MIKROBIOLOGIYa_TEORIYa

Материал засевают на жидкую питательную среду в соотношении 1:10 – 1:60;

Посев на аэробы и факультативные анаэробы (трехсахарный агар и двухфазную среду): вносится кровь, инкубация, выявление помутнения среды, следовательно есть бактерии.

Посев на анаэробы ( тиогликолевая среда): вносится кровь, инкубация, отмечается рост колоний, производится мазок из сахарного бульона и окрашивается по Гр.

В зависимости от результата строят соответствующее исследование: если роста нет – высев на 3 и 5 день на кровяной агар ( если нет роста – предварительный отрицательный диагноз). Кровь продолжают инкубировать до 6 недель, просматривая ежедневно первые 8 дней. Если рост есть – делаем соответствующий высев.

14. Анаэробные инфекции. Лабораторная диагностика.

Возбудители анаэробных инфекций – клостридии, отдел Fermicutes, сем. Bacillaceae.

Вызываемые клостридиозы:

Столбняк – острое инфекционное заболевание с поражением двигательных нейронов ЦНС и развитием тонических и клонических судорог. Возбудитель Cl.tetani.

Главный патогенный фактор – столбнячный экзотоксин, состоящий из двух фракция: тетанолизин (вызывает гемолиз) и тетаноспазмин (нейротоксин – вызывает спазм мускулатуры: опистотонус и тризм).

Условия возникновения: колотая рана с малым диаметром и спадающимися краями Профилактика: антитоксическая сыворотка; вакцины АКДС, АДС, TABte Лечение: антитоксическая сыворотка

Ботулизм – пищевая токсикоинфекция, тяжелое заболевание с поражением ЦНС. Возбудитель – Cl.botulinum.

Газовая гангрена – раневая инфекция. Возбудитель – Cl.perfringens типа А, Cl.septicum, Cl.novyi, Cl.hystoliticum.

Условия возникновения: много мертвой ткани (некропаразиты), нарушение кровообращения, гематомы, анаэробные условия.

Формы: гангрена мягких тканей конечностей и туловища, мозга, органов брюшной полости, органов грудной полости, анаэробный остеомиелит а также послеродовая и послеабортовая гангрена (до 70% всех видов).

Инкубационный период 1-3 дня Стадии: образование отек (действие токсинов), далее некроз соединительной ткани и мышц.

Профилактика: антитоксическая сыворотка, ПХО и доступ кислорода, секстанатоксин

Пищевая токсикоинфекция. Cl.perfringens типа А.

Некротические энтероколиты. Возбудитель Cl.perfringens типаС.

Псевдомембранозный колит. Возбудитель – Cl.difficile.

Неспецифические ГСИ.

Диагностика:

Бактериоскопический метод: исследование кусочков иссеченной ткани, отечной жидкости. В поле зрения выявляются крупные Гр+ палочки со спорами. Метод носит ориентировочный характер.

Бактериологический метод:

Исследуемый материал – отделяемое из раны, кровь, одежда, инородные тела, перевязочный материал.

1й день: материал засевают на среду Китта-Тароцци и инкубируют

2й день: среда помутнела, кусочки материала покрыты газом; высеваем на среду Цейсслера с целью выделения чистой культуры

3й день: на среде Цейсслера крупные серо-белые влажные колонии, окруженные зоной бета-гемолиза. Делаем препарат, окрашивают по Граму. Выявляются крупные Гр+ палочки со спорами или без. Пересеваем на среду Китта-Тароцци для накопления чистой культуры. Инкубируем в анаэростате.

4й день: изучаем биохимические свойства и токсигенность. На основе данный производим идентификацию возбудителей.

БЛОК 4 1. Сибирская язва. Биологические свойства возбудителя. Патогенез и клинические проявления.

Возбудитель сибирской язвы — Bacillus anthracis.

Род: Bacillus. Семейство: Bacillaceae .

Морфология.

-Грамположительные палочки, крупные, часто с закругленными концами, неподвижные. В клинических материалах расположены парами или в виде коротких цепочек.

