер¬вые способ десенсибилизации предложил русский ученый А. Без¬редка (1907), поэтому он называется способом Безредки. Спо¬соб состоит в том, что человеку, ранее получавшему какой-либо антигенный препарат (вакцину, сыворотку, антибиотики, пре¬параты крови и др.), при повторном введении (при наличии у него повышенной чувствительности к препарату) вначале вво¬дят небольшую дозу (0,01; 0,1 мл), а затем, через 1—1'/2 ч, — основную. Таким приемом пользуются во всех клиниках для избежания развития анафилактического шока; этот прием являет¬ся обязательным.

Возможен пассивный перенос анафилаксии с антителами.

Сывороточной болезнью называют реакцию, возникающую при разовом парентеральном введении больших доз сывороточных и других белковых препаратов. Обычно реакция возникает спустя 10—15 сут. Механизм сывороточной болезни связан с образова¬нием антител против введенного чужеродного белка (антигена) и повреждающим действием на клетки комплексов антиген — антитело. Клинически сывороточная болезнь проявляется отеком кожи и слизистых оболочек, повышением температуры тела, припуханием суставов, сыпью и зудом кожи; наблюдаются измене¬ния в крови (увеличение СОЭ, лейкоцитоз и др.). Сроки про¬явления и тяжесть сывороточной болезни зависят от содержа¬ния циркулирующих антител и дозы препарата. Это объясняется тем, что ко 2-й неделе после введения белков сыворотки выра¬батываются антитела к белкам сыворотки и образуется комплекс антиген — антитело. Профилактика сывороточной болезни осу¬ществляется по способу Безредки.

21. Понятие о клинической иммунологии. Иммунный статус человека и факторы, влияющие на него.

Клиническая иммунология - это клиническая и лабораторная дисциплина, занимающаяся изучением вопросов диагностики и лечения больных с различными заболеваниями и патологическими состояниями, в основе которых лежат иммунологические механизмы, а также состояниями, в терапии и профилактике которых иммунопрепараты играют ведущую роль.

Иммунный статус — это структурное и функциональное состояние иммунной сис¬темы индивидуума, определяемое комплек¬сом клинических и лабораторных иммуно¬логических показателей.

Таким образом, иммунный статус ха¬рактеризует анатомо-функциональное состо¬яние иммунной системы, т. е. ее способность к иммунному ответу на определенный анти¬ген в данный момент времени.

На иммунный статус оказывают влияние следующие факторы:

• климато-географические; • социальные; • экологические (физические, химические и биологические); • «медицинские» (влияние лекарственных веществ, оперативные вмешательства, стресс и т. д.).

Среди климато-географических факторов на иммунный статус оказывают влияние тем¬пература, влажность, солнечная радиация, длина светового дня и др. Например, фагоци¬тарная реакция и кожные аллергические про¬бы менее выражены у жителей северных ре¬гионов, чем у южан. Вирус Эпштейна—Барр у людей белой расы вызывает инфекционное за¬болевание — мононуклеоз, у лиц негроидной расы — онкопатологию (лимфома Беркитта), а у лиц желтой расы — совсем другую онко¬патологию (назофарингеальная карцинома), причем только у мужчин. Жители Африки менее подвержены заболеванию дифтерией, чем европейское население.

К социальным факторам, оказывающим влияние на иммунный статус, относятся пи¬тание, жилищно-бытовые условия, профес¬сиональные вредности и т. п. Важное значе¬ние имеет сбалансированное и рациональное питание, поскольку с пищей в организм пос¬тупают вещества, необходимые для синтеза иммуноглобулинов, для построения иммунокомпетентных клеток и их функциони¬рования. Особенно важно, чтобы в рационе присутствовали незаменимые аминокислоты и витамины, особенно А и С.

Значительное влияние на иммунный ста¬тус организма оказывают жилищно-бытовые условия. Проживание в плохих жилищных условиях ведет к снижению общей физиоло¬гической реактивности, соответственно иммунореактивности, что нередко сопровож¬дается повышением уровня инфекционной заболеваемости.

Большое влияние на иммунный статус ока¬зывают профессиональные вредности, пос¬кольку человек проводит на работе значи¬тельную часть своей жизни. К производс¬твенным факторам, которые могут оказывать неблагоприятное воздействие на организм и снижать иммунореактивность, относят иони-зирующую радиацию, химические вещества, микробы и продукты их жизнедеятельности, температуру, шум, вибрацию и т. д. Источники радиации получили в настоящее время очень широкое распространение в различных от¬раслях промышленности (энергетика, горно¬химическая, аэрокосмическая и др.).

Неблагоприятное влияние на иммунный статус оказывают соли тяжелых металлов, аро¬матические, алкилирующие соединения и дру¬гие химические вещества, в том числе моющие средства, дезинфектанты, пестициды, ядохи¬микаты, широко применяемые в практике. Таким профессиональным вредностям подвер¬жены работники химических, нефтехимичес¬ких, металлургических производств и др.

Неблагоприятное влияние на иммунный статус организма оказывают микробы и про¬дукты их жизнедеятельности (чаще всего бел¬ки и их комплексы) у работников биотехно¬логических производств, связанных с произ¬водством антибиотиков, вакцин, ферментов, гормонов, кормового белка и др.

Такие факторы, как низкая или высокая температура, шум, вибрация, недостаточная освещенность, могут снижать иммунореак¬тивность, оказывая опосредованное действие на иммунную систему через нервную и эндок¬ринную системы, которые находятся в тесной взаимосвязи с иммунной системой.

Глобальное действие на иммунный статус человека оказывают экологические факторы, в первую очередь, загрязнение окружающей среды радиоактивными веществами (отра¬ботанным топливом из ядерных реакторов, утечка радионуклидов из реакторов при ава¬риях), широкое применение пестицидов в сельском хозяйстве, выбросами химических предприятий и автотранспорта, биотехноло¬гических производств.

На иммунный статус оказывают влияние различные диагностические и лечебные ме¬дицинские манипуляции, лекарственная те¬рапия, стресс. Необоснованное и частое при¬менение рентгенографии, радиоизотопного сканирования может влиять на иммунную систему. Иммунореактивность изменяет¬ся после травм и хирургических операций. Многие лекарственные препараты, в том чис¬ле антибиотики, способны оказывать побоч¬ное иммунодепрессивное действие, особенно при длительном приеме. Стресс приводит к нарушениям в работе Т-системы иммунитета, действуя, в первую очередь, через ЦНС.

22. Расстройства иммунной системы: первичные и вторич¬ные иммунодефициты.

Иммунодефициты — это нарушения нор¬мального иммунного статуса, обусловлен¬ные дефектом одного или нескольких механизмов иммунного ответа.

Различают первичные, или врожденные (генетические), и вторичные, или приобре¬тенные, иммунодефициты.

Первичные, или врожденные, иммунодефициты.

В качестве первичных иммунодефицитов выделяют такие состояния, при которых нарушение иммунных гуморальных и кле¬точных механизмов связано с генетическим блоком, т. е. генетически обусловлено неспо¬собностью организма реализовывать то или иное звено иммунологической реактивности. Расстройства иммунной системы могут затра¬гивать как основные специфические звенья в функционировании иммунной системы, так и факторы, определяющие неспецифическую резистентность. Возможны комбинирован¬ные и селективные варианты иммунных рас¬стройств. В зависимости от уровня и характера нарушений различают гуморальные, клеточ¬ные и комбинированные иммунодефициты.

Врожденные иммунодефицитные синдро¬мы и заболевания представляют собой до¬вольно редкое явление. Причинами врожден¬ных иммунодефицитов могут быть удвоение хромосом, точечные мутации, дефект фер¬ментов обмена нуклеиновых кислот, генети¬чески обусловленные нарушения мембран, повреждения генома в эмбриональном пе¬риоде и др. Как правило, первичные имму-нодефицита проявляются на ранних этапах постнатального периода и наследуются по аутосомно-рецессивному типу. Проявляться первичные иммунодефициты могут в виде недостаточности фагоцитоза, системы комп¬лемента, гуморального иммунитета (В-системы), клеточного иммунитета (Т-системы) или же в виде комбинированной иммунологичес¬кой недостаточности.

Вторичные, или приобретенные, иммунодефициты

Вторичные иммунодефициты в отличие от первичных развиваются у лиц с нормально функционировавшей от рождения иммунной системой. Они формируются под воздействи¬ем окружающей среды на уровне фенотипа и обусловлены нарушением функции иммунной системы в результате различных заболеваний или неблагоприятных воздействий на орга¬низм. При вторичных иммунодефицитах могут поражаться Т- и В-системы иммунитета, фак¬торы неспецифической резистентности, воз¬можны также их сочетания. Вторичные имму¬нодефициты встречаются значительно чаще, чем первичные. Вторичные иммунодефицита, как правило, преходящи и поддаются иммунокоррекции, т. е. восстановлению нормальной деятельности иммунной системы.

Вторичные иммунодефицита могут быть: после перенесенных инфекций (особенно ви¬русных) и инвазий (протозойные и гельминтозы); при ожоговой болезни; при уремии; при опухолях; при нарушении обмена веществ и истощении; при дисбиозах; при тяжелых травмах, обширных хирургических операци¬ях, особенно выполняемых под общим нар¬козом; при облучении, действии химических веществ; при старении, а также медикамен¬тозные, связанные с приемом лекарств.

По времени возникновения выделяют ан¬тенатальные (например, ненаследственные формы синдрома ДиДжорджи), перинаталь¬ные (например, нейтропения новорожденного, вызванная изосенсибилизацией матери к антигенам нейтрофилов плода) и постнатальные вторичные иммунодефицита.

Поклиническому течению выделяют ком¬пенсированную, субкомпенсированную и декомпенсированную формы вторичных иммунодефицитов. Компенсированная форма сопро¬вождается повышенной восприимчивостью организма к инфекционным агентам, вы¬зывающим оппортунистические инфекции. Субкомпенсированная форма характеризует¬ся склонностью к хронизации инфекционных процессов. Декомпенсированная форма про¬является в виде генерализованных инфекций, вызванных условно-патогенными микробами (УПМ) и злокачественными новообразова¬ниями.

Известно разделение вторичных иммунодефицитов на:

Физиологические, новорожденные, пубертатного периода, беременности и лактации, старения, биоритмичности, экологические, сезонные, эндогенные интоксикации, радиационные, СВЧ, патологические, постинфекционные, стрессовые, регуляторно-метаболические, медикаментозные, онкологические.

Иммунодефициты, как первичные, так и особенно вторичные, широко распростране¬ны среди людей. Они являются причиной проявления многих болезней и патологичес¬ких состояний, поэтому требуют профилак¬тики и лечения с помощью иммунотропных препаратов.

23. Понятие об иммуномодуляторах. Принцип действия. Применение.

Иммуномодуляторы – вещества, оказывающие влияние на функцию иммунной системы, изменяющие активность иммунной системы в сторону повешения (иммуностимуляторы) или понижения (иммунодепрессанты) её активности.

Иммуномодуляторы:

-Препараты микробного происхождения (Низкомол. вакцины : рибомукил( рибосомы от Cl.pnemonia), Биостин( экстракт из Cl.pneumonia))

-Препараты нуклеиновых кислот естественного и искусственного происхождения(нукленат натрия(индуцирует синтез ИФН, увеличивает иммуногенность вакцин))

-Синтетические препараты с поливалентным эффектом (стимулируют фагоцитоз, противоопухолевые свойства)

-Цитокины (иммуномодулир. действие,интерлейкины, интерфероны, факторы некроза, АТ против факторов)

-ИФН(противовирусное, антипролиферативное, иммуномодулирующее действие; человеческий и рекомбинантный )

-Вост. систему нейтрофилов, гранулоцитов и макрофагов(вост количеств состав (левомизол, полиоксидоний)

-Тимические факторы ( гормоны тимуса,синтетические тимоноподобные препараты)

К экзогенным иммуномодуляторам отно¬сится большая группа веществ различной хи¬мической природы и происхождения, оказы-вающих неспецифическое активирующее или супрессивное действие на иммунную систему, но являющихся чужеродными для организма. Антибиотики, левамизол, полисахариды, ЛПС, адъюванты.

Эндогенные иммуномодуляторы представляют собой достаточно большую группу олигопептидов, синтезируемых самим организмом, его иммунокомпетентными клетка¬ми, и способных активировать иммунную сис¬тему путем усиления функции иммунокомпетентных клеток. К ним относятся регуляторные пептиды: интерлейкины, интерфероны, гормоны тимуса.

Применение иммуномодуляторов: при первичных и вторичных иммунодефицитах различного происхождения, при онкологических болезнях, при транспланта¬ции органов и тканей, при лечении иммуно-патологических и аллергических болезней, в иммунопрофилактике и лечении инфек¬ционных болезней.

Созданы препараты, обладающие иммуномодулирующим действием: интерферон, лейкоферон, виферон. 24. Особенности противовирусно и противогрибкового иммунитета. Антигены вирусов.

Противовирусный иммунитет. Обусловлен 2-мя формами существования вирусов.

Основные факторы: специфические АТ, Т- киллеры, ИФН, сывороточные ингибиторы вирусных частиц. Основой противовирусного иммунитета является клеточный иммунитет. Клетки-мишени, ин-фицированные вирусом, уничтожаются цитотоксическими лимфоцитами, а также NK-клетками и фагоцитами, взаимодействую¬щими с Fc-фрагментами антител, прикрепленных к вирусспецифическим белкам инфицированной клетки. Проти¬вовирусные антитела способны нейтрализовать только внеклеточно расположенные вирусы, как и факторы неспецифическо¬го иммунитета — сывороточные противовирусные ингибиторы. Такие вирусы, окруженные и блокированные белками организ¬ма, поглощаются фагоцитами или выводятся с мочой, потом и др. (так называемый «выделительный иммунитет»). Интерфероны усиливают противовирусную резистентность, индуцируя в клет¬ках синтез ферментов, подавляющих образование нуклеиновых кислот и белков вирусов. Кроме этого, интерфероны оказывают иммуномодулирующее действие, усиливают в клетках экспрес¬сию антигенов главного комплекса гистосовместимости (МНС). Противовирусная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые, взаимодействуя с вирусами, препятст¬вуют их адгезии на эпителиоцитах.

Противогрибковый иммунитет. Антитела (IgM, IgG) при ми¬козах выявляются в низких титрах. Основой противогрибкового иммунитета является клеточный иммунитет( Т – киллеры и фагоциты). В тканях происхо¬дит фагоцитоз, развивается эпителиоидная гранулематозная ре¬акция, иногда тромбоз кровеносных сосудов. Микозы, особенно оппортунистические, часто развиваются после длительной антибактериальной терапии и при иммунодефицитах. Они сопро¬вождаются развитием гиперчувствительности замедленного ти¬па. Возможно развитие аллергических заболеваний после респираторной сенсибилизации фрагментами условно-патогенных грибов родов Aspergillus, Penicillium, Mucor, Fusarium и др.

Оценивают иммунитет при помощи кожно – аллергических проб( КАП)

У разных грибов имеются сходные АГ (перекрестно реагир.), что снижает специфичность иммунной реакции.

Вирусные антигены могут быть структурными и неструктурными. Первые представлены веществами, кодируемые нуклеиновыми кислотами, а также клеточными метаболитами (ли-пиды, углеводы), захватываемыми вирионами при почковании. Неструктурные Аг не входят в состав вирионов, а образуются в инфицированных клетках на различных этапах репродукции вирусов.

Ядерные ( сердцевинные ) антигены вирусов. Капсидные антигены вирусов. V-Aг вирусов

• У вирусов выделяют ядерные (сердцевинные), капсидные и суперкапсидные антигены. У пара- и ортомиксовирусов имеются также поверхностные V-Ar — гемагглютинин и нейраминидаза.

Тимуснезависимые антигены. Тимусзависимые антигены

Большинство иммунных реакций запускает взаимодействие Аг с Аг-распознающими Т-лимфоцитами (Т-хелперами) и Аг-представляющими клетками (обычно макрофагами). Т-лимфоциты стимулируют переработку Аг макрофагами и сборку эпитопов, обеспечивающую специфический сигнал эффекторных клеток. Источник второго (неспецифического) сигнала являются Т-хелперы. Поскольку ответ на такие Аг требует участия Т-лимфоцитов, их также обозначают термином «тимусзависимые Аг». Однако существуют Аг, структура которых сама напоминает «обойму*, образуемую Аг-представляющими клетками. Таковыми являются поли- и ЛПС бактерий, представляющие жёсткую цепь с густо расположенными, регулярно чередующимися и аналогичными друг другу Аг-детерминантами. Для таких мультигаптенных молекул не нужен неспецифический, Т-клеточный сигнал и их также обозначают как «тимуснезависимые Аг».

25. Изоантигены. HLA. СД дифференциация клеток. Особенности трансплантационного и противоопухолевого иммунитета

Организм человека характеризуется набором определенных антигенов: аллоантигены эритроцитов и тканевые изоантигены.

Изоантиген — это общее на¬з¬ва¬ние ан¬ти¬ге¬нов эрит¬роци¬тов, лейкоци¬тов и других кле¬ток, а та¬кже плазмен¬ных бел¬ков осо-бей од¬но¬го био¬логи¬че¬ского ви¬да, обу¬с¬лов¬ли¬вающих раз¬ви¬тие имму¬но¬логи¬че¬ских ре¬акций при гемо¬т¬ранс¬фу¬зии, тран-сплан¬тации чуже¬род¬ных тка¬ней.

Антигены Er группы A,B,0;– Карл Ланштейнер. Более 40 различных АТ на эритроциты.Эти АГ наследуются независимо аллельно, что обеспечивает в популяции 4 группы

Rh –фактор: липопротеин. Либо есть ( Rh+) либо его нет (Rh -)/ Важое значение игрет при беременности ( Rh- конфликт, когда Rh- мама мынашивает Rh+ плод)

HLA ( Human Leukocyte Antigens) – человеческий лейкоцитарный АГ – учитывается при трансплантации тканей и органов – HLA – маркировка.

MHC – главный комплекс гистосовместимости содержи HLA – антигены, по ним иммунная систем определяет свой/ чужой.

MHC I- трансплантационный АГ, обеспечивает реакцию отторжения . По ним иммунная система определяет «свои» клетки. Все клетки отличающиеся по MHC –I подвергаюся киллерной атаке. В каждом организме уникальный набор MHC-I

MHC-II на антивир. Т –лимфоциты, макрофаги, участвуют в спецфических механизмах передачи инфекции об антигенных детерминантах ( межклеточная кооперация)

Понятием кластер дифференцировки (от англ. cluster of differentiation, cluster designation; CD) обозначают номенклатуру дифференцировочных антигенов человеческих лейкоцитов. Данная классификация была принята с целью исследования и идентификации поверхностного мембранного белка лейкоцитов в 1982 году. CD-АГ или, другими словами, CD-маркерами являются белки, которые служат лигандами, либо рецепторами, участвуют во взаимодействиях клеток и являются компонентами каскада установленных сигнальных путей. Данные белки способны выполнять и другие функции (в частности, белок клеточной адгезии). Перечень включенных в номенклатуру антигенов кластеров дифференцировки регулярно пополняется и на сегодня составляет свыше 320 CD-антигенов, а также их подтипов.

