Среды для идентификации микробов семейства кишечных

Для определения сахаролитических ферментов используют следующие среды:

1. Среда Гисса, содержащая 1% углевод и 1% индикатор Андреде, в состав которого входит фуксин. Приготовленный реактив имеет соломенно-жел­тый цвет, в кислой среде дает покраснение. На этой среде выявляют разложение углеводов микроорганизмами. Среду разливают по пробиркам с поплавками (длина 25 мм, диаметр 3 мм). При наличии газа поплавок всплывает. При ферментации бактериями углеводов с образованием кислоты цвет среды меняется за счет находящегося в ней индикатора, что создает впечатление пестроты - "пестрый" ряд. Подбирают среды с соответствующими углеводами (глюкоза, мальтоза, лактоза, сахароза и др.), в процессе ферментации которых образуются кислоты и газообразные продукты.

2. Желчно-глицериновый агар по методу Рапопорта. Среда позволяет уже на чашках, до выделения колоний, дифференцировать ши­геллы Флекснера от прочих микробов, разлагающих глицерин.

3. Среда с рамнозой для сальмонелл (по Биттеру). К суточной культуре, выращенной на этой среде, прибавляют несколько капель 1,5% спиртового раствора метилового красного. В зависимости от степени кислотности среда краснеет или остается жел­той. Salmonella typhimurium дает красное окрашивание, остальные сальмонеллы - желтое.

4. Комбинированная среда Рессела. Содержит 1% агара, 4% индикатора Анд­реде, 1% лактозы и 0,1% глюкозы. Среду разливают в пробирки и смешивают так, чтобы нижняя половина оставалась столбиком, а верхняя имела скошенную поверхность.

При небольшом количестве глюкозы (0,1%) сбраживание ее происходит только в столбике, вследствие чего в нем изменяется цвет среды; сбраживание лактозы, которая содержится в большей концентрации (1%), происходит в столбике и в скошенной части, в результате чего вся среда из­меняет свой цвет.

Среды для холерного вибриона

1. 1% щелочная пептонная вода. Через 6 часов наблюдается обильный рост вибрионов в отличие от других микробов кишечной группы; рост в виде нежной голубоватой пленки, которая при наклоне пробирки или флакона прилипает к стенке.

2. Агар щелочной (рН 8,0-8,2). Холерный вибрион растет с образованием круг­лых, гладких, плоских, голубоватых, просвечивающихся в проходящем свете, гомогенных, с ровными краями колоний диамет­ром 1-2мм. Консистенция колоний маслянистая, они легко снимаются и эмульгируются.

3. Среда Аронсона. Содержит сахарозу, обесцвеченный фуксин. Холерный вибрион образует вначале мелкие бесцветные колонии, а затем крупные блестящие с ярко-красным центром и бледно-розовой или бесцветной периферией.

4. Пептонная вода + 0,1% растворимого крахмала.

К посеву на этой среде прибавляют несколько капель раствора Люголя. В при­сутствии холерного вибриона синего окрашивания

не наступит, так как истинные холерные вибрионы в отличии от холероподобных вибронов обладают мощным диастатическим ферментом и за 5-6 часов полностью разлагают крахмал.

5. Лактозо-сахарозная среда Ресселя. Посев делают штрихом по скошенной по­верхности и уколом в столбик. Холерные и холероподобные вибрионы расщепляют сахарозу, дают покраснение среды в столбике без образования газа.

6. Среда TCBS (тиосульфат-цитрат-бромтимол сахарозный). Среда имеет зеленый цвет. Холерные вибрионы, разлагающие сахарозу, дают пло­ские желтые колонии на фоне голубовато-серой среды через 12-14 часов. Кишечные палочки и все патогенные энтеробактерии не растут. Протей рас­тет медленно в виде мелких изолированных прозрачных колоний в цвет среды. Кокки растут в виде мелких не­прозрачных колоний желтого цвета.

7. Среда Монсура. Колонии холерного вибриона прозрачные или полупрозрач­ные, серовато-черного цвета с помутнением на краях.

Селективными для холерного вибриона являются среды Аронсона, Монсура, TCBS.