-Имеют капсулу, которая образуется только в организме человека и животных или на специальных средах с кровью. Имеют капсульные антигены, которые отличаются по химической структуре от К- антигенов других бактерий, полипептидной природы, образуются преимущественно в организме хозяина.

-Споры образуются только вне организма, при наличии кислорода и определенной температуре (от +12 до +43о С, оптимум при 30-35о С). Споры проявляют очень высокую устойчивость во внешней среде.

Капсульные антигены отличаются по химической структуре от К- антигенов других бактерий, полипептидной природы, образуются преимущественно в организме хозяина.

Сибирская язва — прежде всего почвенная инфекция.

Физиология.

Факультативный аэроб.

Оптимальная температура роста – 35-37C; pH = 7,4 – 8,0.

Микроб не требователен к питательным средам. Может расти даже на таких субстратах, как настой соломы, сырой и вареный картофель, экстракты злаков, гороха и др.

21

На мясо-пептонном агаре рост настолько характерен, что имеет диагностическое значение. Через 24 часа роста появляются колонии: серебристо-серые, , зернистые, диаметром 3-5 мм, с бахромчатыми краями и отходящими от них пучками нитей. Такой рост (R-форма) характерен для вирулентных штаммов.

Биохимические свойства.

B.anthracis биохимически высоко активна.

Она ферментирует с образованием кислоты без газа глюкозу, сахарозу, мальтозу, трегалозу, образует сероводород, свертывает и пептонизирует молоко.

Ферменты: Bacillus anthracis: липаза, диастаза, протеаза, желатиназа, дегидраза, цитохромоксидаза, пероксидаза, каталаза, лецитиназа.

Токсины: Bacillus anthracis образует сложный экзотоксин, состоящий из трех компонентов. Токсин включает протективный антиген (индуцирует синтез защитных антител), летальный фактор, отечный фактор.

Патогенез.

Сибирская язва — зоонозная инфекция. Основной источник для человека — травоядные животные. Их заражение происходит преимущественно алиментарным путем, споры длительно сохраняются в почве и заглатываются животными преимущественно с кормами, травой. Особую опасность представляют сибиреязвенные скотомогильники (в них споры длительно сохраняются, при их разрывании, размывании и других процессах попадают на поверхность почвы и растения). Человек заражается при контакте с инфицированным материалом (уход за больными животными, разделка и употребление в пищу инфицированных мясных продуктов, контакт со шкурами сибиреязвенных животных и др.).

Через поврежденную слизистую пищеварительного тракта микроб проникает в лимфатическую систему, а затем в кровь, где фагоцитируется и разносится по всему организму, фиксируясь в элементах лимфоидно-макрофагальной системы, после чего снова мигрирует в кровь, обусловливая септицемию. Капсульное вещество ингибирует опсонизацию, в то время как экзотоксин разрушает фагоциты, поражает центральную нервную систему, вызывает отек, возникает гипергликемию и повышается активность щелочной фосфатазы. В терминальной фазе процесса в крови снижается содержание кислорода до уровня, несовместимого с жизнью.

2.Диагностика и профилактика сибирской язвы. Лабораторная диагностика.

Материал для исследования от больных зависит от клинической формы. При кожной форме исследуют содержимое пузырьков, отделяемое карбункула или язвы, при кишечной — испражнения и мочу, при легочной — мокроту, при септической — кровь. Исследованию подлежат объекты внешней среды, материал от животных, пищевые продукты.

Бактериоскопический метод используют для обнаружения грамположительных палочек, окруженных капсулой, в материалах от человека и животных, спор — из объектов внешней среды. Чаще применяют метод флюоресцирующих антител (МФА), позволяющий выявлять капсульные антигены и споры.

Основной метод — бактериологический применяется в лабораториях особо опасных инфекций по стандартной схеме с посевом на простые питательные среды (МПА, дрожжевая среда, среда ГКИ), определением подвижности, окраской по Граму и изучением биохимических особенностей. В дифференциации от других представителей рода Bacillus существенное значение имеет биологическая проба. Белые мыши погибают в пределах двух суток, морские свинки и кролики — в течение четырех суток. Определяют также лизабельность бактериофагами, чувствительность к пенициллину (жемчужное ожерелье). Для ретроспективной диагностики используют серологические тесты, аллергическая проба с антраксином, для выявления соматического антигена — реакция Асколи, которая может быть результативна при отрицательных результатах бактериологических исследований.