Противоопухолевый иммунитет основан на Th1-зависимом клеточном иммунном ответе, активирующем цитотоксические Т-лимфоциты, макрофаги и NK-клетки. Роль гуморального (антительного) иммунного ответа невелика, поскольку антите¬ла, соединяясь с антигенными детерминантами на опухолевых клетках, экранируют их от цитопатогенного действиях иммун-ных лимфоцитов. Опухолевый антиген распознается антигенпрезентирующими клетками (дендритными клетками и макро-фагами) и непосредственно или через Т-хелперы (Th1) пред¬ставляется цитотоксическим Т-лимфоцитам, разрушающим опу-холевую клетку-мишень.

Кроме специфического противоопухолевого иммунитета, иммунный надзор за нормальным составом тканей реализует¬ся за счет неспецифических факторов. Неспецифические фак¬торы, повреждающие опухолевые клетки: 1) NK-клетки, систе¬ма мононуклеарных клеток, противоопухолевая активность которых усиливается под воздействием интерлейкина-2 (ИЛ-2) и α-, β-интерферонов; 2) ЛАК-клетки (мононуклеарные клетки и NK-клетки, активированные ИЛ-2); 3) цитокины (α - и β-интерфероны, ФНО-α и ИЛ-2).

Трансплантационным иммунитетом назы¬вают иммунную реакцию макроорганизма, направленную против пересаженной в него чужеродной ткани (трансплантата). Знание механизмов трансплантационного иммуните¬та необходимо для решения одной из важней¬ших проблем современной медицины — пе¬ресадки органов и тканей. Многолетний опыт показал, что успех операции по пересадке чужеродных органов и тканей в подавляющем большинстве случаев зависит от иммунологи-ческой совместимости тканей донора и реци¬пиента.

Иммунная реакция на чужеродные клетки и ткани обусловлена тем, что в их соста¬ве содержатся генетически чужеродные для организма антигены. Эти антигены, получившие название трансплантационных или антигенов гистосовместимости, наиболее полно представлены на ЦПМ клеток.

Реакция отторжения не возникает в случае полной совместимости донора и реципиента по антигенам гистосовместимости — такое возможно лишь для однояйцовых близнецов. Выраженность реакции отторжения во мно¬гом зависит от степени чужеродности, объема трансплантируемого материала и состояния иммунореактивности реципиента.

При контакте с чужеродными трансплан¬тационными антигенами организм реагирует факторами клеточного и гуморального зве¬ньев иммунитета. Основным фактором кле¬точного трансплантационного иммунитета являются Т-киллеры. Эти клетки после сен¬сибилизации антигенами донора мигрируют в ткани трансплантата и оказывают на них антителонезависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность.

Специфические антитела, которые образу¬ются на чужеродные антигены (гемагглютинины, гемолизины, лейкотоксины, цитотоксины), имеют важное значение в формирова¬нии трансплантационного иммунитета. Они запускают антителоопосредованный цитолиз трансплантата (комплемент-опосредованный и антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность).

Возможен адоптивный перенос трансплан¬тационного иммунитета с помощью активи¬рованных лимфоцитов или со специфической антисывороткой от сенсибилизированной особи интактному макроорганизму.

Механизм иммунного отторжения переса¬женных клеток и тканей имеет две фазы. В первой фазе вокруг трансплантата и сосудов наблюдается скопление иммунокомпетентных клеток (лимфоидная инфильтрация), в том числе Т-киллеров. Во второй фазе про¬исходит деструкция клеток трансплантата Т-киллерами, активируются макрофагальное звено, естественные киллеры, специфический антителогенез. Возникает иммунное воспале¬ние, тромбоз кровеносных сосудов, наруша¬ется питание трансплантата и происходит его гибель. Разрушенные ткани утилизируются фагоцитами.

В процессе реакции отторжения формиру¬ется клон Т- и В-клеток иммунной памяти. Повторная попытка пересадки тех же органов и тканей вызывает вторичный иммунный от¬вет, который протекает очень бурно и быстро заканчивается отторжением трансплантата.

С клинической точки зрения выделяют ос¬трое, сверхострое и отсроченное отторжение трансплантата. Различаются они по времени реализации реакции и отдельным механизмам. 26. Диагностикумы, их виды, получение, применение.

В диагностических целях при обнаружении антител в сы¬воротке крови больных, реконвалесцентов и бактерионосите¬лей используются серологические реакции.

Для постановки таких реакций применяются диагностикумы - препараты, содержащие взвесь обезвреженных микроор¬ганизмов или определенные антигены.

Необходимость использования диагностикумов для сероло¬гических реакций связана не только с явным их преимущест¬вом перед живыми культурами микробов (безопасность в ра¬боте), но еще и потому, что для приготовления диагностикумов подбираются штаммы микроорганизмов с высокой чувст-вительностью к антителам и способностью длительно сохра¬нять антигенные свойства.

Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов чаще всего используются химические вещест¬ва, особенно формалин, являющийся лучшим консервантом. Убитые нагреванием микробы хуже сохраняют антигенные свойства и применяются редко.

В серологических реакциях (реакции агглютинации, реак¬ции пассивной гемагглютинации, реакции связывания компле¬мента, реакции торможения гемагглютинации) для выявления специфических антител применяются: бактериальные, эритроцитарные и вирусные диагностикумы.

Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную микробную взвесь или отдельные антигенные компоненты бактерий: О, Н или Vi-антигены и используются в реакциях агглютинации.

Эритроцитарные диагностикумы представляют собой эритроциты (обработанные танином или формалином) с ад¬сорбированными на них антигенами, извлеченными из бакте¬рий, и применяются в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для выяв¬ления антигена в выделениях больных, в тканях и др., при¬меняют «антительные диагностикумы», т. е. эритроциты, сен-сибилизированные антителами.

Вирусные диагностикумы — препараты, содержащие инактированные вируссодержащие жидкости (культуральные, из куриных эмбрионов или организма животных, зараженных соответствующим вирусом), применяются в РСК (реакции связывания комплемента), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации.

В настоящее время в лабораториях используются следу¬ющие диагностикумы.

1. Бактериальный диагностикум сальмонелл тифа. Приме¬няется в реакции агглютинации для обнаружения антител в сыворотке больных.

2. Сальмонеллезные О-диагностикумы содержат О-антигены различных групп сальмонелл (инактивированных 15%-ным раствором глицерина). Применяются для выявления О-антител при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглю¬тинации с сывороткой больных.

3. Сальмонеллезные Н-монодиагностикумы. Исполь¬зуются в реакции агглютинации для определения заболевания в прошлом (анамнестическая реакция агглютинации) и реже с диагностической целью.

4. Vi — брюшнотифозный диагностикум. Применяется в реакции агглютинации при выявлении брюшноти¬фозного бактерионосительства.

5. Единый бруцеллезный диагностикум — взвесь бруцелл (инактивированных фенолом), подкрашенная метиленовым синим. Применяется для определения антител в сыворотках крови больных бруцеллезом людей и животных в реакциях агглютинации Райта и Хеддльсона.

6. Эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум — взвесь эритроцитов с адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл. Используется для постановки РПГА с сывороткой больного при уточнении клинического диагноза сальмонеллезной инфекции.

7. Эритроцитарный Vi-диагностикум — эритроциты, сенси¬билизированные очищенным Vi-антигеном S. typhi, применяет¬ся в РПГА при выявлении брюшнотифозного бактерионоси¬тельства.

8. Гриппозный диагностикум представляет собой аллантоисную жидкость инфицированных вирусом гриппа (типов А, В) куриных эмбрионов и инактивированную мертиолатом или формалином. Диагностикумы необходимы при постановке РТГА с парными сыворотками больных для уточнения кли-нического диагноза и циркулирующего типа вируса гриппа.

9. Диагностикум вируса клещевого энцефалита получают из суспензии мозга белых мышей, зараженных вирусом кле¬щевого энцефалита. Суспензию подвергают центрифугирова¬нию (для осветления) и инактивируют химическими вещест¬вами.

Диагностикум используется в РТГА и РСК с сывороткой больных при диагностике заболевания.

27. Моноклональные антитела, их получение и примение.

Моноклональные антитела. Каждый В-лимфоцит и его потомки, образовавшиеся в ре¬зультате пролиферации (т.е. клон), способны синтезировать антитела с паратопом строго определенной специфичности. Такие антитела получили название моноклональных. В природ¬ных условиях макроорганизма получить моно¬клональные антитела практически невозмож¬но. Дело в том, что на одну и ту же антигенную детерминанту одновременно реагируют до 100 различных клонов В-лимфоцитов, незначи¬тельно различающихся антигенной специфич¬ностью рецепторов и, естественно, аффиннос¬тью. Поэтому в результате иммунизации даже монодетерминантным антигеном мы всегда получаем поликлональные антитела.

Принципиально получение моноклональных антител выполнимо, если провести пред¬варительную селекцию антителопродуцирующих клеток и их клонирование (т.е. выделение отдельных клонов в чистые культуры). Однако задача осложняется тем, что В-лимфоциты, как и другие эукариотические клетки, имеют ограниченную продолжительность жизни и число возможных митотических делений.

Проблема получения моноклональных ан¬тител была успешно решена Д. Келлером и Ц. Милыптейном. Авторы получили гибридные клетки путем слияния иммун¬ных В-лимфоцитов с миеломной (опухоле¬вой) клеткой. Полученные гибриды обладали специфическими свойствами антителопродуцента и «бессмертием» раковотрансформированной клетки. Такой вид клеток полу¬чил название гибридом. Гибридома хорошо размножается в искусственных питательных средах и в организме животных и в неогра¬ниченном количестве вырабатывает антите¬ла. В результате дальнейшей селекции были отобраны отдельные клоны гибридных кле¬ток, обладавшие наивысшей продуктивнос¬тью и наибольшей аффинностью специфи¬ческих антител.

Гибридомы, продуцирующие моноклональные антитела, размножают или в аппаратах, приспособленных для выращивания культур клеток или же вводя их внутрибрюшинно особой линии (асцитным) мышам. В послед¬нем случае моноклональные антитела накап¬ливаются в асцитной жидкости, в которой размножаются гибридомы. Полученные как тем, так и другим способом моноклональные антитела подвергают очистке, стандартиза¬ции и используют для создания на их основе диагностических препаратов.

Гибридомные моноклональные антитела нашли широкое применение при создании диагностических и лечебных иммунобиоло¬гических препаратов.

28. Методы приготовления и применения агглютинирую¬щих, адсорбированных сывороток.

В диагностике инфекционных болезней широко применя¬ются иммунные реакции при идентификации возбудителя: при установлении родовой, видовой и типовой принадлежности микроба (вируса). Для постановки таких реакций необходимы специфические диагностические сыворотки, которые в зависи¬мости от содержания соответствующих антител называются агглютинирующие, преципитирующие, гемо-литические, противовирусные.

Агглютинирующие сыворотки. Агглютинирующую сыворотку получают иммунизацией кроликов (внутривенно, подкожно или внутрибрюшинно) взвесью убитых бактерий, начиная с дозы 200 млн., затем 500 млн., 1 млрд., 2 млрд., микробных тел в 1 мл, с интервалами 5 дней. Через 7—8 дней после последней иммунизации берут кровь и определяют титр антител. Титром агглютинирующей сыворотки называется то макси¬мальное разведение сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствую¬щим микроорганизмом.

Агглютинирующие сыворотки применяются при идентифи¬кации микроба в развернутой реакции агглютинации. Если изучаемый микроорганизм агглютинируется сывороткой до титра или до половины значения титра, его можно считать принадлежащим к тому виду, название которого указано на этикетке ампулы.

Неадсорбированные агглютинирующие сыворотки облада¬ют высоким титром — до 1 : 12 800 — 1 : 25 600.

Недостатком таких сывороток является то, что они способ¬ны давать групповые реакции агглютинации, так как они содержат антитела к бактериям, имеющим общие антигены в пределах семейства, группы и рода.

Поэтому в настоящее время большинство агглютинирую¬щих сывороток выпускаются адсорбированными, монорецепторными и адсорбированными поливалентными, содер¬жащими только типовые или видовые антитела и соответст-вующими или определенному типу или виду микроорганизма. Эти сыворотки не подлежат разведению.

Для получения таких сывороток применяют метод Кастелляни — метод адсорбции, который состоит в том, что при насыщении агглютинирующей сыворотки родственны-ми гетерогенными бактериями происходит адсорбция групповых антител, а специфические антитела остаются в сыворот¬ке. В зависимости от полноты истощения групповых агглюти¬нинов можно получить монорецепторные сыворотки — сыво-ротки, имеющие антитела только к одному рецептору-антигену или адсорбированные, поливалентные, дающие реакции агглю¬тинации с двумя — тремя родственными бактериями, имею¬щими общий антиген, в отношении которого проводилась ад¬сорбция.

Адсорбированные сыворотки применяют при идентифика¬ции выделенных возбудителей в реакции агглютинации на стекле (пластинчатый метод).

Агглютинирующие сыворотки наиболее широко применя¬ются при диагностике заболеваний, вызываемых бактериями семейства Enterobacteriaceae. Так, при идентификации эшерихий используются поливалентные и типовые ОК-сыворотки; при дифференциации сальмонелл — набор сывороток: агглю¬тинирующая адсорбированная поливалентная сальмонеллезная О-сыворотка (групп А, В, С, Д, Е) — для определения принадлежности к роду Salmonella, при положительном ре¬зультате — определяют отдельно с каждой сывороткой (входя¬щей в смесь) серологическую группу и в заключение опреде¬ляется серологический тип выделенного возбудителя с моно-рецепторными Н-сыворотками сальмонелл, входящих в данную группу.

29. Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение.

Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой происходит связыва¬ние антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Она протекает при наличии электролитов, например при добавлении изо¬тонического раствора натрия хлорида.

Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировоч-ная, непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осад¬ка (клетки, «склеенные» антителами, имеющими два или более антигенсвязывающих центра). РА используют для:

1) определения антител в сыворотке крови боль¬ных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реак¬ция Видаля) и других инфекционных болезнях;

2) определения возбудителя, выделенного от больного;

3) определения групп крови с использова¬нием моноклональных антител против аллоантигенов эритроцитов.

Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разве¬дениям сыворотки крови больного добавля¬ют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок.

Характер и скорость агглютинации зави¬сят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-антигенов) со специ-фическими антителами. Реакция агглютина¬ции с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернис-той агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые фор-малином, сохранившие термолабильный жгу¬тиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее. Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентиро¬вочную реакцию агглютинации,применяя диа¬гностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К капле диа¬гностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больно¬го. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микроба-ми хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках с увели¬чивающимися разведениями агглютинирую¬щей сыворотки, к которым добавляют по 2—3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмеча¬ется в разведении, близком к титру диагнос¬тической сыворотки. Одновременно учитыва¬ют контроли: сыворотка, разведенная изото¬ническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка.

Разные родственные бактерии могут агглю¬тинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудня¬ет их идентификацию. Поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыво¬ротками, из которых удалены перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыво-ротках сохраняются антитела, специфичные только к данной бактерии. 30. Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации. Компоненты, механизм, постановка, применение.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использова¬нии эритроцитов (или латекса) с адсорбиро¬ванными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соот-ветствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеива¬ние и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.

Компоненты. Для постанов¬ки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавли-вают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Ад¬сорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома.

Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микро¬организмов, экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества.

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обладающие высокой адсорбирующей активностью.

Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гор¬мона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительнос¬ти к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.

Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфич¬ностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токси¬нов в исследуемом патологическом материале. Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные анти¬тельные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфи¬ческих антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии на¬груженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой специфичности.

Через 2 ч инкубации при 37°С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отри¬цательной реакции появляется осадок в виде компактного диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — харак¬терный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неров¬ными краями.

31. Реакция торможения гемагглютинации. Механизм. Компоненты. Применение.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) - метод идентификации вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного, основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов препаратом, содержащим вирус, в присутствии иммунной к нему сыворотки крови.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде, подавлении ан¬тигенов вирусов антителами иммунной сы-воротки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты.

РТГА применяют для диагностики мно¬гих вирусных болезней, возбудители которых (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещево¬го энцефалита и др.) могут агглютинировать эритроциты различных животных.

Компоненты: парные сыворотки, вирусологический диагностикум, куриные эритроциты.

Механизм. Типирование вируса проводят в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с набором типоспецифических сывороток. Результаты реакции учитывают по отсутствию гемагглютинации. Подтипы вируса А с антигенами H0N1, H1N1, Н2N2, H3N2 и др. могут быть дифференцированы в РТГА с набором гомологичных типоспецифических сывороток.

32. Реакция преципитации. Механизм. Компоненты. Спосо¬бы постановки. Применение.

Реакция преципитации (РП) - это формирова¬ние и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Он образуется при смешивании антигенов и антител в эквивалентных количес¬твах; избыток одного из них снижает уровень образования иммунного комплекса.

РП ставят в пробирках (реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др. Широкое рас¬пространение получили разновидности РП в полужидком геле агара или агарозы: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.

Механизм. Проводится с прозрачными коллоид¬ными растворимыми антигенами, экстрагированными из патоло¬гического материала, объектов внешней среды или чистых культур бактерий. В реакции используют прозрачные диагности¬ческие преципитирующие сыворотки с высокими титрами анти¬тел. За титр преципитирующей сыворотки принимают то наибольшее разведение антигена, которое при взаимодействии с иммун¬ной сывороткой вызывает образование видимого преципитата — помутнение.

Реакция кольцепреципитации ставится в узких пробирках (диаметр 0,5 см), в которые вносят по 0,2—0,3 мл преципитирующей сыворотки. Затем пастеровской пипеткой медленно наслаивают 0,1—0,2 мл раствора антигена. Пробирки осторожно переводят в вертикальное положение. Учет реакции производят через 1—2 мин. В случае положительной реакции на границе между сывороткой и исследуемым антигеном появляется пре¬ципитат в виде белого кольца. В контрольных пробирках преци¬питат не образуется.

33. Реакция связывания комплемента. Механизм. Компо¬ненты. Применение.

Реакция связывания комплемента (РСК) за¬ключается в том, что при соответствии друг другу антигены и антитела образуют иммун¬ный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), т. е. происходит связывание комплемента комп-лексом антиген—антитело. Если же комплекс антиген—антитело не образуется, то комп¬лемент остается свободным.

