Лабораторная диагностика кишечных инфекций

Основным методом лабораторной диагностики кишечных инфекций является бактериологический, основанный на выделении чистой культуры возбудителя и ее идентификации. Для идентификации бактерий кишечной группы ис­пользуют изучение их ферментативной активности и антигенной структуры.

Этапы бактериологического исследования

1 день. Посев исследуемых материалов на дифференциально-диагностические среды (Эндо, Плоскирева, Левина).

Для выделения гемокультуры сальмонелл производят посев крови на 10-20% желчный бульон или на среду Рапопорт. Соотношение крови и среды должно составлять 1:10. Инкубация 18-24 часа при температуре 37ºС

2 день. Просмотр и описание колоний. Микроскопия материала из колоний и окраска по Граму. Пересев материала из колоний на скошенный МПА, среду Ресселя для накопления чистой культуры. Со среды Рапопорт культуру пересевают на среду Эндо и Ресселя.

В случае диффузного помутнения и изменения цвета среды Рапопорта (она приобретает красный цвет) за счет ферментации глюкозы с образованием кислоты делают предварительный вывод о наличии возбудителей брюшного тифа; при наличии кроме этих признаков газообразования в поплавке - возбудителей паратифов.

Постановка ориентировочной реакции агглюцинации на стекле с материалом из отдельных колоний и смесью эшерихиозных сывороток, со смесью дизентерийных сывороток, со смесью сывороток против сальмонелл, содержащих антитела против наиболее распространенных сероваров возбудителей кишечных инфекций. При положительном результате проводят реакцию агглютинации с моновалентными агглютинирующими сыворотками на стекле.

3 день. Проверка чистоты выделенной культуры. Учет изменения цвета среды Ресселя. Постановка с чистыми культурами реакции агглютинации на стекле с поливалентными сыворотками, затем с видовыми и типовыми сыворотками. Постановка развернутой реакции агглютинации. Пересев культур на среды для определения ферментативной активности (среды Гисса).

4 день. Учет результатов реакции агглютинации.

Учет роста на средах Гисса.

Окончательный ответ о виде и сероваре дают на основании результатов реакции агглютинации и "пестрого" ряда.

Возбудители эшерихиозов ферментируют глюкозу и лактозу с образованием кислоты и газа, выделяют сероводород.

Шигеллы ферментируют углеводы с образованием кислоты. Возбудители сальмонеллезов не ферментируют лактозу и сахарозу, расщепляют глюкозу маннит и мальтозу с образованием кислоты и газа, не образуют индол и за неболь­шим исключением выделяют сероводород.

Дифференциально-диагностическая таблица кишечно-тифозной группы

Название бактерий	Углеводы					Индол	Подвижность	Экзотоксин
	Лактоза	Глюкоза	Мальтоза	Маннит	Сахароза
Кишечная палочка	кг	кг	кг	кг	кг или –	+		
Паратифозная В-палочка	–	кг	кг	кг	–	–	+	–
Паратифозная А-палочка	–	кг	кг	кг	–	–	+	–
Брюшнотифозная палочка	–	к	к	к	–	–	+	–
Дизентерийная палочка Григорьева-Шига	–	к	–	–	–	–	–	+
Дизентерийная палочка Флекснера	–	к	к или –	к или –	к или –		–	–
Дизентерийная палочка Зонне	к (2-10 суток)	к	к или –	к	к	–	–	–