- •1. Перечислите факторы, которые влияют на эффективность изолирования лек.В-в из биологического материала.
- •3. Тсх-скрининг: суть метода, групповые проявители для самых важных в токсикологическом отношении групп лс
- •4,5. Основные этапы изолирования по м-ду Васильевой и Стаса-Отто
- •6. Основные этапы исследования экстракта из биологического материала на лекарственные вещ-ва. Методы, использующиеся на каждом из этапов
- •7. Назовите специальные м-ды изолирования барбитуратов. Их характеристика.
- •8 Методы очистки экстрактов из биологического материала. Какие используются чаще всего
- •9. Какой метод изолирования используется при направленном судебно-токсикологическом исследовании на алкалоиды. Его характеристика
- •10. Назовите группы лек.В-в соответственно их характеру поглощения в уф-области спектра. Примеры
- •11. На чем основана экстракционная очистка биологических вытяжек. Рассмотреть на примере кислой и щелочной хлороформной вытяжек
- •12. Охарактеризуйте м-д изолирования производных бензодиазепина из биологического материала при направленном анализе
- •13. Методы направленного анализа фенотиазина.
- •14,15. Схема тсх-скрининга кислой и щелочной хлороформной вытяжки
1. Перечислите факторы, которые влияют на эффективность изолирования лек.В-в из биологического материала.
1) степень измельчения биологического материала (чем мельче, тем лучше)
2) значение рН среды(обычно 2-3, при котором разрушаются связи «яд-белок»)
3) природа и свойства в-в, взятых для изолирования ядов (гидрофильные, липофильные, амфифильные)
4) природа кислоты, взятой для подкисления экстрагента
5) ионная сила растворов
2. Назовите общие методы изолирования лекарственных веществ из биол.мат-ла. Приведите их сравнительную характеристику
К общим методам изолирования относятся м- Васильевой и Стаса-Отто.
М-д Васильевой |
М-д Стаса-Отто |
Подготовка объекта к исследованию (взятие навески, измельчение, перенос в емкость) |
Подготовка объекта к исследованию (взятие навески, измельчение, перенос в емкость) |
Экстракция вещ-в из твердого тела в жидкость (проводится водой, подкисленной винной или щавелевой к-той до рН 2-3 3 раза) |
Экстракция вещ-в из твердого тела в жидкость (проводится спиртом этиловым 96%, подкисленным винной или щавелевой к-той до рН 2-3 3 раза) |
Очистка от соэкстрактивных вещ-в (процеживание вытяжки через тройной слой марли, центрифугирование) |
Очистка от соэкстрактивных вещ-в (упаривание объединенной вытяжки до густоты сиропа, осаждение белков абсолютным этанолом) |
Экстракция жидкость-жидкостная (трехкратная экстракция хлороформом из кислой водной вытяжки – кислое хлороформное извлечение КХИ; произв барбитуровой, салициловой к-ты, пурина) |
Экстракция жидкость-жидкостная (трехкратная экстракция хлороформом из кислой спиртовой вытяжки – кислое хлороформное извлечение КХИ; |
Подщелачивание кислой водной вытяжки раствором аммиака до рН 9-10; проводим трехкратную экстракцию со щелочной вытяжки хлороформом – щелочное хлороформное извлечение ЩХИ; алкалоиды и синтетические ЛС) |
Подщелачивание кислой спиртовой вытяжки раствором аммиака до рН 9-10; проводим трехкратную экстракцию со щелочной вытяжки хлороформом – щелочное хлороформное извлечение ЩХИ; алкалоиды и синтетические ЛС) |
М-д Вассильеовй: только со свежеприготовленными, быстрее
М-д Стаса-Отто: долго, дорого из-за спирта
3. Тсх-скрининг: суть метода, групповые проявители для самых важных в токсикологическом отношении групп лс
Суть метода заключается в следующем: на пластины количсетвенно наносят исследуемый экстракт в виде полосы, а по краям – смесь растворов стандартных вещ-в. Хроматографирование проводят в специальных камерах, после этого удаляют растворитель, рассматривают хроматограмму в УФ-свете, отмечают зоны флуоресценции и обрабатывают их реактивами для определения веществ. С помощью этого метода можно распределить препараты и их метаболиты, очистить от примесей, идентифицировать группы препаратов или индивидуальные вещ-ва, количественно оценить анализированный препарат.
Проявители для кислых и слабощелочных: барбитураты – 5% серная к-та и 0,1% р-р дифенилкарбазона в хлороформе; салициловая к-та, пиразолон – 5% железа хлорида (3), для алкалоидов – р-в Драгендорфа.
Проявители для щелочных и слабощелочных: фенотиазин – 10% серная к-та в этаноле; фенотиазин, пиразолон – 5% железа хлорид; алкалоиды – Драгендорф.