Специфическое взаимодействие АГ и AT сопровождается адсорб¬цией (связыванием) комплемента. Поскольку процесс связыва¬ния комплемента не проявляется визуально, Ж. Борде и О. Жангу предложили использовать в качестве индикатора гемолитическую систему (эритроциты барана + гемолитическая сыворотка), кото¬рая показывает, фиксирован ли комплемент комплексом АГ-АТ. Если АГ и AT соответствуют друг другу, т. е. образовался иммунный комплекс, то комплемент связывается этим комплексом и гемоли¬за не происходит. Если AT не соответствует АГ, то комплекс не образуется и комплемент, оставаясь свободным, соединяется со второй системой и вызывает гемолиз.

Компоненты. Реакция связывания комплемента (РСК) относится к слож¬ным серологическим реакциям. Для ее проведения необходимы 5 ингредиентов, а именно: АГ, AT и комплемент (первая система), эритроциты барана и гемолитическая сыворотка (вторая система).

Антигеном для РСК могут быть культуры различных убитых микроорганизмов, их лизаты, компоненты бактерий, патологи¬чески измененных и нормальных органов, тканевых липидов, ви¬русы и вирусосодержащие материалы.

В качестве комплемента используют свежую или сухую сыво¬ротку морской свинки.

Механизм. РСК проводят в две фазы: 1-я фаза — инкубация смеси, содержащей три компонента антиген + антитело + комплемент; 2-я фаза (инди¬каторная) — выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемоли¬тической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотки, содер¬жащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген—антите¬ло происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизирован¬ных антителами эритроцитов не произойдет; реакция положительная. Если антиген и ан¬титело не соответствуют друг другу (в иссле¬дуемом образце нет антигена или антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит — антиэритроцитарное антитело, вызывая гемо¬лиз; реакция отрицательная.

Применение. РСК применяют для диагностики многих инфекционных болезней, в частности сифи¬лиса (реакция Вассермана).

34. Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Ме¬ханизм. Способы постановки, применение.

В основе этой реакции лежит способность специфической ан¬титоксической сыворотки нейтрализовать экзотоксин.

Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувст¬вительные клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами, т. е. их нейтрализацией.

Реакцию нейтрализации (РН) проводят путем введения смеси антиген—антитело животным или в чувствительные тест-объекты (культуру клеток, эмбрионы). При отсутствии у животных и тест-объектов повреждающего действия микро¬организмов или их антигенов, токсинов говорят о нейтрализу-ющем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о спе¬цифичности взаимодействия комплекса антиген—антитело.

Для прове¬дения реакции исследуемый материал, в котором предполагается наличие экзотоксина, смешивают с антитоксической сывороткой, выдерживают в термостате и вводят животным (морским свин¬кам, мышам). Контрольным животным вводят фильтрат исследу¬емого материала, не обработанный сывороткой. В том случае, если произойдет нейтрализация экзотоксина антитоксической сыво¬роткой, животные опытной группы останутся живыми. Конт¬рольные животные погибнут в результате действия экзотоксина.

35. Реакция иммунофлюоресценции. Механизм, компонен¬ты, применение.

Иммунофлюоресцентный метод (РИФ, реакция иммунофлюоресценции, реакция Кунса) - метод выявления специфических АГ с помощью АТ, конъюгированных с флюорохромом. Обладает высокой чувствительностью и специфичностью.

Применяется для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний (идентификация возбудителя в исследуемом материале), а также для определения АТ и поверхностных рецепторов и маркеров лейкоцитов (иммунофенотипирование) и др. клеток.

Обнаружение бактериальных и вирусных антигенов в инфек¬ционных материалах, тканях животных и культурах клеток при помощи флюоресцирующих антител (сывороток) получило широкое применение в диагностической практике. Приготовление флюоресцирующих сывороток основано на спо¬собности некоторых флюорохромов (например, изотиоцианата флюоресцеина) вступать в химическую связь с сывороточными белками, не нарушая их иммунологической специфичности.

Различают три разновидности метода: прямой, непрямой, с комплементом. Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета.

Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела + антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе.

Механизм. На предметном стекле готовят мазок из исследуемого ма¬териала, фиксируют на пламени и обрабатывают иммунной кроличьей сывороткой, содержащей антитела против антигенов возбудителя. Для образования комплекса антиген — антитело препарат помещают во влажную камеру и инкубируют при 37 °С в течение 15 мин, после чего тщательно промывают изотоническим раствором хлорида натрия для удаления не связавших¬ся с антигеном антител. Затем на препарат наносят флюоресци¬рующую антиглобулиновую сыворотку против глобулинов кро¬лика, выдерживают в течение 15 мин при 37 °С, а затем препарат тщательно промывают изотоническим раствором хлорида натрия.

В результате связывания флюоресцирующей антиглобулиновой сыворотки с фиксированными на антигене специфическими антителами образуются светящиеся комплексы антиген — антитело, которые обнаруживаются при люминесцентной микроскопии.

36. Иммуноферментный анализ, иммуноблоттинг. Меха¬низм, компоненты, применение.

Иммуноферментный анализ или метод — выявление ан¬тигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интен¬сивность окраски прямо пропорциональна количеству свя¬завшихся молекул антигена и антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных бо-лезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепати¬та В и др., а также определения гормонов, ферментов, лекар¬ственных препаратов и других биологически активных ве¬ществ, содержащихся в исследуемом материале в минорных концентрациях (1010-1012 г/л).

Твердофазный ИФА — вариант теста, когда один из компо¬нентов иммунной реакции (антиген или антитело) сорбирован на твердом носителе, напр., в лунках планшеток из полистирола. Компоненты выявляют добавлением меченых антител или анти¬генов. При положительном результате изменяется цвет хромоге¬на. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют несвязавшиеся реагенты путем промывания,

I. При определении антител в лунки планшеток с сорбированным антигеном последовательно добавляют сы¬воротку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, ме¬ченную ферментом, и субстрат/хромоген для фермента.

II. При определении антигена в лунки с сорби¬рованными антителами вносят антиген (напр. сыворотку кро¬ви с искомым антигеном), добавляют диагностическую сыво¬ротку против него и вторичные антитела (против диагностиче¬ской сыворотки), меченные ферментом, а затем субстрат/хро¬моген для фермента.

Конкурентный ИФА для определения антигенов: искомый антиген и меченный ферментом антиген конкурируют друг с другом за связывание ограниченного количества антител иммунной сыворотки.

Другой тест - конкурентный ИФА для определения антител: искомые анти¬тела и меченные ферментом антитела конкурируют друг с дру¬гом за антигены, сорбированные на твердой фазе.

Иммуноблоттинг — высокочувстви¬тельный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Иммуноблоттинг ис-пользуют как диагностический метод при ВИЧ-инфекции и др.

Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофоре¬за в полиакриламидном геле, затем переносят их из геля на активированную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Фирмы выпускают такие полоски с «блотами» антиге¬нов. На эти полоски наносят сыворотку больного. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся антител боль¬ного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов челове¬ка, меченную ферментом. Образовавшийся на полоске комплекс [антиген + антитело больного + антитело противIg человека] выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.

37. Серологические реакции, используемые для диагнос¬тики вирусных инфекций.

Иммунные реакции используют при диа¬гностических и иммунологических исследо¬ваниях у больных и здоровых людей. С этой целью применяют серологические методы, т. е. методы изучения антител и антигенов с помо¬щью реакций антиген—антитело, определяе¬мых в сыворотке крови и других жидкостях, а также тканях организма.

Обнаружение в сыворотке крови боль¬ного антител против антигенов возбудите¬ля позволяет поставить диагноз болезни. Серологические исследования применяют также для идентификации антигенов микро¬бов, различных биологически активных ве¬ществ, групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, иммунных комплексов, рецепто¬ров клеток и др.

При выделении микроба от больного про¬водят идентификацию возбудителя путем изучения его антигенных свойств с помощью иммунных диагностических сывороток, т. е. сывороток крови гипериммунизированных животных, содержащих специфические ан¬титела. Это так называемая серологическая идентификация микроорганизмов.

В микробиологии и иммунологии широко применяются реакции агглютинации, преци¬питации, нейтрализации, реакции с участи¬ем комплемента, с использованием меченых антител и антигенов (радиоиммунологичес¬кий, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный методы). Перечисленные реакции различаются по регистрируемому эффекту и технике постановки, однако, все они осно¬ваны на реакции взаимодействия антигена с антителом и применяются для выявления как антител, так и антигенов. Реакции иммуните¬та характеризуются высокой чувствительнос-тью и специфичностью.

Особенности взаимодействия антитела с ан¬тигеном являются основой диагностических реакций в лабораториях. Реакция in vitro меж¬ду антигеном и антителом состоит из специ¬фической и неспецифической фазы. В специ-фическую фазу происходит быстрое специфи¬ческое связывание активного центра антитела с детерминантой антигена. Затем наступает неспецифическая фаза —более медленная, ко¬торая проявляется видимыми физическими явлениями, например образованием хлопьев (феномен агглютинации) или преципитата в виде помутнения. Эта фаза требует наличия определенных условий (электролитов, опти¬мального рН среды).

Связывание детерминанты антигена (эпитопа) с активным центром Fab-фрагмента анти¬тел обусловлено ван-дер-ваальсовыми силами, водородными связями и гидрофобным взаимо¬действием. Прочность и количество связавше-гося антигена антителами зависят от аффин¬ности, авидности антител и их валентности.

38. Вакцины. Определение. Современная классификация вакцин. Требования, предъявляемые к современным вакцинным препаратам.

Вакцина — медицинский препарат, предназначенный для создания иммунитета к инфекционным болезням.

Классификации вакцин:

1.Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий. Примером таких вакцин являются БЦЖ и вакцина против натуральной оспы человека, в качестве которой используется непатогенный для человека вирус оспы коров.

2.Инактивированные (убитые) вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своём составе проективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины). В препараты иногда добавляют консерванты и адъюванты.

3.Молекулярные вакцины – в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в виде эпитопов, детерминант.

Корпускулярные вакцины – содержащие в своем составе протективный антиген

3.Анатоксины относятся к числу наиболее эффективных препаратов. Принцип получения – токсин соответствующей бактерии в молекулярном виде превращают в нетоксичную, но сохранившую свою антигенную специфичность форму путем воздействия 0.4% формальдегида при 37t в течение 3-4 недель, далее анатоксин концентрируют, очищают, добавляют адъюванты.

4.Синтетические вакцины. Молекулы эпитопов сами по себе не обладают высокой иммуногенностью для повышения их антигенных свойств эти молекулы сшиваются с полимерным крупномолекулярным безвредным веществом, иногда добавляют адъюванты.

5.Ассоциированные вакцины – препараты, включающие несколько разнородных антигенов.

Требования, предъявляемые к современным вакцинам:

• Иммуногенность;

• Низкая реактогенность (аллергенность);

• Не должны обладать тератогенностью, онкогенностью;

• Штаммы, из которых приготовлена вакцина, должны быть генетически стабильны;

• Длительный срок хранения;

• Технологичность производства;

• Простота и доступность в применении. 39. Живые вакцины. получение, применение. Достоинства и недостатки.

Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий.

Аттенуация (ослабление) возможна путём воздействия на штамм химических (мутагены) и физических (температура) факторов или посредством длительных пассажей через невосприимчивый организм. Так же в качестве живых вакцин используются дивергентные штаммы (непатогенные для человека), имеющие общие протективные антигены с патогенными для человека микробами. Примером такой вакцины является БЦЖ и вакцина против натуральной оспы.

Возможно получение живых вакцин генно-инженерным способом. Принцип получения таких вакцин сводится к созданию непатогенных для человека рекомбинантных штаммов, несущих протективные антигены патогенных микробов и способных при введении в орг. человека размножаться и создавать иммунитет. Такие вакцины называют векторными.

Вне зависимости от того, какие штаммы включены в вакцины, бактерии получают путём выращивания на искусственных питательных средах, культурах клеток или куриных эмбрионах. В живую вакцину, как правило, добавляют стабилизатор, после чего подвергают лиофильному высушиванию.

В связи с тем, что живые вакцины способны вызывать вакцинную инфекцию (живые аттенуированные микробы размножаются в организме, вызывая воспалительный процесс проходящий без клинических проявлений), они всегда вызывают перестройку иммунобиологического статуса организма и образование специфических антител. Это так же может являться недостатком, т. к. живые вакцины чаще вызывают аллергические реакции.

Вакцины данного типа, как правило, вводятся однократно.

Примеры: сибиреязвенная вакцина, чумная вакцина, бруцеллёзная вакцина, БЦЖ вакцина, оспенная дермальная вакцина.

40. Инактивированные (корпускулярные) вакцины. Применение. Недостатки.

Инактивированные (убитые, корпускулярные или молекулярные) вакцины – препараты, в качестве действующего начала включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы антигенов, содержащие в своём составе протективные антигены (субклеточные, субвирионные вакцины).

Для выделения из бактерий и вирусов антигенных комплексов (гликопротеинов, ЛПС, белков) применяют трихлоруксусную кислоту, фенол, ферменты, изоэлектрическое осаждение.

Их получают путем выращивания патогенных бактерий и вирусов на искусственных питательных средах, инактивируют, выделяют антигенные комплексы, очищают, конструируют в виде жидкого или лиофильного препарата.

Преимуществом данного типа вакцин является относительная простота получения (не требуется длительного изучения и выделения штаммов). К недостаткам же относятся низкая иммуногенность, потребность в трехкратном применении и высокая реактогенность формализированных вакцин. Так же, по сравнению с живыми вакцинами, иммунитет, вызываемый ими, непродолжителен.

В настоящее время применяются следующие убитые вакцины: брюшнотифозная, обогащенная Vi антигеном; холерная вакцина, коклюшная вакцина.

41. Субклеточные и субъединичные (химические) вакцины. Получение. Преимущество. Применение. Роль адъювантов.

Субклеточные вакцины, в которых в качестве действующего начала используют антигенные комплексы, выделенные из бактерий после их разрушения. Приготовление субклеточных вакцин сложнее, чем цельноклеточных, однако такие вакцины содержат меньше балластных компонентов микроорганизмов.

Раньше субклеточные вакцины называли химическими, поскольку применяли химические методы при выделении антигенов, из которых готовили вакцину. Однако этот термин более применим к вакцинам, полученным методом химического синтеза.

В настоящее время используют субклеточные инактивированные вакцины против брюшного тифа (на основе О-, Н- и Vi-антигенов), дизентерии, гриппа (на основе нейраминидазы и гемагглютинина), сибирской язвы (на основе капсульного антигена) и др. Такие вакцины, как правило, применяют с добавлением адъювантов.

Действующим началом этого типа препаратов являются протективные антигены бактерий, полученные путем воздействия ультразвука на бактериальные клетки.

Главным преимуществом данного типа вакцин является их низкая реактогенность.

Адъюванты применяются для усиления иммуногенности вакцин. В качестве адъювантов используют минеральные сорбенты (гели гидрата окиси и фосфата аммония), полимеры, и др. хим. соединения, бактерии и компоненты бактерий, липиды, вещества, вызывающие воспалительную реакцию. Они действуют на антиген и организм в целом. Действие на антиген сводится к укрупнению молекул антигена, т. е. превращению растворимых антигенов в корпускулярные, в результате чего антиген лучше захватывается иммунокомпетентными клетками. При воздействии на организм в месте инъекции адъюванты вызывают воспалительный процесс образование фиброзной капсулы, что способствует более длительному сохранению антигена в «депо» и суммации антигенных раздражений. Адъюванты так же непосредственно активируют пролиферацию В, Т и А систем иммунитета.

42. Молекулярные вакцины. Анатоксины. Получение, очистка, титрование. Применение.

Молекулярные вакцины – в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в виде эпитопов, детерминант.

В процессе культивирования природных патогенных микробов можно получить протективный антиген, синтезируемый этими бактериями токсин затем превращается в анатоксин, сохраняющий специфическую антигенность и иммуногенность. Анатоксины являются одним из видов молекулярных вакцин.

Анатоксины – препараты, полученные из бактериальных экзотоксинов, полностью лишенные своих токсических свойств, но сохранившие антигенные и иммуногенные свойства.

Получение: токсигенные бактерии выращивают на жидких средах, фильтруют с помощью бактериальных фильтров для удаления микробных тел, к фильтрату добавляют 0,4% формалина и выдерживают в термостате при 30-40t на 4 недели до полного исчезновения токсических свойств, проверяют на стерильность, токсигенность и иммуногенность. Эти препараты называются нативными анатоксинам, в настоящее время почти не используются, т. к. содержат большое количество балластных веществ, неблагоприятно влияющих на организм. Анатоксины подвергают физической и химической очистке, адсорбируют на адъювантах. Такие препараты называются адсорбированными высокоочищенными концентрированными анатоксинами.

Титрование анатоксинов в реакции фолликуляции производят по стандартной фолликулирующей антитоксической сыворотке, в которой известно количество антитоксических единиц. 1 антигенная единица анатоксина обозначается Lf, это то количество анатоксина, которое вступает в реакцию фолликуляции с 1 единицей дифтерийного анатоксина.

Анатоксины применяются для профилактики и реже, для лечения токсинемических инфекций (дифтерия, газовая гангрена, ботулизм, столбняк). Так же анатоксины применяются для получения антитоксических сывороток путем гипериммунизации животных.

Примеры препаратов: АКДС, АДС, адсорбированный стафилококковый анатоксин, ботулинистический анатоксин, анатоксины из экзотоксинов возбудителей газовых инфекций.

43. Генно-инженерные вакцины. Ассоциированные и комбинированные вакцинные препараты. Достоинства.

Генно-инженерные вакцины – это препараты, полученные с помощью биотехнологии, которая по сути сводится к генетической рекомбинации.

Для начала получают ген, который должен быть встроен в геном реципиента. Небольшие гены могут быть получены методом химического синтеза. Для этого расшифровывается число и последовательность аминокислот в белковой молекуле вещества, затем по этим данным узнают очерёдность нуклеотидов в гене, далее следует синтез гена химическим путем.

Крупные структуры, которые довольно сложно синтезировать получаются путем выделения (клонирования), прицельного выщепления этих генетических образований с помощью рестриктаз.

Полученный одним из способов целевой ген с помощью ферментов сшивается с другим геном, который используется в качестве вектора для встраивания гибридного гена в клетку. Вектором могут служить плазмиды, бактериофаги, вирусы человека и животных. Экспрессируемый ген встраивается в бактериальную или животную клетку, которая начинает синтезировать несвойственное ей ранее вещество, кодируемое экспрессируемым геном.

В качестве реципиентов экспрессируемого гена чаще всего используется E. coli, B. subtilis, псевдомонады, дрожжи, вирусы, некоторые штаммы способны переключаться на синтез чужеродного вещества до 50% своих синтетических возможностей – эти штамм называются суперпродуцентами.

