Тема 2 Измерение микроскопических объектов

Цель: Ознакомить с устройством микроскопа, рисовального аппарата и особенностями работы с ними

План:

1 Работа с микроскопом

2 Измерение микроскопических объектов

Методические рекомендации по подготовке к занятию

Измерение микроскопических объектов (пыльцевых зерен, хромосом, тетрад микро­спор и т. д.) производят с помощью специальных ли­неек— окуляр-микрометра и объект-микрометра. Шкала окуляр-микрометра имеет длину 0,5 или 0,1 см и раз­делена соответственно на 50 или 100 частей. Окуляр-микрометр либо вставляют в окуляр, либо он бывает вмонтирован в специальный измерительный окуляр. Вращая окуляр,. подводят измеряемый объект под шкалу окуляр-микрометра и производят измерение объекта. Однако цена деления окуляр-микрометра бы­вает разной в зависимости от того, с каким объективом мы рассматриваем объект. Для того чтобы определить цену деления окуляр-микрометра при различных объек­тивах и окулярах, пользуются специальной линейкой — так называемым объект-микрометром. Объект-микро­метр вмонтирован в металлическую оправу. Шкала его имеет длину 1 мм и разделена на 100 частей. Одно деле­ние шкалы объект-микрометра равно 10

Для проведения измерений и подсчетов необходима: объект-микрометр, окуляр-микрометр и препаратоводитель на столике микроскопа.

Объект-макрометр представляет собой металлическую или стеклянную пластинку в форме предметного стекла (рис.1). На этой пластинке обозначен круг, в центре ко­торого имеется шкала. Величина всей шкалы составляет I мм. Она разделена на 100 частей (рис.2). Интервалы между де­лениями обычно равны 0,01 мм, т.е. 10 микрометрам (сокра­щенное обозначение мкм) - это цена одного деления объект-макрометра. Эта величина всегда обозначена в виде марки­ровки на объект-макрометре. Объект-микрометр нужен для определения цены деления окуляр-микрометра, для определе­ния масштаба изображения на микрофотографиях и рисунках и для определения увеличения микроскопов со сложными оп­тическими системами.

Рис.1. Объект-микрометр

Окуляр-микрометр представляет собой тонкую круглую стеклянную (отдельную или вмонтированную в окуляр) пластинку, с нанесенной на ней линейной шкалой (рис.3.) Длина всей шкалы может равняться 5 мм. Она разделена на 50 частей, по.0,1 мм каждая, или же на 100 частей - по 0,05 мм каждая. Бывает шкала окуляр-микрометра длиной в 10 мм. Она разделена на 100 частей, по 0,1 мм каждая. Окуляр-микрометр вставляется между линзами окуляра. Та­кой окуляр-микрометр служит для линейных измерений.

Рис.2. Шкала объект-микрометра величиной в 10 мм, разделенная

на 100 частей

Рис.3. Линейный окуляр-микрометр со шкалой в 10 мм, разделен­ной на 100 частей

Для измерений плоскостей и для подсчета числа клеток в определенной площади используется сетчатый окуляр-микрометр. В нем на стеклянной пластинке нанесен квадрат. Дли­на сторон квадрата 10 мм. Каждая сторона квадрата разде­лена на 20 частей. В результате пересечения горизонталь­ных и вертикальных линий образуется сеточка, с интервала­ми между делениями 0,5 мм.

Величина стороны квадрата равна 10 мм и разделена на 20 частей Для измерения больших объектов и для повышения точ­ности измерений используется винтовой окуляр-микрометр. Отсчетный механизм его состоит из шкалы (от 0 до 8 мм) с интервалами между делениями в I мм, нанесенной на непод­вижной стеклянной пластинке, и сетки в виде двух рисок с перекрестием, нанесенной на подвижной стеклянной пластин­ке, а также микрометренного винта с отсчетным барабаном. Обе пластинки расположены в фокальной плоскости окуляра. Подвижная пластинка с рисками и перекрестием связана с микрометренным винтом так, что при его вращении перекрестие и риски перемещаются в поле зрения окуляра относи­тельно неподвижной шкалы. Шаг винта равен I мм. Таким об­разом, при повороте барабана винта на один полный оборот, риски и перекрестие в поле зрения окуляра переместятся на одно деление шкалы. Следовательно, неподвижная шкала в по­ле зрения служит для отсчета полных оборотов барабана вин­та, т.е. для отсчета полных миллиметров, на которые пере­мещается перекрестие и риски окуляр-микрометра. Барабан винта разделен на 100 частей. При шаге винта в I мм пово­рот барабана на одно деление соответствует перемещению перекрестия и рисок на 0,01 мм. Таким образом, шкала ба­рабана служит для отсчета сотых долей миллиметра.

Полный отсчет по шкалам окуляр-микрометра складыва­ется из отсчета по неподвижной шкале и отсчета по бараба­ну винта. Отсчет по неподвижной шкале в поле зрения' опре­деляется положением перекрестия и рисок, т.е. подсчитыва­ется, на сколько полных делений шкалы они переместились, считая от нулевого деления шкалы. При отсчете по бараба­ну микрометренного винта, определяют, какое деление шкалы барабана приходится против индекса, расположенного на подвижной части винта- Пределы измерения винтовым окуляр-микрометром - от 0 до 8 мм.

Линейное измерение объектов. Величина объектов измеряется единицами длины микрометрами (мкм), которые раньше назывались микронами.

Изображение объектов под микроскопом измеряется оку­ляр-микрометром в делениях его шкалы. Поворотом окуляра, в который вложен окуляр-микрометр, и перемещением препаратоводителя на столике микроскопа, совмещают шкалу оку­ляр-микрометра с измеряемым объектом по направлению из­мерения. Определяют сколько делений окуляр-микрометра приходится на длину (ширину) объекта. При работе с вин­товым окуляр-микрометром, наблюдая в окуляр и вращая ба­рабан по часовой стрелке, подводят центр перекрестия до совмещения с краем измеряемого объекта и делают первый отсчет по шкалам окуляр-микрометра по положению рисок.

Литература : 8, с.185-188

Контрольные вопросы:

1 Назовите детали оптического микроскопа и какую роль они выполняют

2 Расскажите о последовательности работы с оптическим микроскопом

3 Как можно узнать увеличение объекта?

4 На каком расстоянии от изучаемого объекта должен находиться малый и большой объективы?

5 Какую сторону зеркала используют для нахождения света в различных условиях работы?