Лечение. Применяют противосибиреязвенный иммуноглобулин, антибиотики (пенициллины, тетрациклины и др.). Профилактика. Применяют живую споровую безкапсульную вакцину СТИ, протективный антиген.

3.Биологические свойства возбудителя чумы. Патогенез и клинические проявления.

Возбудитель: Yersinia pestis, относится к роду Yersinia, семейству энтеробактерий.

Морфология:

Неподвижная, закругленная на конце овоидная палочка.

Размеры: 1,5-2 х 0,5-0,7 мкм.

Описан полиморфизм возбудителей чумы с появлением удлиненных зернистых, нитевидных и фильтрующихся форм. Возбудитель чумы не образует спор, имеет капсулу, грамотрицателен, легко окрашивается анилиновыми красителями (более интенсивно на концах — биполярное окрашивание).

В мазках из бульона бактерии чумы располагаются цепочками различной длины обычно с хорошо выраженной биполярностью.

На агаре с 3% поваренной соли можно обнаружить причудливые формы.

Микроб чумы при культивировании на искусственных питательных средах в условиях повышенной температуры (37 °С) образует капсулы. Капсула лучше образуется на влажных и слегка кислых питательных средах.

Жгутики отсутствуют.

Физиология:

Возбудитель чумы — факультативный анаэроб.

Хорошо растет на обычных жидких и питательных средах (мясо-пептонный агар, бульон) при температуре 25— 30С.

Для стимуляции роста микроба чумы целесообразно прибавлять в питательную среду сульфит натрия, гемолизиро-ванную кровь, которые синтезируют дыхательные ферменты.

На агаровых пластинах рост микроба чумы уже через 24 ч заметен в виде нежного сероватого налета.

Колонии на агаре соответствуют R-форме (вирулентные); начало развития колонии обнаруживается в виде появления очень маленьких рыхлых глыбок и затем плоских слоистых образований с неровными краями, напоминающих кружевной платочек серовато-белого с голубоватым оттенком цвета. Колониям присущ полиморфизм.

Биохимические свойства.

22

Возбудители чумы восстанавливают нитриты в нитраты, ферментируют с образованием пленки глюкозу, левулезу, мальтозу, галактозу, арабинозу, ксилозу и маннит, продуцируют дегидра-зы и уреазы. Желатин не разжижают, индол и сероводород не образуют.

Ферменты:

Фибринолизин, коагулаза, гиалуронидаза, гемолизин, пестицины.

Токсины:

Бактерии чумы образуют эндо- и экзотоксин, содержат до 20 антигенов.

(*) Мышиный токсин чумы — антагонист адренергических рецепторов, представлен белковоподобным веществом, локализованным внутриклеточно.

Патогенез:

Чума относится к особо опасным инфекциям и является типичным зоонозом природной очаговостью. Грызуны (суслики, сурки, мыши, крысы) являются резервуаром инфекции в природе и передают ее один другому главным образом через блох. От больных грызунов (также через блох) может заразиться человек, что ведет в дальнейшем к вспышкам чумы среди людей. Возбудитель чумы проникает в организм человека через кожу, слизистые оболочки глаз, рта, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта.

При укусе блох на месте внедрения возбудителя патологические изменения возникают редко. Лишь у некоторых больных развиваются характерные для кожной формы чумы стадии местных изменений: пятно, папула, везикула, пустула, на месте которой возникает некроз. Независимо от места внедрения микробы с током лимфы заносятся в регионарные лимфатические узлы, где интенсивно размножаются. Лимфатические узлы увеличиваются в размерах, в них развиваются серозногеморрагическое воспаление, некроз лимфоидной ткани. В процесс вовлекается окружающая клетчатка, образуется первичный бубон.