Иногда к генно-инженерным вакцинам добавляется адъювант.

Примерами таких вакцин служат вакцина против гепатита В (энджерикс), сифилиса, холеры, бруцеллёза, гриппа, бешенства.

Есть определённые сложности в разработке и применении:

- длительное время к генно-инженерным препаратам относились настороженно.

- на разработку технологии для получения вакцины затрачиваются значительные средства

- при получении препаратов данным способом возникает вопрос об идентичности полученного материала природному веществу.

Ассоциированные вакцины – препараты, включающие несколько разнородных антигенов и позволяющие проводить иммунизацию против нескольких инфекций одновременно. Если в препарат входят однородные антигены, то такую ассоциированную вакцину называют поливакциной. Если же ассоциированный препарат состоит из разнородных антигенов, то его целесообразно называть комбинированной вакциной.

Возможна так же комбинированная иммунизация, когда одновременно вводят несколько вакцин в различные участки тела, например, против оспы (накожно) и чумы (подкожно).

Примером поливакцины можно считать живую полиомиелитную поливакцину, содержащую аттенуированные штаммы вируса полиомиелита I, II, III типов. Примером комбинированной вакцины является АКДС, куда входят инактивированная корпускулярная коклюшная вакцина, дифтерийный и столбнячный анатоксин.

Комбинированные вакцины применяются в сложной противоэпидемической обстановке. В основе их действия лежит способность иммунной системы отвечать на несколько антигенов одновременно. 44. Антитоксические сыворотки. Получение, очистка, титро¬вание. Применение. Осложнения при использовании и их преду¬преждение.

Антитоксические гетерогенные сыворотки получаются путем гипериммунизации различных животных. Они называются гетерогенными т.к. содержат чужеродные для человека сывороточные белки. Более предпочтительным является применение гомологичных антитоксических сывороток, для получения которых используется сыворотка переболевших людей (коревая, паротидная), или специально иммунизированных доноров (противостолбнячная, противоботулинистическая), сыворотка из плацентарной а так же абортивной крови, содержащие антитела к ряду возбудителей инфекционных болезней вследствие вакцинации или перенесенного заболевания.

Для очистки и концентрирования антитоксических сывороток используют методы: осаждение спиртом или ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.

Активность иммунных антитоксических сывороток выражают в антитоксических единицах, т. е. тем наименьшим кол-вом антител, которое вызывает видимую или регистрируемую соответствующим способом реакцию с определённым кол-вом специфического антигена. Активность антитоксической противостолбнячной сыворотки и соответствующего Ig выражается в антитоксических единицах.

Антитоксические сыворотки применяются для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена).

После введения антитоксических сывороток возможны осложнения в виде анафилактического шока и сывороточной болезни, поэтому перед введением препаратов ставят аллергическую пробу на чувствительность к ним пациента, а вводят их дробно, по Безредке.

45. Препараты иммуноглобулинов. Получение, очистка, по-казания к применению.

Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки-иммуноглобулины.

Иммуноглобулины, иммунные сыворотки подразделяют на:

1. Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т. е. сыво¬ротки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.

2. Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к воз¬будителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.

3. Противовирусные сыворотки (коревая, гриппоз¬ная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.

Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.

Активность иммуноглобулинов выражают в антитоксических единицах, в титрах вируснейтрализующей, гемагглютинирующей, агглютинирующей активности, т.е. тем наименьшим количеством антител, которое вызывает видимую реакцию с определенным количеством специфического антигена.

Иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для ле¬чения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета.

При необходимости экстренного создания иммунитета, для лечения развивающейся инфекции применяют иммуноглобулины, содержащие готовые антитела.

2. Патогенность и вирулентность. Факторы патогенности.

Патогенность – видовой признак, закрепленный в геноме – это потенциальная возможность вызвать инфекционную болезнь ( т.е. проникнуть в организм, размножаться в нем и вызвать инфекционные заболевания)

Микроорганизмы подразделяются на: Облигатно - патогенные, непатогенные, условно- патогенные.

Фенотипическая признак патогенности - вирулентность – количественная мера патогенности.

Вирулентность можно оценить.

Минимальная летальная доза ( DLM) - это минимальная смертельная доза, которая при определенных условиях вызывает гибель 95 % чувствит. лаборат. животных.

50% летальная доза(Dl 50)/50% животных( масса, возраст, срок гибели) =

Повышать вирулентность запрещаенно ( создавать био оруж.)

Аттенуация – понижение вирулентности.

Аттенуированные штаммы можно использовать как живые вакцины.

Факторы патогенности микроорганизмов:

Структурные Ферменты агрессии Токсины

Капсула Нейраминидаза Летальный

Клеточная стенка Гиалуронидаза Энтеро -

Пили адгезии ( непост) ДНК- аза Нейро -

Жгутики Пептидаза Эндо- ( в процессе гибели клетки )

Плазмокоагулаза , коллагеназа Экзо – ( без разруш. клетки)

К факторам патогенности относят способность микроорганизмов прикрепляться к клеткам (адгезия), размещаться на их поверхности (колонизация), проникать в клетки (инвазия) и противостоять факторам защиты организма (агрессия).

Адгезия является пусковым механизмом инфекционного процесса. Под адгезией понимают способность микроорганизма адсорбироваться на чувствительных клетках с последующей колонизацией. Структуры, ответственные за связывание микроорганизма с клеткой называются адгезинами и располагаются они на его поверхности. Адгезины очень разнообразны по строению и обусловливают высокую специфичность - способность одних микроорганизмов прикрепляться к клеткам эпителия дыхательных путей, других - кишечного тракта или мочеполовой системы и т.д. На процесс адгезии могут влиять физико-химические механизмы, связанные с гидрофобностью микробных клеток, суммой энергии притяжения и отталкивания. У грамотрицательных бактерий адгезия происходит за счет пилей I и общего типов. У грамположительных бактерий адгезины представляют собой белки и тейхоевые кислоты клеточной стенки. У других микроорганизмов эту функцию выполняют различные структуры клеточной системы: поверхностные белки, липополисахариды, и др.

Инвазия. Под инвазивностью понимают способность микробов проникать через слизистые, кожу, соединительно-тканные барьеры во внутреннюю среду организма и распространятся по его тканям и органам. Проникновение микроорганизма в клетку связывается с продукцией ферментов, а также с факторами подавляющими клеточную защиту. Так фермент гиалуронидаза расщепляет гиалуроновую кислоту, входящую в состав межклеточного вещества, и, таким образом, повышает проницаемость слизистых оболочек и соединительной ткани. Нейраминидаза расщепляет нейраминовую кислоту, которая входит в состав поверхностных рецепторов клеток слизистых оболочек, что способствует проникновению возбудителя в ткани.

Агрессия. Под агрессивностью понимают способность возбудителя противостоять защитным факторам макроорганизма. К факторам агрессии относятся: протеазы - ферменты, разрушающие иммуноглобулины; коагулаза - фермент, свертывающий плазму крови; фибринолизин - растворяющий сгусток фибрина; лецитиназа - фермент, действующий на фосфолипиды мембран мышечных волокон, эритроцитов и других клеток. Патогенность может быть связана и с другими ферментами микроорганизмов, при этом они действуют как местно, так и генерализованно.

Важную роль в развитии инфекционного процесса играют токсины. По биологическим свойствам бактериальные токсины делятся на экзотоксины и эндотоксины.

Экзотоксины продуцируют как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии. По своей химической структуре это белки. По механизму действия экзотоксина на клетку различают несколько типов: цитотоксины, мембранотоксины, функциональные блокаторы, эксфолианты и эритрогемины. Механизм действия белковых токсинов сводится к повреждению жизненно важных процессов в клетке: повышение проницаемости мембран, блокады синтеза белка и других биохимических процессов в клетке или нарушении взаимодействия и взаимокоординации между клетками. Экзотоксины являются сильными антигенами, которые и индуцируют образование в организме антитоксинов. Экзотоксины обладают высокой токсичностью. Под воздействием формалина и температуры экзотоксины утрачивают свою токсичность, но сохраняют иммуногенное свойство. Такие токсины получили название анатоксины и применяются для профилактики заболевания столбняка, гангрены, ботулизма, дифтерии, а также используются в виде антигенов для иммунизации животных с целью получения анатоксических сывороток.

Патогенность бактерий контролируется тремя типами генов: гены – собственной хромосомами, гены, привнесенные плазмидами и умеренными фагами.

1.ПРЕДМЕТ И ЗАДАЧИ ИММУНОЛОГИИ. 3.Строение и функции органов иммунной системы

Иммунология– наиболее перспективное и быстроразвивающееся направлениеТимуссост. из 2 долей, кот. делятся на более мелкие дольки, в каждой из кот. раз-

биологии и медицины.В самостоятельную дисциплину иммунология выдели- лич. корковый и мозговой слой. Корковый слой построен из фолликулов Кларка,

лась в конце 19 в из микробиологии. Первые кафедры иммунологии, где эта дис- образованных активно делящимися тимоцитами (именно здесь самый высокий

циплина преподавалась как самостоятельный предмет, не только у нас в стране, темп митозов – клеточный цикл протекает 3-6 часов), единичными макрофагами и

но и за рубежом, появились в 1969-1970 гг., международ. общ-во иммунологов эпителиальными клетками. Кортикальные тимоциты отличаются незрелостью.

возникло в 1971, в 1979 г. в СССР был организован Институт иммунологии. Паренхима сост. из эпителиальных клеток (скопления эпителиальных клеток-

История иммунологии началась значительно раньше и возникла из практической тельца Гассаля), содержащих секреторную гранулу, выделяющую “тимические

необходимости борьбы с инфекционными заболеваниями. факторы”. В мозговом слое содерж-ся зрелые тимоциты, кот. включ-ся в рецир-

ОСНОВНЫЕ ВЕХИ СТАНОВЛЕНИЯ И РАЗВИТИЯ ИММУНОЛОГИИ. куляцию и заселяют периферические органы иммунной системы.

У истоков иммунологии стоял английский врач Дженнер, который разработалФУНКЦИИ ТИМУСА: сообщает иммунологическую компетентность клеткам –

метод вакцинации против оспы.Его исследования носили частный характер и предшественницам (созревание в зрелые тимоциты); управляет их деят-тью в др.

касались только одного заболевания. Развитие научной иммунологии связывают лимфоидных органах посредством тимусных гормонов.

с именем Луи Пастера, который сделал первый шаг к поиску вакцинных препа-Костный мозг– пред. соб. тканевое объед-ие ретикулярной стромы, гемопоэти-

ратов, создающих устойчивый иммунитет к инфекциям: получил и применил ческих и лимфоидных клеток, а также разветвленной сети капилляров.

на практике вакцины против холеры, сибирской язвы, бешенства, полученные Основное назначение костного мозга - гемопоэз всех типов клеток.

из микробов с ослабленной вирулентностью (аттенуированные). Основополож- Периферические органы иммунной системы:

ником учения о клеточном иммунитете явл. И.Мечников, создавший фагоцитар-Селезенка – наиболее крупный орган лимфоидной сис-мы, содержит до 25% лим-

ную теорию (1901-1908).Беринг и Эрлих- заложили основу гуморального им- фоцитов. В селезенке различ. красную и белую пульпу. В красной преобладают

мунитетаЭмиль фон Беринг-1 лауреат Нобелевской премии по медицине (1901 г) В-клетки - в пограничной, маргинальной зоне). С селезенкой связано формир-ие

награжден за открытие антитоксических антител и разработку противостолбняч- гуморального иммунного ответа в виде продукции иммуноглобулинов.

ной, противодифтерийной сывороток. Эрлих– основатель теории боковых цепейЛимфоузлы выполн. в орг-ме 3 гл. ф-ции: Фильтрация лимфы и удаление из нее

(ат в виде рецепторов находятся на пов-ти клеток аг специфически отбирает соот- чужеродных антигенов; Иммуногенез при первич. и вторичном иммунном ответе;

ветствующиеантительные рецепторы, обеспечивает их выход в циркуляцию и ком Перераспределение лимфоцитов и моноцитов между лимфой и кровью.

пенсаторную гиперпродукцию антител (рецепторов)Учение об антигенах – В лимфоузле различ. корковый слой- место концентрации В-клеток (тимусне-

К. Ландштейнер, Ж. Борде,доказавшие, что аг могут быть не только микробы и зависимая зона) и мозговое в-во, представленное лимфоцитами, макрофагами,

вирусы, но любые клетки животного. К. Ландштейнер открытие групп крови- плазмоцитами и ретикулярными клетками стромы. Область между корой и мозго-

(1930 г.).Ч. Рише-ткрытие анафилаксии и аллергии (1913).Бернет и Медовар- вым веществом – тимусзависимая зона – место концентрации Т-лимфоцитов.

(1960 г.) - учение об иммунологической толерантности, показали, что в основе Лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистымиобеспечив. иммунный

отторжения генетически чужеродных тканей и инфекционного иммунитета лежат ответ на антигены, проникающие через слизистые покровы пограничных тканей,

одни и те же механизмы. М. Бернет создатель клонально-селекционной теории и выделение через слизистые антител (секреторных иммуноглобулинов) к этим

иммунитета – один клон лимфоцитов способен реагировать только на одну специ- антигенам. Кожа не только служ. барьером, но и явл. иммунокомпетентным

фическую антигенную детерминанту. Бернет явл.автором одного из важнейших органом. Кератиноциты вырабатывают цитокины (ИЛ-1, ИЛ-3, ИЛ-6, ИЛ-7,

положений иммунологии – концепции об иммунологическом надзоре за постоян- ГМ-КСФ и др.), особенно после стимуляции и повреждения; в кожу мигри-

ством внутр. среды орг-ма. руют Т-лимфоциты (CD4), несущие кожный хоминг-антигенCLA-1). В

В 60-е годы начинает развив.учение о Т- и В системах иммунитета (Клэман, эпидермисе постоянно присутствуют Т-лимфоциты и дендритные клетки

Дэвис, Ройт).Была предложена теория 3-х - клеточной кооперации иммуноцитов (ДК), связывающие и обрабатывающие антиген.

в иммунном ответе (Петров, Ройти др.). Главными участниками предложеннойЛимфоидная ткань- специализирован. ткань, физиологической ф-цей которой

схемы стали Т и В-лимфоциты и макрофаги. явл. иммунологическая реактивность; она концентрирует антиген; обеспечивает

Далее шло активное развитие иммунологии: контакт с антигеном различ. видов клеток; транспортирует гуморальные в-ва и

расшифровка структуры Ig - (Портер, Эйдельман) клеточные стр-ры лимфоидной ткани в необходимые уч-ки орг-ма и

открытие структур, кодируемых ГКГ – (Бенацераф, Снелл) элиминирует чужеродные антигены.

генный контроль иммунного ответа, разнообразия антител и зн-ие некот. генов в Строение:сост. из сети ретикулярных и лимфоидных клеток (лимфоцитов), раз-

предрасположенности к заболеваниям лич. рыхлую лимфоидную ткань- доминируют ретикулярные волокна, ретикуляр-

получение моноклональных антител и обоснование сетевой регуляции ные клетки и фиксированные макрофаги; и плотную- лимфоциты, плазматичес. иммуногенеза (Келер, Милштейн, Ерне) клетки и свободные макрофаги.

В настоящее время отмеч. интенсивное развитие клинической иммунологии и ши- К лимфоидной системе относ. лимфатические сосуды. Лимфатические сосуды рокое внедрение в медицину достижений теоретической иммунологии (расшиф начин-ся в тканях сетью анастомозирующих капилляров, кот. не имеют базаль ровка патогенеза многих заболеваний; создание новых классиф-ций; классиф-ция ной мембраны, поэтому стенка их проницаема и они могут адсорбировать из болезней иммунной сис-мы; разработка методов иммунодиагностики (ИФА, РИА, тканевой жид-ти воспалительн. экссудаты, макромолекулы и мелкие корпускулы.

цепная полимеразная р-ция и др.), иммунотерапии). Лимфа образ-ся из тканевой жид-ти, диффундирующей через стенки лимфатичес-

Основные этапы становления и развития иммунологии: ких капилляров в лимфатические сосуды. Лимфатические сосуды доставляют

1796 – 1900 гг.– инфекционная иммунология лимфу в лимф. узлы, где в нее поступают лимфатич. клетки, кот. покидая лим-

1900 – 1950 гг.- нормальная иммунология фоидный орган по лимфатич. сосудам, оказыв-ся в грудном протоке – главном

1950 г. и по настоящее время– современный этап сосуде лимфоидной системы, из кот. они вновь проникают в кровоток через

ИММУНОЛОГИЯ - наука об иммунитете, кот. изучает генетические, левую подключичную вену. Так обеспеч-ся рециркуляция клеток по всему орг-му

клеточные и молекулярные механизмы реагирования организма на

чужеродные субстанции, именуемые антигенами.

2. Иммунная система- это самостоятельная сис-ма, филогенетически древняя. 4.Онтогенез иммунокомпетентных клеток.

У нее 3 особ-ти: генерализована по всему организму; ее клетки постоянно ре- Центральные иммунокомпетентные клетки (ИКК) – лимфоциты. Кроме того, к

циркулируют по всему телу через кровоток; ним относ. клетки мононуклеарной сис-мы (моноциты, макрофаги), медиаторные

специфичность выработки антител и/или сенсибилизированные лимфоцитов. клетки (нейтрофилы, базофилы. Эозинофилы, тучные клетки, тромбоциты), лим-

Иммунная система (ИС)-совок-ть лимфоидных органов и тканей, расположен. фоциты третьего типа, НК – клетки (натуральные киллеры), К – клетки (киллеры),

в различ. частях орг-ма, но функционирующих как единое целое, в рез-те посто- о – клетки, L– клетки. В основном обеспеч-ют антиген не специфическую защиту.

янной и интенсивной циркуляции лимфоцитов - центральных элем-тов ИС. Онтогенез лимфоцитов.

В наст. время ИС рассматр-ся как сис-ма контроля генетического постоянства

внутр. среды орг-ма.

Действие ИС основывается на ее способности: распознавать чужеродные

экзогенные и эндогенные антигены (микробы, чужеродные клетки, ткани, пере-

саживаемые органы, мутантные клетки, в т.ч. опухолевые); перерабатывать анти

гены; элиминировать их; запоминать инф-цию о чужеродном антигенном м-ле.

Основные физиологические функции иммунной системы: Рециркулирующий пул лимфоцитов включает в себя лимфоциты крови, лимфы

Участие в процессе контроля дифференц-ки вновь обновляющ. клеток и тканей; и лимфоузлов, циркулирующие из крови в лимфу и лимфоузлы.

Утилизация и элиминация отживших клеток тканей; Маркеры- поверхностные стр-ры (или внутриклеточные), характеризующие как

Противоинфекционный иммунитет; отдельные типы лимфоцитов, так и определенные этапы их развития. Разновид-

Иммунологический контроль беременности; ностью поверхностных маркеров явл. кластеры дифференцировки (англ. CD)

Противоопухолевый иммунитет; Варианты маркеров:1)поверхностные антигены, в т.ч. дифференцировочные, по-

Трансплантационный иммунитет. являющиеся и исчезающие в завис-ти от стадии развития клетки или сохраняю-

ИС оказывает влияние на другие сис-мы орг-ма. Оказалось, что растворимые щие стр-ры), с пом. которых клетки узнают антиген и воспринимают другие

продукты ИС (иммуноцитокины) явл. мощными регуляторными факторами, стимулы, необходимые для их жизнедеят-ти.

действующими на ф-цию органов кроветворения, на нервную, эндокринную

системы и т.д. В случаях ослабления или повреждения ИС развив-ся инфекцион-

ные заболевания, аутоиммунные расстройства, вероятность рака возрастает в

сотни и тысячи раз. ИС выполн. не только защитные ф-ции, но и при опреде-

ленных ситуациях может вызывать развитие нежелательных последствий

иммунного ответа, таких как аутоиммунитет, гиперчувствительность,

отторжение трансплантата.

5. Характеристика Т-лимфоцитов. Важнейшими маркерами Т-лимфоцитов служ. рецепторы, кот. отлич. по стр-ию,

Т – система иммунитета представлена Т – лимфоцитами: функциональному назначению и разделены на 3 группы:1)антиген распознающие

Наивные (0 – Т – лимфоциты) – не встречавшие АГ. рецепторы на Тлф - (TCR), на Влф - рецепторы Ig природы; позвол. распознавать

Активированные Т – клетки – армированные Т – лимфоциты. антиген;2)рецепторы для иммунологически значимых продуктов иммунной

Костномозговые, тимические, циркулирующие. сис-мы (рецепторы к FcIg, C1-C9, лимфокинов и др)-необходимы для реализации

Тх (T_H) - включают иммуноциты в иммунный ответ. различ. ф-ций иммунной сис-мы;3)рецепторы для продуктов неиммунного проис-

Тс (T_S) – подавляют реакции ИКК. хождения (гормонов, нейропептидов и др.), 4)рецепторы адгезии.

Тк (Т_ЦТЛ) – обеспечивают лизис клеток мишеней.Ф-ции Т-лимфоцитов:

Повторить медиаторные клетки. 1.эффекторная функция-(ГЗТ, р-кция противоопухолевого, трансплантационно

Лимфоциты третьего типа– доказано что цитотоксическое действие осущ-ся в го иммунитета, иммунные р-ции против некоторых инфекций: туберкулёз, лепра,

присутствии небольших кол-в АТ, т.е. действие антитело зависимо О, К, L. малярия – паразитируют внутри клеток.)

Цитотоксическое действие НК клеток не требует наличия антител, наибольшая 2..иммунорегуляторная функция-(регуляция функциональной активности макро-

активность по отношению к вирусным и опухолевым агентам. Лизируя фагов, В-лимфоциотов, NKи др.)

опухолевые АГ запоминают специфические «сахара» на пов-ти. 3. распознавание АГ на поверхности АПК и запуск иммунного ответа-(АПК –

Субпопуляция Т-лимфоцитов: антиген представляющие клетки)

регуляторные 4.синтез цитокинов-(рецепторная ф-ция, пример гемопоэза на самых ран. этапах)

Т-хелперы (Т-хелперы0 (Тх 0), Тх1, Тх2)

Т-супрессор

эффекторные

ЦТЛ (цитотоксические лимфоциты)

Т-клетки памяти.

Гамма-, дельта (интраэпителиальные) – Т-лимфоцит

Тх1 – клетки гиперчувствит-ти замедленного типа, помогают Т-лимфоцитам,

NK клеткам в приобретении цитотоксичности и активации инфантильных макро-

фагов. Способны синтезировать ИЛ – 2, 3, ИФН - γ, ФНО – β. Основные ИЛ – 2

и ИФН – γ.

Тх2 – оказыв. помощь В-клеткам в АТ продукции, цитокины необходимые для

гуморального иммунного ответа: ИЛ – 3, 4, 5, 6, 10, 13. Основной ИЛ – 4. подав-

ляют ф-цию Тх1 за счёт продукции цитокинов.

Тх0 – клетки, мигрирующие из централ. органов в периферические и не встречав- 8.Антитела (Ig) – способны специфически соед-ся с АГ, кроме АТ к Ig относят:

шие АГ, они активируются при встрече с АГ – премирование. Ig рецепторы лимфоцитов, мол-лы главного комплекса гистосовместимости

Цитокины: ИЛ –2, 3, 4, 5, 6, 10, 13, ИФН – γ, ФНО – β. ГКГС) I и II класса, адгезивные белки, патологические белки (миеломные белки).

ЦТЛ(Т-киллеры)-в периферич. органах, не типичны для тимуса, кост. Биологические ф-ции АТ:- Распознают и связывают АГ;

мозга, выпол. эффекторную ф-цию, цитокины: ИЛ – 2, 4, 5 10, ИФН-γ, ФНО-γ - Представляют АГ макрофагам и лимфоцитам.

Т-супрессоры – (некоторые говорят: «их нет») несут CD8 рецепторы, как и ЦТЛ, - Оказывают цитотоксическое действие в отношении чужеродных клеток.

и считается, что могут выполнять свою ф-цию от ус-ий то ли супрессорную, то ли - Обсонирующее влияние; - Активируют систему комплемента.

эффекторную. Их больше в селезёнке, в крови 20-25% от всех Т-лимфоцитов в Специфичность АТ– способность реагировать только с определённым АГ.

периферической крови до 60%. Считают, что у здорового чел-ка соотношение Валентность- число паратопов в молекуле АТ.

Т-хелперы / Т-супрессоры = 2/1 (иммунорегуляторный индекс), но нарушается Паратоп– связывается с эпитопом.

при иммунодефицитах и бывает менее 1 при аллергич.,аутоиммунных процессах. Антигенная детерминированость

Т-клетки памяти – рециркулирующие неделящиеся малые лимфоциты, кот. начи- Аффинность– прочность связи между 1 эпитопом АГ и 1 паратопом АТ.

нают пролиферировать после повторной встречи с АГ. И превращающиеся чаще Авидность– прочность связи АГ с АТ в реакции АГ-АТ.

всего в специфические цитотоксические клетки, место генерации не установлено. Ig состоит из: Две тяжёлых цепей (Н – цепи), Две лёгких цепей (L– цепи)

ОНТОГЕНЕЗ Т-ЛИМФОЦИТОВ Которые соединены дисульфидными связями (мостиками) (-S-S-).Каждая цепь

КОСТНЫЙ МОЗГ содерж. вариабельные области (V_H,V_L) и константные области (C_H,C_L).

ПСК Гомологичные структурные уч-ки лёгких и тяжёлых цепей Ig соединенные

дисульфидными связями – домены, состоят из 100-110 аминокислотных остатков.

C_H₁, C_H₂, C_H₃ – домены.

HLA-DR+ обеспечивают специфичность проникновения C_H₁ доменучаствует в связывании лёгких и тяжёлых цепей, а так же

клеток в тимус и их дальнейшее выживание аллоантигенное различие АТ.

ЛСК HLA-DR+, CD38+ маркер стадии синтеза повышаютсяC_H₂ доменявляется местом связывания комплемента и присоединения углевода.

в крови у больных с лейкозами C_H₃ доменслуж. уч-ком взаимод-ия сFc– рецептором на поверхности клеток.

TdT+ терминальная дезоксинуклеотедилтрансфераза –Вариабельные домены V_H и V_L.

исчезает с поверхности клеток по мере её созревания. При взаимод-ии V_HиV_Lдоменов образ-ся антигенсвязывающий уч-к АТ-Fab

Необходим для встраивания дополнит. нуклеотидных Fc– константные участки.

последовательностей в ДНК клетки, что увеличивает с Шарнирная область– обеспечивает подвиж-тьFabфрагмента и стабилизацию

труктурное разнообразие рецепторов. стереохимической структуры эпитопа в положении наиболее выгодном для

------------------------------------------------------------------ соединения с паратопом в АГ – вылавливает носитель.

ТИМУС Гетерогенность Ig.

субкортикальная Принадлежность Ig к тому или иному классу - завис. от характерн. особен-тей

первоначально взаимод. с дендритными клетками и макрофагами, стр-ия тяжёлых цепей, кол-ва аминокислотн. остатков, молекулярн. массы и т.д.

а потом в субэпителиальном слое взаимод. с эпителиал. клетками Тяжёлые цепи быв. 5 типов, выделяют классы Ig:G, А,D, Е, М.

няньками. Начинается активная пролиферация Т-лимфоцитов. Лёгкие цепи χ(капа)и λ(лямбда).

CD2+ адгезивный (с эритроцитами барана образует розетки).Ig G₁ – γ ₁ Ig G₂ – γ ₂ Ig G₃ – γ ₃ Ig G₄ – γ ₄ Ig А₁ – α₁ Ig А₂ – α₂

CD5+, CD7+ранние маркеры Т-лимфоцитов, сохран-я постоянно.Ig D – σ Ig Е – ε Ig М – μ

------------------------------------------------------------------ Антигенные свойства Ig:

кортикальная зона 1.Изотипы– АГ детерминанты, имеющиеся у всех особей данного вида, локали-

CD1+кортикальный рецептор. зованы на константных участкахHиL- цепей (IgA,M,G,D,E).

Появляются дубль положительные клетки CD4+/CD8+2.Аллотипы– детерминанты внутривидовые, кодируются аллельными генами и

CD3+постоянный рецептор лимфоцитов. Входит в состав АГ отражают внутривидовой полиморфизм (С областьH-цепей).

распознающего комплекса и обеспечив. передачу от 3.Идиотипы – АГ детерминанты, присущиеIgданной специфичности

АГ - сигнала от TCR+в цитоплазму. ( АГ характеристикаV-области).

TCRрецептор имеетIgимеет α и β цепи.V– вариабельные иДинамика выработки АТ.

С – константные домены. Внутри мембранный и цитоплазмат. уч-ки. Динамика накопления в крови АТ и их исчезновение из неё завис. от того первич- ---------------------------------------------------------- но или вторично орг-м встреч-ся с данным АГ, поэтому выделяют первичный и

медуллярная зона вторичный иммунный ответ.

CD4+CD8- CD8+CD4- Участие АТ в иммунном ответе проявляется в трёх основных формах:

1.Нейтрализация– АТ блокируют антигенные детерминанты патогенна и

CD2+,CD3+,TCR+,CD5+,CD6+, препятствуют его соединению с рецепторами клеток мишеней.

CD7+, CD28+ (CD4+; 50% CD8+), 2.Опсонизация– Ig соединяются сFcрецептором макрофага, а с другой

Fc Ig стороны к патогену, облегчая фагоцитоз.

3. Активация комплемента– АТ (Ig G и Ig М) фиксируют и активируют

CD45RA+ –Tх0;CD45RO+ - клетка памяти. комплимент.

CD25+,CD38+,CD71+,CD95+,HLA-DR+ - маркеры активированных Т-лимф-тов В основе р-ции антиген – антитело лежит взаимод-ие между эпитопами

CD 28 – у всех CD 4+ у 50% CD 8+ - предохраняет от апоптоза. антигена и паратопами антитела,основанное на их пространственном соответ-

Маркеры активации экспрессируют при встрече с митогеном: ствии (комплементарности).Эти связи обусловлены следующ. типами межмоле-

CD 25+ - рецептор к ИЛ –2 CD 71+ - рецептор к трансферину кулярных сил: -Электростатическими (ионными, полярными);

CD 95+ - рецептор индукторного фактора апоптоза – свидетельствует о готовно- -Водородными ; -Гидрофобными; -Силами Ван – дер – Вальса

сти клетки к апоптозу. Если Т-лимф-ы выход. на периферию, они заним. Т-зоны.

6. Характеристика В-лимфоцитов 9.Характеристика классов иммуноглобулинов

Централ. органом явл. красный костн. мозг (осн. место генерации В-лимфоцитов). Принадлежность иммуноглобулина к тому классу или подклассу завис. от харак-

Клеточный состав - В-лимфоциты разной степени зрелости, в т.ч. плазмоциты. терных особен-стей стр-ия тяжелых цепей (кол-ва и последов-ти аминокислотных

Эффекторными молекулами являются Ig А, М, G, Е,D. остатков, молекул.. массы, кол-ва доменов). Тяж. цепи быв. 5 типов (α, γ, δ, ε, µ).

В-клетка – основная структурная единица: составляющих 10 – 20% Легкие-каппа и лямбда. Иммуноглобулины, в завис. от особен-тей стр-ия конс-

В-лимфоциты- клетки диаметром 8,5 мкм, с ворсинчатой пов-тью, из – за рецеп- тантных областей тяж. цепей, подраздел. на 5классов:IgA,IgD,IgE,IgG,IgM.

торов погружённых в липидный слой мембраны, до 4 тыс. на 1 клетку, характери- Иммуноглобулин G (молекулярный вес 160 000) составл. около 80% всех

зуются тем, что принадлеж. к одномуилидвумклассам Ig. Св-ва: специфичность иммуноглобулинов чел-ка и животных. Он содер-ся не только во внутрисосу-

к АГ, стимулирует В-клеточную активацию и пролиферацию.Наличие Ig молекул дистом русле, но легко проник. с экстраваскулярные простр-ва, где осуществ.

для распознавания АГ (BCR) – основная харак-ка лимфоцитов. защитную ф-цию.Иммуноглобулин А (молекулярный вес 170 000)-составл.

Особенности рецепторов В-лимфоцитов (BCR). около 16% сывороточных иммуноглобулинов и встреч. в виде мономера

1.рецепторы равномерно распределены на поверхности В-лимфоцитов. (80%), димера(9S), три-мера (1IS) и более крупных полимеров.Сывороточный

2.облад. подвижностью и мол-лы могут перемещ-ся по пов-ти В-лимфоцитов. IgAу чел-ка составляет менее 50% всего пулаIgA. Ещёон содер-ся в секретах

3.1 клон В-лимфоцитов несёт Ig – рецептор способный реагировать только с кишечного и респираторного тракта, слезной жидкости, молока. Антитела

одной АГ детерминантой. этого класса осуществляют защиту слизистых оболочек от различных пато-

4.присоед-ие АГ ведёт к концентрированию комплексов рецептор с антигеном генных микроорганизмов, аллергенов и аутоантигенов. IgAфункционирует

на одном из полюсов клетки в виде «шапочки» (CAP) с последующим на пов-ти слизис. оболочек,контактирующих с антигенами. Это свойствоIgA

поглощением её клеткой. антител тормозит развитие хронических местных воспалит. процессов. Свя-

5.синтез Ig рецепторов происходит в В-лимфоцитах постоянно (50% рецептор- зываясь с антигенами, IgA-антитела задерживают их прилипание к пов-ти

ных молекул обновляются в течение 4 – 6 часов). клеток эпителия и препятствуют их проникновению во внутр. среду орг-ма.

Строение BCR. Иммуноглобулин М (молекулярный вес 950 000) составл. 5-10% от общего

Состав АГ распознающего комплекса В-лимфоцита: кол-ва иммуноглобулинов, а его конц-ция в сыворотке приближ-ся к 1 г/л.

1.BCR; (CD79a,b;mIgM,IgD) На сегодняшний день идентифицировано 2 субклассаIgM, три четверти кото-

2.корецептор (комплекс BCRдополняющих м-л, обладающ. сигнальной ф-цией, рого присутствует в сосудистом русле.IgMреагирует с нерастворимыми ан-

способствующ. повыш. афинности между АГ и антиген распознающим комп-сом. тигенами (агглютинация). К ним относ. изогемагглютинины, классический

CD19 – ревматоидный фактор, антитела, выявляемые в р-ции Вассермана, больш-во

CD20 – рецептор активации, регулирующий кальциевые каналы естественных антител, особенно против грамотрицательных бактерий.IgM

СD81 - наз. и макроглобулином, так как он явл. полимером и сост. из 5 четырехце-

CD 21 – рецептор для комплемента (рецептор к вирусу Эпштейна – Бара). почных субъединиц. IgM-антитела появл-ся на первом этапе иммунного отве-

Leu13 – белок, способный связываться с углеводной группой. та и наход. в основном в сосудистом русле. Поэтому им отведена важная за-

CD 22 – рецептор адгезии («прилипания») иногда присутствует. щитная роль при бактериемии, на ранних стадиях различных инфекционных

СУБПОПУЛЯЦИИ В-ЛИМФОЦИТОВ процессов.Иммуноглобулин D (молекулярный вес 160 000) составл. 0,2%

В зависимости от способности экспрессировать Т-клеточный CD 5 маркер; сывороточных иммуноглобулинов. IgDбыл обнаружен как парапротеин у

В2 – обычные – не экспрессируют его 80%, В1 – 20% от популяции В-лимф-тов. больного миело-мой. Основная ф-ция-на определенной стадии IgDвыполн.

1. В1 и В2-лимфоциты; роль антигенного рецептора В-лимфоцита. Во время беременности и при

2.В–супрессоры – тормозят иммуногенез в костном мозге и на периферии; приеме пероральных противозачаточных средств концентрация IgDв сыворо

3.В–хелперы – оказыв. помощь Т-лимф-там, способст. их активации митогенами; тке крови может возрастать почти вдвое. С IgDмогут быть связаны антитела

4..В–клетки памяти. против пенициллина, противоинсулиновые антитела у больных сахарным диа-

свойство

В1-лимфоциты

В2-лимфоциты

Происхождение

брюшная полость

костный мозг

Появление в

эмбриогенезе

рано

поздно

Локализация

Преоблад. в брюшной полости, миндалинах

до 75% в лимфатических узлах

Селекция клонов

нет селекции клонов

есть селекция клонов

Продукция антител

на тимуснезависимые аг:

IgM,IgA;

Низкоаффинные ат;

Синтез аутоантител;

на тимусзависимые аг:

IgM, затемIgGи др. классы

Аффинитет повыш-ся в

процессе

иммунного ответа

бетом, некоторые другие аутоантитела.

Иммуноглобулин Е (молекулярный вес 190 000) присутст. в сыворотке в

самой низкой концентрации (0,00002-0,0002 г/л). IgEоблад. выс. биологич.

активностью, цитофильностью, то есть способ-тью присоед-ся к клеткам

(тучным клеткам и базофилам), что приводит к их дегрануляции, выделению

иазоактивных аминов, кот. ответственны за проявление бронхиальной астмы,

сенной лихорадки и других аллергических заболеваний. Уровень IgE

возраст. при некотор. инфекциях, особенно при глистных инвазиях.

Онтогенез В-лимфоцитов.

В периферических органах и ККМ.

-есть АГ зависимая и антиген независимая дифференцировка.