В результате нарушения барьерной функции лимфоузла возбудитель чумы проникает в кровь и заносится в различные органы и ткани, в том числе и в лимфоузлы, удаленные от входных ворот инфекции, в которых также развивается воспаление и образуются вторичные бубоны. Из лимфатических узлов и лимфоидной ткани внутренних органов микроб вновь поступает в кровь. По мере накопления возбудителей чумы в крови процесс переходит в септицемию. При гематогенном заносе чумных микробов в легочную ткань возникает вторичная легочная чума, сопровождающаяся интенсивным выделением микробов с мокротой. Значительно быстрее генерализация с развитием септицемии развивается при первичной легочной чуме, возникающей при аэрогенном заражении, когда микробы из пульмональных лимфатических узлов проникают в кровоток.

4. Чума. Эпидемиология. Диагностика, профилактика. Лабораторная диагностика:

1.Микроскопическое исследование:

мазки фиксируют погружением полностью в жидкость Инпифорова на 20 мин. Окраска по Граму обязательна во всех случаях.

посевы исследуемого материала производят на агар добавлением стимуляторов роста (кровь, сульфит натрия). При исследовании материала, обильно загрязненного посторонней микрофлорой (загнившие трупы, мокрота), к агару добавляют генциановый фиолетовый 1 : 100 000. В случаях подозрения на наличие бактериофага посевы обрабатывают антифаговой сывороткой. Инкубацию посевов проводят при 28 °С. В положительных случаях через 12 ч появляются колонии в виде характерных «кружевных платочков».

Когда чистая культура выделена путем прямого посева, она подлежит идентификации.

3.Биологический метод.

Наиболее чувствительными из лабораторных животных являются морские свинки и белые мыши. Для постановки биологической пробы животных заражают внутрибрюшинно, подкожно или внутрикожно, а в случае загрязнения материала посторонней микрофлорой — втиранием в скарифицированную. кожу.

4.Серологические реакции.

Используются при подозрительных на чуму заболеваниях для ретроспективного диагноза, при обследованиях природных источников чумы. С этой целью применяют иммуноферментную агглютинацию, реакцию пассивной гемагглютинации, реакции непрямой агглютинации.

Экспресс-методом является люминесцентно-серологический, позволяющий обнаружить возбудителя в исследуемом материале через 2 ч.

Лечение:

Лечение больных чумой в настоящее время осуществляется при помощи антибиотиков, сульфаниламидов и лечебной противочумной сыворотки.

Профилактика:

Профилактика чумы включает в себя профилактические и противоэпидемические мероприятия.

Одним из самых важных моментов является скорейшая изоляция больного чумой или человека с подозрением на данное заболевание от окружающих людей.

Врачи и медицинские работники при оказании помощи больным чумой обязаны надевать противочумные костюмы. Люди, находящиеся в очаге чумы, обязаны вакцинироваться специальной живой сухой вакциной.

Эпидемиология:

Чума — природно-очаговый трансмиссивный зооноз. Выделяют природные, первичные («дикая чума», silvalia plaque) и антропоургические, вторичные очаги чумы. Природные очаги связаны с дикими грызунами, являющимися естественными резервуарами Y pestis, и их эктопаразитами — блохами, и существуют независимо от деятельности человека в Азии, Америке, Африке и Европе в зоне степей, полупустынь и пустынь. В антропоургических очагах чумы основными резервуарами и источниками инфекции являются грызуны: серая крыса, или пасюк (Rattus norvegicus), черная крыса (Rattus rattus) и рыжая крыса (Rattus alexandrinus), а также домашние животные — верблюды и, возможно, кошки. Специфическими