-Важная роль костномозгового окружения (микроокружения).

Микроокружение – клетки стромы ККМ и молекулы межклеточного матрикса и

вырабатываемые этими клетками гуморальных факторов (ИЛ-7, 3, миелопептиды).

СТАДИИ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ В-ЛИМФОЦИТОВ

1.	ПСК	HLA-DR+ (в островках эмбриональной печени на 8 – 9 недели, затем прекращается и начинается в ККМ)
2.	ЛСК	HLA-DR+, CD38+
3.	про-В	HLA-DR+, CD19+, CD79a,b
4.	Пре-В1	Начало реорганизации генов, контролирующих тяжелые и легкие цепи IgM
5.	Пре-В2	появление m-цепиIgM, легкие цепи отсутствуют; CD20+,CD21+,CD72+
6.	Незрелые В-клетки	экспрессия легких цепей IgM(sIgM);BCR+,CD38-
7.	Зрелые В-клетки	BCR+ (sIgM, sIgD); CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD40+, CD72+, CD80+, CD86+, МНСIиII, рецепторы адгезии, для цитокинов, и ммуноглобулинов, компонентов комплемента
8.	активированные В-клетки	отсутствует sIgD, ориентация клеток на синтезIg определенного класса; CD25+,CD69+,CD71+,CD95+, МНСII+
9.	плазмоцит	отсутствие sIg, наличиеcyIgодного из классов; CD38+

7.Антигены- это в-ва, кот. индуцируют иммунный ответ, взаимод.с продуктами 10. Мононуклеарная фагоцитарная сис-ма.

иммунной сис-мы.Полные антигены-это в-ва, обладающ. иммуногенностью и Вспомогат. клетки («А» клетки) по ВОС отлич. от лимфоцитов по ряду св-в и вх.

антигенной специфичностью.Неполные антигены (гаптены)-это низкомолекуляр- в состав клеток мононуклеарной сис-мы фагоцитов.В неё включены клетки кост

ные в-ва, кот.е самостоятельно не вызывают иммунный ответ, но приобретают номозгового происхождения, обладающие подвижностью, способные активно фа-

эту способность при конъюгации с высокомолекулярными белками. гоцитировать и прилипать к стеклу.

Антигены по принципу генетической чужеродности. Мононуклеарные фагоциты: циркулирующие моноциты, макрофаги, локализую-

Тип АГ	Пример.	Роль.
1. Аутоантигены	Органоспецифические АГ (щитовидная железа, хрусталик глаза)	Аутоиммунные болезни (ауто- иммунный тиреоидит).
2. Идиотипы	Иммуноглобулин – специфические АГ – АТ, синтезируемых данным клоном.	Регуляция синтеза АТ.
3. Аллоантигены	АГ тканей и клеток, отличающиеся на внутривидовом уровне (группы крови HLA).	Транспланта- ционные р-кции, гемолитическая болезнь.
4. Ксеноантигены Эндокринные ксеноантигены	АГ клеток и тканей, отличающиеся на межвидовом уроне (почечные и сердечные АГ, перекрестно реагирующие АГ (АГ β – гемолитического стрептококка).	Роль в патогенезе аутоиммунных процессов.
5.Антигены различного происхождения	Пыльцевые АГ, лекарственные и др.	Индуцируют развитие различ. за- болеваний.

тными клетками вх. в сис-му АГ представляющих клеток, способны поглощать,

перерабатывать и представлять АГ в высокоиммуногенной форме Т-лимфоцитам.

Мононуклеарные фагоциты включены в сис-му фагоцитирующих клеток вместе

с гранулоцитами (микрофагами): (нейтрофилы, базофилы, эозинофилы).

Моноциты и макрофаги.Моноциты составляют 5 –10% среди лимфоцитов.

Макрофаги широко распространены в органах и тканях.

Макрофаги:резидентные– постоянно присутствуют в определённых тканях

(клетки Купфера в печени, альвеолярные макрофаги )

активированные– подвижные, мобилизуемые в очаги воспаления.

Отличит. св-во мононуклеарных фагоцитов – наличие неспецифической

эстеразы. Имеют широкий набор маркеров и рецепторов.

На пов-ти обнаруж-ся более 50 маркеров и рецепторов. Почти все из них не явл.

специфическими. Лишь CD 14 – рецептор к ЛПС (липополисахарид), явл. относи

тельно специфичным для данного ряда клеток.

Онтогенез моноцитов и макрофагов.

Факторы микроокружения:-Гранулоцитарно-макрофагальный колонии стиму-

лирующий фактор (КСФ); -Моноцитарно-макрофагальный КСФ; -ИЛ – 3

Некоторые факторы могут ингибировать развитие клеток моноцитарно-макрофа-

гального ряда, в частности трансформирующий фактор роста – β (ТФР - β).

Процесс трансформации моноцитов в макрофаги сопровождается морфологичес-

кими, биохимич. и функциональными изменениями в клетках, сопровождается 1.Растворимые АГ– белки, полисахариды, липополисахариды, корпускулярные увеличением их в р-рах, усиливающейся организацией внутриклеточных органел,

АГ (клетки, крупные частицы (бактерии, вирусы, эритроциты)). ростом количества лизосомальных ферментов.

2.В-ва с более слож. хим. стр-рой облад.более выс. иммуногенностью, вызывая Трансформировавшиеся макрофаги не возвращаются в циркулирующую кровь, а

более сильный иммунный ответ. элиминируются через слизистые ЖКТ и верхних дыхат. путей.

Полные АГ высокомолекулярны и белковой природы. Биологические ф-ции макрофагов:

Белковые в-ва проявл. иммуногенные св-ва при массе свыше 10 000 дальтон и с 1.Фагоцитоз (поглощение и переваривание чужеродных частиц: микроорг-мов,

ростом массы их иммуногенность повыш-ся, но у ряда более «лёгких» белков им- опухолевых клеток, погибших собственн. клеток) некоторые АГ не переварив-ся

муногенность не менее сильна (вазопрессин – 10 000, инсулин – 6 000). полностью из-за незавершённого хар-ра фагоцитоза;

В прямой зав-ти с валентностью АГ-кол-во антигенных детерминант (эпитопов), с 2.Образ-ие факторов иммунной защиты: синтез и секреция биологически активн.

кот. реагируют специфические АТ. Чем больше на АГ эпитопов, тем выше его в-в: цитокинов, компонентов комплемента, ферментов и др.;

иммуногенность. 3.Обработка антигена: частичное расщепление АГ и связывание его пептидов с

3.1 и то же АГ может быть высокоиммуногенным для одних видов животных и молекулами ГКГС II класса (в первую очередь);

не иммуногенным для других.Пример: стрептококк иммуногенен для чел-ка и 4.Презентация антигенного м-ла Т-хелперам (возможна после обработки АГ);

собак и не иммуногенен для кроликов. 5.Уч-ие во внеклеточный цитолизе: макрофаги способны оказыв. повреждающее

4.Процессинг АГ до высокоиммуногенной формы (в фаголизосомах), а так же действие на клетки-мишени с пом. секретируемых продуктов и при непосредст-

их презентация на клеточн. мембране-даёт воз-ть для запуска иммунного ответа. венном контакте, вызывая СКЦ, АЗКЦ (СКЦ – спонтанная клеточная цитотоксич-

Пример: макрофаги могут быть резервуаром для хронической инфекции (ВИЧ). ность, АЗКЦ – антиген зависимая клеточная цитотоксичность);

Виды специфичности АГ: 6.Регуляция иммунного ответа путем выработки цитокинов, простагландинов .

Видовая специфичность(среди животных одного вида).

Групповая специфичность(среди животных одного вида, пример: групповые

АГ микроорганизмов, в т.ч. сальмонеллы по общим соматическим О – АГ

объединяются в серологические группы).

Органная специфичность(т.е. специфичность тканей определённых орг-ов).

Тканевая специфичность.

Органоидная– любые органоиды имеют специфические АГ.

6.Дифференцировочные АГ– которые появляются на цитоплазматической мем-

бране клеток в процессе её дифференцировки (пример: субпопуляции лимф-тов).

Строение АГ.

высокомолекулярный носитель(белок или полисахарид)

низкомолекулярная антигенная детерминанта(эпитоп)

Линейный эпитоп – часть последовательности аминокислот белка – АГ. 11.Цитокины– растворимые пептидные медиаторы, синтезируемые различными

Конформационный эпитоп – образован за счёт третичной структуры белка. клетками орг-ма и играющие важную роль в обеспеч-ии физиологич. процессов в

При денатурации белка линейный эпитоп сохраняет свои АГ св-ва, а конфор- норме и в патологии.

мационный теряет своё АГ действие (пример: β – лактоглобулин сохраняет Сис-ма цитокинов: клетки продуценты, клетки мишени со специфич. рецептора-

АГ свойства молока после кипячения). ми, антагонисты цитокинов или их рецепторов.

Антигены:- тимус зависимые,- тимус независимые. Классиф-ция цитокинов.

Изменение АГ в тканях. В организм могут попадать различными путями. 1.интерлейкины (ИЛ- 1-18)-регулирующие пептиды, обеспечивающ. медиаторное

Эпитопы взаимод-ие в иммун. сис-ме и её связь с др. сис-ми орг-ма;

2.интерфероны (α, β, γ) – противовирусные агенты с выраженным иммунорегуля-

линейные

часть последовательности аминокис-т белка-антигена

конформационные

(образованы за счет

третичной стр-ры белка)

торным действием.

3.факторы некроза опухоли (ФНО (α, β)) – с цитотоксическим и иммунорегулятор

ным действием.

4.колонии стимулирующие факторы (КСФ) – стимуляторы роста и дифференци-

конформационный эпитоп ровки гемопоэтических клеток (ГМ КСФ, ГКСФ, МКСФ и др.).

5.хемокины– обеспечив. напр-ие движения лейкоцитов.

6.факторы роста, дифференцировочной и функциональной активности клеток

(факторы роста различных клеток и трансформирующий фактор роста – β).

денатурация Делят цитокины на противовоспалительные и провоспалительные.

линейный эпитоп Провоспалительные цитокины:ИЛ – 1, 6, 8, 12, ИФН (α, γ), ФНО – α, МИФ.

линейный эпитоп денатурированный антиген Противовоспалительные цитокины: ТФР – β, ИЛ – 4, 10, 13.

Иммуногенность – сп-ть антигена вызывать иммунный ответ. Основные характеристики действия цитокинов:1.плейотропность– 1 и тот

Специфичность – сп-ть антигена к специфическому взаимод-ию с антителами и же цитокин может действовать на различ. клетки мишени, регулируя их ф-цию.

Т - клеточными рецепторами. 2.избыточность действия– 1 и тот же цитокин вырабатывается несколькими

Химическая природа антигенов клетками орг-ма.3.цитокиновый каскад– работают по принципу сети, индуцируя,

Антигенами явл. органич. в-ва различ. происхожд-ия.По хим. природе антигены или ингибируя секрецию друг друга.4.синергизм / антагонизм– одновременное

-белки,полисахариды,липиды, и их соед-ия. В-ва с более сложной хим. стр-рой эффектам (синергисты ИЛ –1, 6,ФНО-α).5.модуляция рецепторов– цитокины

облад. более выс. иммуногенностью. Наиболее выраженными иммуногенными могут повысить или снизить экспрессию рецепторов для других цитокинов.

св-вами облад. белки. Одно и то же хим. в-во может быть высокоиммуногенным

для одних видов животных и неиммуногенным для других. Напр.,стрептококк

I типа вызыв. синтез антител у мышей, кошек, собак, человека, но не вызывает

образование антител у крыс, морских свинок, кроликов .

12.ИЛ-1 – (альфа и бета, продукты двух различных генов, ведущий бета). 13. ИЛ-2

Клетки-продуценты: практически все клетки, наибольшие титры получены из Это продукт активированных Т-клеток и его основное действие направлено

макрофагов, эндотелиоцитов. на Т-лимфоциты.

Индукторы продукции ИЛ-1: Важным активатором продукции являются гормоны тимуса.

Бактериальные продукты (ЛПС, мурамилдипептид, белок А), ИК, компоненты Биологическое действие ИЛ-2.

комплемента, цитокины (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-6, ФНО) и др. 1.ИЛ-2- ключевой фактор развития иммунного ответа и основной ростовой

Эндогенные ингибиторы продукции ИЛ-1: (ПГЕ2, ГКС, липокортин, фактор Т-лф. ( Антигенная активация Т-лимфоцитов ведет к экспрессии

гистамин, НПВП - аспирин). рецепторов ИЛ-2 его к продукции и, ИЛ-2 необходим для активации других

Биологическое действие ИЛ-1: клеток и дальнейшего и.о.)

Активация Т-лимфоцитов, усиление экспрессии рец. ИЛ-2. 2.ИЛ-2 стимулирует синтез и выработку других цитокинов (гамма-ИФН,

1.Стимулирует продукцию ФНО, ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-6, ПГЕ2, гистамина и др ФНО-бета)

2.Стимуляция фагоцитоза, адгезии, хемотаксиса, цитотоксичности фагоцитов, 3.активирует CD8+ лимфоциты

NK-клеток. 4.стимулирует пролиферацию NК – клеток и их трансформацию в ЛАК-клетки.

При повышении концентрации в крови, ИЛ-1 5.стимулирует пролиферацию и дифференцировку В-лф в плазматические

1.взаимодействует с клетками гипоталамуса и вызывает повышение температу- клетки.

ры тела (усиление продукции ПГЕ2, АКТГ, усиление метаболизма гликогена в 6.ИЛ-2 является макрофагактивирующим фактором (восстанавливает

печени – выброс тепла), сонливость, снижение аппетита, способность макрофагов представлять антиген, увеличивает продукцию

2.стимулирует клетки печени к продукции белков острой фазы (С-реактивного метаболитов кислородного взрыва, усиливает цитотоксичность).

белка и др.)

3.нейтрофилез периферической крови, снижение уровней Fe,Zn,Cu

4.вызывает резорбцию хрящевой и костной ткани

5.вызывает протеолиз мышц

6.токсичен для клеток островков Лангерганса поджелудочной железы.

7.токсичен для опухолевых клеток

При острых инфекциях септический процесс сопровождается повышением

ИЛ-1, что коррелирует с увеличением температуры.

14. ИЛ-3 15. ИЛ-6 относ-ся к провоспалит. цитокинам, усиливающим воспалител р-кции.

Основным источником ИЛ-3 является активированные Т-лимфоциты. Основной источник ИЛ-6: Тх2, макрофаги, нейтрофилы, фибробласты,

Биологическая активность ИЛ-3. эндотелиальные клетки.

1. стимулятор гемопоэза; действует в синергизме с эритропоэтином и КСФ Биологическое действие ИЛ-6

2. обладает радиопротективным действием (предотвращает гибель животных 1.Стимуляция продукции антител

от радиации) 2.индукция продукции белков острой фазы воспаления гепатоцитами;

3.усиливает цитотоксическую активность макрофагов. 3.индуцирует лихорадку.

4.оказывает стимулирующее влияние на пролиферацию стволовых клеток

костного мозга

16. ИЛ-4 17. ИЛ-5 - вырабатывается активированными Тх2 и тучными клетками.

Осн. продуценты: Т- х2, для кот. ИЛ-4 служит аутокринным фактором роста. Биологические эффекты.Биологические эффекты.

1.Активация пролиферации В-лф., действует в синергизме с ИЛ-5,6, 1.ИЛ-5 - фактор пролиферации и созревания В-лимфоцитов в а

стимулирует продукцию IgE (при аллергии повышение уровня ИЛ-4). нтителопродуцирующие клетки.

2.является противовоспалительным цитокином: ингибирует продукцию ИЛ-1, 2.ИЛ-5 - усиливает активацию, пролиферацию и созревание

ПГ макрофагами, ИЛ-2-зависимую пролиферацию Т-лф. и др. эозинофилов (ИЛ-5 вызывает эозинофилию при гельминтозах.)

3.усиливает экспрессию молекул адгезии, ГКГС на поверхности клеток

4.способствует развитию Тх0 в Тх2

5.тормозит образование ЛАК-клеток

19. Факторы некроза опухоли 18. ИЛ-8является продуктом активированных макрофагов и относится к

Различ. ФНО-альфа и ФНО-бета или лимфотаксин. ФНО-альфа синтезируется ма- медиаторам-хемокинам.

крофагами, ФНО-бета – Тх и НК-клетками. В норме продукция ФНО наход. на

низком уровне. Однако кол-во его резко измен-ся при попадании в орг-м микро-

бных антигенов (грам-отрицательных бактерий, напр. ЛПС). За несколько минут

и часов содерж-ие ФНО в биологич. жид-тях орг-ма может возрастать в сотни и

тысячи раз. Многие эффекты ФНО усилив-ся под действием гамма-ИФН и других

цитокинов.

Биологические эффекты ФНО делят на системные и локальные.

Локальное действие ФНО:

1.расширение сосудов, отек, гиперемия

2.усиление адгезии нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов к эндотелию сосудов

3.активация фагоцитов, Т, В-лф., НК-клеток

4.стимуляция продукции ИЛ-1,6,ФНО

При значительном локальном повышении уровня ФНО, повышается его концен-

трация в крови, где он оказывает системное действие.

Системные эффекты ФНО:

1.пирогенное действие (аналогично ИЛ-1)

2.индукция синтеза острофазовых белков

3.активация системы свертывания крови

4.повышение в крови уровней ИЛ-1,6

5.нейтрофилез

6.угнетение гемопоэза

7.резорбция кости и хряща

8.противоопухолевый эффект

9.развитие кахексии.

Кахексия – истощение мышц и жировых клеток. (ФНО блокируя фермент

липопротеинлипазу (ЛПЛ) препятствует усвоению жирных кислот и

накоплению липидов в адипоцитах).

21 вопрос .HLA – система – сис-ма генов и кодируемых ими антигенов, 20. Интерфероны

участвующих в ряде биологич. процессов: Известно 3 типа интерферонов: ИФН-альфа (лейкоцитарный), ИФН-бета

-распознавание своего и чужого (противоопухолевый, противоинфекционный, (фибробластный), ИФН-гамма (лимфоцитарный или иммунный).

трансплантационный иммунитет) ИФН-альфа и ИФН-бетаингибируют пролиферацию клеток, облад. противо-

-обеспечение межклеточных взаимодействий вирусной актив-тью, усиливают цитотоксичность НК-клеток и ЦТЛ, усиливают

-генетический контроль иммунного ответа экспрессию молекул ГКГС 1 и 2 классов на пов-ти инфицированных клеток.

-генетич. контроль акт-ти сис-мы комплемента и др. сис-м (регуляция специфи- ИФН-гамма обладает иммунорегуляторным, противовирусным и а

ческого и неспецифического иммунного ответа) нтипролиферативным действием :

-обеспечение предрасположенности к различным заболев-ям (онкологические, -активирует фагоциты, НК-клетки

аутоиммунные, и др.; считают, что связано со многими заболев-ями). -ингибирует пролиферацию Тх2, продукцию IgE.

Основные особенности HLA. -вызывает дифференцировку Тх0 в Тх1

1Крайне выраженный полиморфизм (около 700 аллельных вариантов). -усиливает экспрессию молекул ГКГС 1 и 2 классов на пов-ти различных клеток.

2HLA АГ обеспечив. взаимод-ие всех клеток орг-ма, и клеток иммун. сис-мы.

Строение. Комплекс HLA генов локализуется на коротком плече 6й аутосомной

хромосомы, справа от центромеры, между геном, кодирующим гипоксалазу и

мочевой пепсиноген 5, заним. примерно две сантиморганиды. В её пределах

могут размещаться около 10⁵– 10⁶генов.

Гены кодирующие HLA. - Выделяют 4 класса:

1.А, В, С…

Е, F,Hи др. – функция в настоящее время не установлена.

2.структуры Dобласти

субклонусы D,DR,DQ,DP

...DN,DO– открыты недавно, функция не установлена.

3.кодируют компоненты комплемента

С2, С4а, С4b,BF(пропердиновый фактор)

А так же гены кодирующие цитокины ФНО - α и ФНО – β

Ферменты, участвующие в образовании гормонов

4.– активно изучаются

условно отнесены гены, связь которых с HLA сис-мой нуждается в доказ-ве.

22.Иммунный ответ. Известны 2 формы специфического иммунного реагиро-Т – лимфоциты способнысвязывать и представлять растворимые АГ.

вания: клеточный тип иммунного ответа, осуществляемый Т-системой Презентация АГнаход-ся под строгим контролем цитокинов

иммунитета, и гуморальный тип иммунного ответа, кот. обеспеч-ся В-сис-мой (ИЛ -1, 6, ФНО – α, ГМ-КСФ; самый мощный стимулятор γ – ИФН, кот.

иммунитета.. усиливает экспрессию HLA I, II классов на пов-ти антиген представляющих клеток).

- Тимус зависимый гуморальный иммунный ответ. Следующий этап иммунного ответа -взаимод-ие антиген представляющей

- Тимуснезависимый гуморальный иммунный ответ. клетки с Т – лимфоцитом и распознавание АГ, что приводит к активации,

Клеточный иммунный ответ включает след. осн. р-ции: пролиферации и дальнейшей дифференцировке.

1. Гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). После проникновения АГ в лимфатич. узелочень быстро происход. его

2.Р-ции цитотоксических Т-лимфоцитов (или цитотоксический ответ) улавливание лимфоцитами.

3. Р-ции трансплантационного иммунитета (отторжения трансплантата, хозяин Лимфоциты способныреагировать с данным АГ, чему способствует усиление

против трансплантата, трансплантат против хозяина) интенсивности кровотока, так же усиливающего скорость рециркуляции

Р-ции трансплантационного иммунитетавключ. отторжение трансплантат лимфоцитов. С другой стороны прекращение оттока лимфоцитов, имеющих

а в следствии РТПХ (реакция трансплантат против хозяина) и РХПТ (реакция специфические рецепторы для данного АГ.

хозяин против трансплантата). Контакт клеток осущ.при уч-ии адгезивных молекул – адгезия Т – лимфоцитов

Запуск специфического иммунного ответаосущ-ся АГ, поступившим в орг-м к антиген представляющим клеткам.

через барьерные ткани, контактирующие с внеш. средой (кожа и слизистые) и Реализация – выбор дифференцировки CD 4+ (наивных клеток) в сторону Тх1

если не уничтожается неспецифическими факторами защиты. или Тх2, т.е. выбор между гуморальным Т зависимым иммунным ответом и

По средствам хемокинов в очаг устремляются фагоциты (нейтрофилы, клеточным иммунным ответом.

макрофаги) из циркулирующей крови.

Фагоцитоз осуществляется клетками– «мусорщиками» имеющими Р –

рецепторы и не облад. специфичностью к объектам фагоцитоза.

Макрофаги фагоцитирующие АГв месте его проникновения не играют

важной роли в его определение и запуске Т иммунного ответа, т.к. не

возвращ-ся в лимфатич. органы и слишком эффективно осущ-ют расщепление

АГ, до очень малых фрагментов, не запуская специфического звена.

АГ с током крови, лимфы или др. жид-тиот места проникн-ия заносится в

регионарные лимфатич. органы, где его захватывают, перерабатывают и п

редставляют антигенные пептиды (осуществляют обработку АГ) – этот процесс

протекает в комплексе с HLA I и II класса.

Макрофаги способныосуществлять процессинг и презентацию

корпускулярных АГ.

23. тимусзависимые-Индуцируют оптимальный иммунн. ответ В-кл. с уч-ем Тх. 25. Патология в системе гуморального иммунитета.

Для иммунного ответа, кроме Тх требуется кооперационное участие макрофагов. 1.Врожденная недостат-ть В-лимфоцитов (синдром Брутона, селективный дефи-

Тимуснезависимые-Индуцируют оптимальный иммунный ответ В-кл. без уч-ия цит IgA, гипогаммаглобулинемия и др.).

Тх и макрофагов. 2.Злокачественная трансформация и неконтролируемая пролиферация

Запуск специфического иммунного ответа осущ. антигеном, кот. поступая в орг-м В-клеток с возникнов-ем лейкозов, лимфом, миеломатозов (пролиферация клона

через барьерные ткани, контактирующие с внеш. средой (слизис. оболочки, дыха- плазматических клеток в костном мозге, секреция моноклональных Ig).

тельного, урогенитального, пищеварительного трактов, кожу), не уничтож-ся фа 3.Инфицирование В-клеток (вирус Эпштейна-Барра, инфекционный моноцитоз,

кторами неспецифической резистентности. Клетки, циркулирующие в крови, спо- СПИД).

собны к активной миграции в ткани, и в зону поступления антигена, посредством 4.Активация В-лимфоцитов (аутоиммунные заболевания).

хемокинов, устремляется целый поток нейтрофилов, моноцитов, здесь же накапли 5.Активация IgE синтезирующих клонов В-лимфоцитов (аллергич.е заболевания).

ваются макрофаги. Фагоцитоз аг осущ. клетками-«мусорщиками», кот. не облад. 6.Вторичные иммунодефициты гуморального звена.

специфичностью к объекту фагоцитоза. Макрофаги не мигрируют в лимфоидные

органы, они расщепляют аг до слишком мелких фрагментов. Антиген с током

крови, лимфы или тканевой жид-ти от места проникновения в орг-м заносится в

региональный лимфоидный орган. Антигенпрезентирующие клетки (макрофаги,

В-лимф-ты, дендритные клетки) захватывают, перерабатывают и представляют

антигенные пептиды (т.е. осуществляют обработку аг)в комплексе с м-лами 1 или

2 класса ГКГС на своей пов-ти. Макрофаги способны осущ-ть процессинг и пре-

зентацию корпускулярных антигенов. В-лф посредством антигенраспознающего

комплекса, включающего BCR-рецептор, способны связывать и представлять

растворимые м-лы. Эффективность процессинга и презентации аг АПК наход. по

контролем ряда цитокинов: ИЛ-1, ФНО-альфа, ИЛ-6, ГМ-КСФ, самым мощным

стимулятором макрофагов явл. гамма-ИФН, который усиливает экспрессию аг

ГКГС 1 и 2 класса на пов-ти АПК.

Следующим этапом в развитии иммунного ответа явл. взаимод-ие АПК с Т-лимфо

цитом и распознавание антигена, что приводит к активации клеток, пролиферации

и дифференцировке лимфоцитов. После проникновения аг в лимфатический узел

происход. улавливание лимфоцитов, способных специфически реагировать с дан-

ным аг. Этому способствует усиление интенсивности кровотока через лимфатич.

узел и рециркуляции через него лимфоцитов,прекращение оттока из органа лимфо 26. Патология в системе Т-клеточного иммунитета:врожденная недостат-ть

цитов, несущих специфические рецепторы для данного антигена.Контакт между Т-лимфоцитов (первичный ИД - ТКИН, синдром Ди-Джорджи, синдром

взаимодействующими клетками осущ. при активном уч-ии адгезивных м-л. Реша- атаксии-телеангиоэктазии и др); инфицирование Тлф вирусом ВИЧ, острого лим-

ющим моментом в реализации специфического иммунного ответа явл. выбор пу- фолейкоза взрослых; Т-клеточные иммунопролиферативные заболевания (вариа-

ти дифференцировки CD4+-клеток в направлении Тх1 или Тх2, т.е. выбор между нты острого лимфолейкоза, Т-клеточные лимфомы); врожденные и приобретен-

гуморальным и клеточным ответом. Природа антигена и определенный набор ци ные дефекты Т-клеточного антигенраспознающего рецепторного комплекса или

токинов регулируют направление дифференцировки наивных Т-х0. Этапы актива его отдельных субъединиц, адгезивных м-л, дефектность мех-мов “обучения”

ции, пролиферации и дифференцировки клеток тесно взаимосвязаны. Для актива Т-лф в тимусе (блок позитивной и/или негативной селекции тимических лф);

ции Тх0 нужно 3 сигнала:1 сигнал: аг процессированный и презентированный на нарушение соотношения регуляторных Т-лимфоцитов (CD4 и CD8), субпопуля-

пов-ти АПК в комплексе с м-лами ГКГС 2 класса.CD4+ клетки осущ. двойное рас ций с превышением ф-ции хелперно-индуцирующих клеток-аутоиммунная

познавание аг: TCRв комплексе сCD3 распознает сам антиген, аCD4- аг ГКГС и аллергическая направлен-ть или иммунодефицитная направленность иммуно-

2 класса. Однако полноценная активация Т-х наблюд-ся только при взаимод-ии патологии; приобретенные тимусзависимые ИДС (удаление тимуса, поражение

CD28 Т-лимфоцита иCD80/86 АПК, обеспечивающим синтез ИЛ-2 (2 сигнал). Т-клеток физическими, фармакологическими и др. методами, опухоли, наруше-

Для включения 3 сигнала активации Т-х, необходима дополнит. активация АПК, ние питания, инфекции, возрастн. изменения); преактивация Т-лимфоцитов

кот. происх. при взаимод-ии CD40-рецептора АПК иCD40LCD4+-клетки. in vivo (факторы микроорг-мов, аутоантитела против структур Т-клеток, фарма

В рез-те активации макрофагов возраст. выработка ИЛ-1,6,10,12,ФНО, хемокинов, кологические средства и др.) с развитием аутоиммунных процессов, повышен-

активных форм кис-да. Вирусы, внутриклеточ. паразиты активируют макрофаги к ной продукцией ЦК, актив. мф - усиление воспалительных, деструктивных проце

выработке ИЛ-12, а аллергены, внеклеточные паразиты, некоторые бактерии акти ссов).IPEX-синдром (Immunedysregulation,polyendocrinopathy,enteropathy,

вируют в макрофаге синтез ИЛ-1.В В-лимфоцитах связывание м-л CD40 иCD40LX-linkedsyndrome) – синдром дисрегуляции иммунитета, полиэндокринопатии,

вызыв. переключение изотопов иммуноглобулинов в ответ на тимусзависимые ан энтеропатии, сцепленный с Х-хромосомой. Рецессивное заболевание, вызванное

тигены. 3 сигналом для активации Тх0 служит ИЛ-1 или ИЛ-12, вырабатываемые мутациями гена FOXP3 (миссенс-мутации, мутации стоп-кодона). Заболевание на

АПК. Продукция цитокина ИЛ-12 индуцирует синтез гамма-интерферона Тх0 и чин-ся в раннем возрасте и харак-ся полиорганной аутоиммунной патологией (са-

дифференцировку их в Тх1, кот. начин. секретировать цитокины (ИЛ-2,3, харный диабет I типа, аутоиммунный тиреоидит, тяжелая энтеропатия), кахексией,

гамма-ИФН, ФНО-β), регулирующие развитие ГЗТ и цитотоксических р-ций. низкорослостью, аллергическими проявлениями (экзема, пищевая аллергия, эози-

Синтез ИЛ-1 индуцирует продукцию ИЛ-4, кот. обеспечив. дифференцировку Тх0 нофилия, увеличение уровня IgE), гематологическими нарушениями (гемолитичес

в Тх2. Активированные Тх2 вырабатывают цитокины (ИЛ-4,5,6,13 и др.), опреде- кая анемия, тромбоцитопения) с выс. уровнем аутоантител и массивной Т-клеточ

ляющие пролиферацию В-лимф-тов и их дальнейшую дифференцировку. ИФН-γ ной инфильтрацией кожи и пищеварительного тракта. Больные дети (мальчики)

негативно регулирует функцию Тх2 и, наоборот, ИЛ-4,10, секретируемые Тх2, гибнут в течение 1-го года жизни от инфекционных заболеваний.

угнетают ф-цию Тх1.

Т.о., рез-том кооперации Тх - АПК, явл. взаимная активация этих клеток и вырабо 28.Антителозависимая клеточная цитотоксичность (АЗКЦ).

тка ими цитокинов, определяющих дальнейшее развитие иммунного ответа, а име Основная роль принадлежит К – клеткам, хотя возможно

нно, пролиферацию и дифференцировку лимфоцитов. участие нейтрофилов, эозинофилов, макрофагов.

Особая роль в этом процессе принадлежит ИЛ-2. Т-лимфоциты начинают синтези В АЗКЦ участвуют три основных компонента: киллерная клетка,

ровать ИЛ-2 и одновременно экспрессировать на клеточной пов-ти его рецепторы. клетка мишень , АТ специфические к АГ клетки-мишени(в основном

Это обеспечивает быстрое размножение и дифференцировку антиген-специфичес- Ig G, реже Ig М).

ких клонов Т-лимфоцитов. В роли клетки-мишени выступают собственные клетки орг-ма,

В настоящее время общепризнанной считается система трехкомпонентной коопера изменённые в АГ отношении.

ции иммуноцитов в иммуннном ответе.Это касается гуморального иммун. ответа Причины приобретения АГ свойств:

на тимусзависимые антигены, кот. обеспеч-ся макрофагами, Тх и В-лимфоцитами. 1Вирусы, хим.в-ва,лекарственные препараты, ферменты, бактери-

Гуморальный иммун. ответ может развив-ся и на тимуснезависимые антигены. альные токсины могут изменять АГ структуру клеточных мембран.

Эти антигены в своей стр-ре имеют повторяющиеся гомологичные эпитопы, кот. 2 За счёт конформационных изменений присущих клетке АГ.

образ. перекрестные сшивки с поверхностными иммуноглобулинами В-лимфоци 3 За счёт повреждения мембраны и появления новых АГ.

тов и включают В-лимфоциты в процесс пролиферации и дифференцировки до 4 Образ-я комплексных АГ с мембраной клетки. Хим.вещества могут

зрелых антителопродуцентов. выступать в роли гаптенов.

После приобретения клеткой АГ свойств на эти АГ образуются Ig G.

Ig G Fabфрагментом может связывать до двух молекул.

Fcрецептор может связываться с клеткой киллером

В результате обеспечивается более полноценный и быстрый лизис клетки.

Важная роль этих процессов в патогене

- аутоиммунных заболеваний

(гомологическая анемия, тромбоцитопения и др.)

- патогенез онкопроцессов.

- отторжение трансплантата.

24. Клеточный иммунный ответвключ. след. осн. р-ции: 29.Цитолитическое действие NК-клеток.NК-клетки осущ. контактный цитолиз

1. Гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). пораженных вирусом клеток, опухолевых клеток, а также др. чужеродных клеток,

2.Р-ции цитотоксических Т-лимфоцитов (или цитотоксический ответ) попавших в орг-м при переливании крови, трансплантации органов. Уникальность

3.Р-ции трансплантационного иммунитета (отторжения трансплантата, хозяин NК-клеток сост. в том, что их литическая акт-ть против клеток-мишеней проявля-

против трансплантата, трансплантат против хозяина) ется при первичном контакте без предварительной сенсибилизаци, кот. треб-ся

Р-ции цитотоксических Т-лимфоцитов или цитотоксический ответ. ЦТЛ. МишенямиNК-клеток явл. клетки, утратившие м-лы ГКГС 1 класса.NК

При вирусной инфекции, опухолевом росте, отторжении трансплантата основны- распознают на пов-ти мишеней углеводные компоненты -сахара, кот. на обычных

ми эффекторными клетками явл. цитотоксические Т-лимфоциты (CD8+-клетки). клетках связаны сиаловыми кис-тами. Контакт с клеткой-мишенью приводит к

Этапы их функционир-ия включ. активацию, пролиферацию и дифференцировку включению программированного лизиса. Наличие цитокинов, продуцируемых

их предшественников до зрелых эффекторов. NК-клетками и Т-лимфоцитами (ИЛ-1, 2, 12, ИФН, ФНО и др.) приводит к усиле-

Процесс образ-ия ЦТЛ из наивных предшественников, покинувших тимус, осу- нию цитотоксического действия натуральных киллеров. Так, напр., ИЛ-2, активи-

ществляется под действием двух сигналов. рованные NК-клетки – ЛАК-клетки, облад. более выраженным цитотоксическим

1 сигнал - аг, представленный на пов-ти АПК или клетках-мишенях, кот. пЦТЛ действием и способны вызывать лизис опухолевых клеток, на пов-ти которых при

распознает в комплексе с антигенами ГКГС 1 класса (эффект двойного распозна- сутствуют аг 1 класса МНС.Для выявления и подсчета NК-клеток исп. МКА анти

вания). При этом происходит экспрессия костимулирующей молекулы CD28 наCD16,CD56.Функциональную акт-тьNК-клеток опр. в цитотоксическом тесте с

ЦТЛ и активация синтеза ИЛ-2, который служит 2 сигналом активации ПЦТЛ и использ-ем спец. клеток-мишеней, чувствительных к литическому действию

стимулирует их пролиферацию. NК-клеток (клетки опухолевой линии К-562).

Стадии иммунного ответа Цитолитическое действие макрофагов. Макрофаги могут вызывать гибель

Стадии иммунного ответа	Клетки, участвующие в развитии стадии	Иммунологические процессы
Индукции (афферентная	МФ, дендритные клетки, В лимфоциты	Процессинг и презентация антигена
Иммунорегуляторная стадия	АПК, Т-лф	Активация и взаимодействие иммунорегуляторных клеток, пролиферация и дифференцировка Тх0 в Тх1,2
Эффекторная стадия	ЦТЛ, Т-эффекторы ГЗТ,плазматические клетки	Развитие эффекторных реакций клеточного иммунитета Антителообразование
Иммунологическая память	Т и В-клетки памяти	Накопление клеток памяти

клеток-мишеней путем некроза или апоптоза посредством внеклеточного, внут-

риклеточного или контактного цитолиза. Внутриклеточный цитолиз – обеспеч-ся

фагоцитозом и завис. от эффективности работы сис-м бактерицидности, а также

от активирующих макрофаг сигналов, в первую очередь цитокиновых.

Возбудители некоторых инфекций (туберкулеза, лепры, чумы) использ.

макрофаги как «среду обитания». Они недоступны для антител и ЦТЛ.

Единственный способ борьбы с внутриклеточными патогенами – усиление лизо-

сомальной акт-ти самих макрофагов. Помощь в стимуляции такой акт-ти исходит

от Тх1 в р-циях ГЗТ, когда они после взаимод-ия с макрофагами начинают актив

но секретировать гамма-ИФН и ФНО-альфа.

Внеклеточный цитолиз осущ-ся секретируемыми макрофагами бактерицидны-

ми продуктами (цитокинами, активными метаболитами кислорода, лизосомаль-

ными ферментами ) и при контакте с клетками-мишенями, связанными с опсони-

нами, компонентами комплемента.

Одним из ведущих мех-мов удаления из орг-ма внеклеточных патогенов явл. фаго

цитоз. Макрофаги – гл. участники внутриклеточного разрушения патогена, име-

ют на своей пов-ти рецепторы к Fc-фрагменту иммуноглобулинов. Патоген,

связавшийся со специфическим антителом, оказыв-ся более доступным для

Зрелые ЦТЛ осуществляют цитотоксическое действие на клетки-мишени фагоцитирующих клеток, вследствие взаимод-ияFc-фрагмента иммуноглобули-

двумя способами, вызывая либо некроз, либо апоптоз. на сFc-рецептором на пов-ти фагоцита. Процесс усиления фагоцитоза гумораль-

Следующей формой клеточного иммунного ответа явл. р-ция гиперчувст-ти за ными факторами-опсонинами, наз. опсонизацией.

медленного типа (ГЗТ). Это самая медленная форма клеточного иммунн. ответа

развив-ся на антигены, обладающие слабыми иммуногенными св-вами. Извест-

ным проявлением ГЗТ служ. туберкулезная р-ция - ответ сенсибилизированного

орг-ма на локальное введение туберкулина. Р-ция локального воспаления раз-

вив-ся не только на бациллы туберкулеза, но и на широкий набор бактерий, виру-

сов, грибков, кот. локализуются в фаголизосомах макрофагов, где они недоступ-

ны для действия как антител, так и ЦТЛ. Процессы сенсибилизации при первич-

ном введении антигена в интактный орг-м осущ. обычным путем, в рез-те чего

формир-ся Тх1 (Тгзт)-сенсибилизированные лимфоциты. При повторной встрече

с тем же антигеном зрелые Тх1 вступают в р-цию распознавания дантигена,

причем р-ция развив-ся не сразу, а через 24-48 часов (отсюда ее название).

Резул-том распознавания явл. активная продукция Тх1 хемотаксических факторов,

привлекающих в зону проникновения антигена макрофаги и другие клетки

воспаления из кровотока. Тх1 выделяют полный коктейль цитокинов, причем

для реализации ГЗТ наиболее важен гамма-ИФН, лимфотаксин, МИФ – фактор

ингибирующий миграцию макрофагов, благодаря котор. происход. аккумуляция

макрофагов в зоне воспаления. Кооперация цитокинов вызыв. сильную актива-

цию макрофагов и стимулирует их сп-ть убивать внутриклеточные микроорг-мы.

27 Цитотоксические реакции иммунитета 30. Заболевания , в патогенезе которых цтр играют ведущую роль

ЦРИ участвуют в обеспечении полноценного иммунного ответа, а так же и при

патогенезе ряда заболеваний:

- аутоиммунные процессы

Антигенспецифические Антигеннеспецифические - аллергические

- онкологические

- инфекционные (в первую очередь вирусы, грибы, некоторые бактерии

Клеточно-опосредованные р-ии Гуморальный цитолиз (ГЦ) и паразиты)

(клеточно-опосредованный цитолиз) (КОЦ) - трансплантационные реакции.

внеклеточный внутриклеточный контактный антитело- комплимент-

ЦТЛ, НК, МФ, ГЦ, К-клетки зависимый зависимый

Типы: Цитолитическое действие ЦТЛ,

Цитолитическое действие NК-клеток.

Цитолитическое действие макрофагов

Комплементопосредованный цитолиз.

Киллерной активностью обладают и гранулоциты.

Антителозависимая клеточная цитотоксичность.

ЦРИ участвуют в обеспечении полноценного иммунного ответа,

а так же и при патогенезе ряда заболеваний:

- аутоиммунные процессы

- аллергические

- онкологические

- инфекционные (вирусы, грибы, некоторые бактерии и паразиты)

32. Первый критический период постнатального развития ребёнка. 31.Особенности иммунной системы у детей.

1. сразу после рождения и первые 28 дней. Когда орг-м сталкивается с огромным В норме здоровый доношенный ребенок имеет особое, отличное от взрослого сос-

кол-вом АГ. Иммунные р-ции носят выраженную супрессорную направленность- тояние иммунной сис-мы, являющееся биологически целесообразным: из сте-

биологический смысл-предупреждение тяжёлой (фатальной) иммунокомплексной рильных условий внутриутробного развития ребенок совершает переход в мир,

патологии, кот. может возникнуть при встрече с огромным кол-вом АГ. где на него с первой секунды и даже уже в родах обрушивается огромное кол-во

А). первая неделя- период адоптации. Происх. перекрёст в ф-ле элементов белой антигенов (вирусной, бактериальной, грибковой природы). Состояние ИС здоро-

крови на 4 - 7 день после рождения (первый перекрёст). Нейтрофилёз сменяется вого доношенного новорожденного не явл. иммунодефицитным. Наряду со сни-

лимфоцитозом и сохраняется до 5 -6 лет. Кол-во клеток значительно превышает жением некоторых показателей иммунитета (ИФН-γ) имеет место повышение

нормы для взрослых, причём преобладают Т-хелперы, что свидетельствует и объ- ряда параметров (продукция ИЛ-1 моноцитами и МФ, ИЛ-2 и др.), кот. сопоста-

ясняет супрессорную ф-цию, особенно первые 28 дней, кроме CD 8+ так же актив вимы с показателями взрослого чел-ка.

ны и CD 45 RA - индукторы супрессорной акт-ти, и CD 4+, CD 8+ - дубль поло- Если ребенок имел пренатальную патологию, в т.ч. инфекции, поражения нерв-

жительные клетки. В этот период все Т-лимфоциты несут CD 1+ - маркер незре- ной сис-мы, то в кровь могут поступать эндогенные аг забарьерных органов,

лых лимфоцитов.Сохраняется продукция некоторых противовоспалительных ци- что может привести к развитию аутоиммунных р-ций. Если бы на каждый из

токинов, в частности трансформирующий фактор роста - β. Уровень ИЛ - 4 на аг у новорожденного ребенка формировался нормальный иммунный ответ по

протяжении 1 месяца снижен, а к началу 2 месяца достигает уровня взрослых. взрослому типу, то это бы привело к развитию запредельных, гиперэргичес-

Про- и противовоспалительные цитокины сохраняют баланс: ких реакций и к гибели ребенка. Иммунные р-ции новорожденного ребенка

β - ИФН – снижен ИЛ -1, ФНО - может быть, как повышен, так и понижен. имеют супрессорную направленность, что позволяет сдерживать чрезмерный

Если показатель значительно превышен, то это свидетельствует об угрозе какой- иммунный ответ и постепенно формировать нормальный (нормэргический)

либо патологии (часто инфекционного характера). иммунный ответ.

Б). 1 месяц- снижена цитотоксичность лимфоцитов, снижена функциональная

акт-ть ЕК клеток, нейтрофилов, макрофагов. Акт-ть компонентов комплемента

ниже таковой у взрослых в 2 раза.В-лимфоциты хар-ся незрелостью, преобладают

типа sIgM+ (поверхностный IgM) для взрослых характерен поверхностный IgD.

Функционально не активны. Образовывать плазматические клетки способен кажд-

ый 5 лимфоцит. Гуморальный иммунный ответ обусловлен материнскими Ig попа-

дающими пассивно. Период полураспада материнских АТ - 21 дня, и 3 недели

ребёнок защищён от бактериальных и вирусных возбудителей. Патологические

процессы: склонны к гнойным заболев-ям (поражаются пупочная ранка и кожные

покровы), повышенная склонность к генерализации воспалительных процессов.

33. Второйкритический период постнатального развития ребёнка. 34. Третийкритический период постнатального развития ребёнка.

3 -6 месяц развития ребёнка- ослабевает пассивный гуморальный иммунитет.2 год жизни- резко повыш-ся АГ нагрузка т.к. ребёнок начинает активно двига-

Супрессорная направленность иммунных р-ций сохраняется. На больш-во АГ ться и общаться.

формир-ся первичный иммунный ответ (синтезируется Ig М, но не формир-ся Супрессорная направленность иммунных р-ций сменяется хелперной направлен-

иммунологическая память) в рез-те вакцинация может вообще не повлечь имму- ностью в связи с созреванием Т-хелперов, повыш-ся чувствит-ть Т и В лимфоци-

нного ответа, если в крови циркулируют материнские АГ или применялись тов к цитокинам. К некоторым АГ сохраняется первичный иммунный ответ (по-

препараты крови. Если в этот период производят вакцинацию, то для эффектив- лючение синтеза Ig М на Ig G: синтезируются Ig G1 и Ig G3, синтез Ig G2 и Ig G4

ного формирования иммунной памяти необходима последующая ревакцинация. -недостаточен. Сис-ма местного иммунитета остаётся не развитой, как следствие,

Высока чувствительность к ОРЗ, ОРВ, парагриппу, ретровирусам, грибам. дети чувствительны к вирусным и бактериальным инфекциям лорорганов и орга-

Высока частота пищевых аллергий. В период 3 - 6 месяцев местные защитные нов дыхания, могут впервые появляться стёртые формы иммунодефицитов, ауто-

р-ции иммунитета недостаточно развиты, что обеспечивает частоту ОРВ, иммунных и иммунокомплексных заболеваний. Становятся, выражены проявле-

кишечных инфекций, дисбактериозов. Могут атипично протекать: корь, ния аллергических заболев-ий в связи с тем, что Т-хелперная сис-ма выходит из

коклюш и так же обычно не оставляют иммунитета. - под контроля. Большая часть детей этого возраста не готова к условиям

пребывания в детских коллективах.

36. Пятыйкритический период постнатального развития ребёнка. 35. Четвёртый критический период постнатального развития ребёнка.

Подростковый возраст. (У девушек 12 - 13 лет, у юношей 14 - 15 лет) – пубер-4 - 6 лет жизни– наблюд-ся второй перекрест в ф-ле форменных элементов

татный скачёк сочетается с уменьшением массы лимфоидных органов, половые крови, она становится идентичной ф-ле для взрослых.

гормоны влияют и на иммунные р-ции. У девушек наиболее выражено влияние Содержание Ig М и Ig G приближается к таковому содержанию у взрослых, а

на В-клетки, на HLA DR+ клетки. У юношей наиболее выражено влияние на величина Ig А ниже чем у взрослых. Характерен пик Ig Е, в рез-те наблюд-ся

соотношение Т-хелперы / Т-супрессоры. Тяжесть аллергических р-ций может наивысшее развитие аллергических заболев-ий, высока частота паразитарно –

значительно снижаться в рез-те снижения синтеза Ig Е, у девушек наблюд-ся глистных инвазий.

выравнивание соотношения Т-хелперов / Т-супрессоров, у юношей вследствие Возможно формирование патологии почек, печени, ЖКТ, иммунодефицитов,

влияния на гуморальное звено.Окончательно формируется сила и продолжите- хронических заболеваний при недолечивании.

льность иммунного ответа (сильный или слабый).В связи с ростом влияния

вредных экзогенных факторов может сформироваться резкий подъём хрониче-

ских и воспалительных заболев-ий, аутоиммунных, лимфопролиферативным,

вирусно - половым, повыш-ся чувствит-ть к микобактериям туберкулёза.

38. Характеристика антигенов крови. 37. Характеристика иммунной системы при старении.

АГ по химической природе:- полисахаридные (АВО, Н, Р. и др.);- белковые (Rh и Процесс старения– рез-т толерантности к собственным стр-рам и появления кло-

др.).Некоторые АГ присутствуют только на поверхности эритроцитов, другие нов способных реагировать с собственными тканями. /Бернет/.

могут встречаться и на клетках других тканей. Иммунные процессы старения и связь с аутоиммунными процессами.

Группы крови: Нарушение ф-ции тимуса и его полная инволюция (генетически обусловлена),

1.трансмембранные транспортёры(сис-ма колтон – аквапорины (транспорт во- считается причиной развития аутоиммунных процессов.

ды), кидд – переносчик мочевины); Наблюд-ся возрастающие изменения ИКК, появление мутантных клеток, сниж-ие

2.рецепторы для экзогенных лигандам и микроорг-мам(внутрь эритроцитов сп-ти распознавать своё / чужое, развитие аутоиммунных р-ций.

проникают только малярийные паразиты и парвовирус В19, для других служат Уменьшение числа Т-клеток, и снижение их акт-ти приводя к повышению

только как транспортёры к другим клеткам); чувствит-ти к инфекциям.

3.рецепторы и м-лы клеточной адгезии. Благодаря ним эритроциты могут сор-Причины старения:

бировать некоторые цитокины из кровотока; 1. соматические мутации, ведущие к гибели клеток;

4.ферменты (АГ системы келл и др.) – функциональное зн-ие не определено. 2. теория свободных радикалов, активация процессов окисления;

5.структурные белки(АГ сис-мыMNS, Гербих – по стр-ре – гликофорины, содер 3. теория накопления генетических ошибок, прогрессирующих с возрастов, как

жащие большое кол-во сиаловых кис-т, обеспечив. отрицательн. заряд мембраны). следствие, нарушение транскрипто - ядерной регуляции.

В трансфузиологии наибольшее зн-ие имеют сис-мы АВО и Rh. 4. Теория стресса Селье.

В рамках сис-мы АВО выдел. 4 группы крови, обусловленные эритроцитарными 2 стадии процессов старения - первичные и вторичные компоненты старения.

АГ А и В и естественными АТ α и β. 1. хронологическая хар-ка генетического снижения иммунной ф-ции (время

Сущ. несколько эритроцитарных АГ: инволюции тимуса).

- АГ АВО 2. условия окруж. среды, заболев-ия чел-ка, инфекции и т.д.

АГ А: - А₁, А₂, А₃, А₄, Ах и др. В Т-лимфоцитах пожилых людей отстаёт процесс транскрипции генов

АГ В: - В₁, В₂. Вх, В₃ и др. управляющих пролиферацией клеток.

Иммунные АТ могут образов-ся при гемотрансфузии и создают определённые Старение проявл-ся в виде 2 процессов: иммунологическая недостаточность и а

трудности при выяснении группы крови. Их обнаружение происх. во время оп- утоиммунные р-ции иммунитета, могут быть Т и В зависимы.

ред-ия индивидуальной совместимости, а так же производят специальными Снижается кол-во и функциональная акт-ть Т клеток, особенно CD 8+ у юношей

моноклональными АТ – хар-ся достаточной стабильность. более выражено, чем у девушек.

Главное отличие заключается в том, что кровь содержит только аглютиногены Сниж-ся кол-во и функциональная акт-ть NK клеток, считают, что в пожилом воз-

приполном отсутствии АТ. расте они способны брать часть ф-ций Т-лимфоцитов, в частности у долгожителей.

Разичают 5осн. АГ сис-мы Rh: Нарушение ф-ции В-лимфоцитов, дисбаланс и снижение содержания Ig М, паде-

D(Rh₀) > c > E > C > e ние продукции низкоафинных Ig G и Ig А, усиление катаболизма ведёт к сниже-

Эти АГ образуют 25 групп сис-мы резус. нию антимикробной резистентности и т.д.

АГ Rh₀– основной в сис-ме, содеж-ся в эритроцитах 85% европейцев. На фоне снижения кол-ва специфических АТ, происход. увелич-ие продукции не

В норме Rh АТ в сыворотке нет, могут образов-ся во время беременности (у мате- специфических АТ в т.ч. аутоантител к ДНК, клеточным мембранам, лимфоцитам,

ри Rh-, а плод Rh+) или во время переливания крови Rh- реципиенту от Rh+ доно- слизистой и т.д.

ра. Последствия сенсибилизации по Rh фактору у беременных может сопровожда- Фагоцитарные р-ции хар-ся снижением функциональной активности фагоцитов,

ться рождением детей с гемолитической болезнью новорожденных или приводить ведущие к более лёгкому развитию бактериальных инфекций кожи и слизистых.

к внутриутробной гибели плода (так называемая ядерная желтуха). В рез-те формируются болезни "старости": сосудистые заболев-ия, диабет,

При переливании Rh+ крови возникает Rh конфликт с гемолизом эритроцитов. дегенерация соединит. ткани, новообразования, дистрофические изменения орга-

Встреч-ся и слабые варианты АГ D: D(week), D(u)– их частота не превышает 1%. нов и тканей, аутоиммунные заболев-ия.

Доноры, имеющие эти АГ должны рассматриваться как Rh+ - поскольку перели- Пути контроля и восстановления ф-ций иммунной сис-мыпутём введения

вание их крови Rh- пациентам может привести к сенсибилизации, а у сенсибилизи- недостающих гормонов тимуса, пересадка тимуса (теоретически), поиск препара-

рованных лиц вызвать тяжёлые трансфузионные р-ции. тов способных осуществлять соответствующую иммунокоррекцию.

Реципиенты,имеющие слабые АГ Dдолжны рассматр-ся как Rh- и им можно пере

ливать только Rh- кровь, т.к. возник. конфликт с эритроцитарными АГ др. групп.

АГ других клеток крови и плазмы:

- лейкоцитарные HLA;

- тромбоцитарные АГсложны по стр-ию и включают HLA, в несколько раз мень

ше чем на лимфоцитах, недостаточно изучены специфические АГ, наиболее изуче

ны PLиKo АГ, так жесодержат АГ АВО.

АГ жидкой части крови – плазмы:

- АГ белковых молекул(сис-маGm– имеет отношение к Ig G);

- АГ форменных элементов.

1 / 41 2 3 4 > Следующая >>>

Соседние файлы в предмете Микробиология и иммунология

#
05.03.20161.13 Mб271_Vvedenie_v_immunologiyu.pdf
#
05.03.2016577.58 Кб4662 КУРС. МИКРА. (Микробиология). Тесты по микробиологии .pdf
#
05.03.201654.45 Кб22immunka_testy_1.docx
#
05.03.2016391.29 Кб40testy_immun.pdf
#
05.03.2016304.2 Кб32шпора по иммунке.docx