23

переносчиками возбудителей чумы являются блохи, в особенности родов Xenopsylla и Neopsylla, паразитирующие на грызунах. Интенсивное заражение блох происходит в период выраженной бактериемии перед гибелью грызунов. Заражение человека чумой происходит несколькими путями: трансмиссивным (преимущественно через укус инфицированных блох Xenopsylla cheopis), контактно-бытовым (при снятии Шкурок с зараженных промысловых грызунов или разделке туши верблюда), пищевым (при употреблении в пищу обсемененных чумными бактериями продуктов), воздушно-капельным (при контакте с больным легочной формой чумы). Больные испытывают мучительную головную боль, часто сопровождающуюся тошнотой и рвотой, мышечные боли, чувство разбитости, нередко страх. Лицо больного обычно гиперемировано, вначале одутловатое, затем осунувшееся, с цианотичным оттенком, темными кругами под глазами. Губы сухие. При тяжелом течении болезни появляется выражение невыносимого страдания и ужаса. Кожа сухая и горячая, кровоизлияния в виде петехий и экхимозов быстро приобретают темно-багровый оттенок. На слизистой оболочке рта нередко выявляются геморрагии, язвы. Язык отечен, сухой, дрожащий, покрыт густым белым налетом («натерт мелом»).

5. Бруцеллѐз.Биологические свойства возбудителей бруцеллеза. Диагностика, профилактика.

Возбудитель заболевания — группа микроорганизмов рода бруцелл.

Род: Brucella

Виды:

Br. melitensis (овец и коз)

Br. abortus (крупного рогатого скота)

Br. suis (свиней)

Br. canis (инфекционного эпидидимита баранов)

Морфология:

Грамотрицательные кокки, мелких размеров.

Имеют капсулу, не образуют спор, не имеют жгутиков.

Род объединяет мелкие неподвижные палочки или коккобациллы, обладающие значительным полиморфизмом. Аэробы, оптимум температуры около +37о С, рН — 6,6- 7,4. Факультативные внутриклеточные паразиты, хорошо окрашиваемые анилиновыми красителями.

Бруцеллы — возбудители зоонозной инфекции человека и животных — бруцеллеза. Возбудитель легко диссоциирует, переходя из S- в R- форму.

Физиология:

Лучше растут на обогащенных средах сложного состава с добавлением крови или сыворотки крови, глюкозы, глицерина. Используют печеночный агар Хеддльсона, кровяной агар, мясо — пептонный бульон.

Колонии возбудителя в S- форме мелкие, выпуклые, гладкие, с перламутровым оттенком, при диссоциации образуют широховатые R- формы колоний. Характерен медленный рост бруцелл в первых генерациях — колонии образуются через 2- 4 недели. Рост бруцелл на жидких средах сопровождается равномерным помутнением сред.

Биохимические свойства:

Бруцеллы ферментируют углеводы, однако при дифференциации на виды и биотипы используют ряд дополнительных признаков, в т.ч. способность расти на средах в присутствии обладающих бактериостатическим действием на отдельные виды бруцелл красителей (основной фуксин, тионин, сафранин), выделять сероводород, образовывать ферменты (уреазу, фосфатазу, каталазу), окислять различные аминокислоты.

Ферменты:

Гиалуронидаза, каталаза, уреаза.

Образуют эндотоксины.

Эпидемиологические особенности.

Бруцеллез — зооноз преимущественно сельскохозяйственных и домашних животных. Человек инфицируется от животных или при контакте с инфицированным сырьем животного происхождения. Бруцеллез может носить профессиональный характер (уход за инфицированными животными) или быть связан с употреблением недостаточно термически обработанных молочных или мясных продуктов. Возбудитель может внедряться в организм человека через поврежденную кожу, слизистые дыхательных путей (аэрогенно) и желудочно — кишечного тракта (алиментарным путем), при заносе возбудителя на конъюнктиву глаза. Пути заражения — контактный, алиментарный и аспирационный. Бруцеллы обладают относительно высокой устойчивостью во внешней среде.

Патогенез и факторы патогенности:

Патогенность бруцелл связана с наличием эндотоксина, гиалуронидазы идругих ферментов, наличием низкомолекулярных продуктов, способствующих подавлению фагоцитоза и окислительного взрыва в макрофагах, наличием аллергизирующих субстанций.

По лимфатическим путям бруцеллы попадают в регионарные лимфоузлы, где размножаются в макрофагах, частично подвергаются внутриклеточному уничтожению. Продукты жизнедеятельности бруцелл ингибируют фагосомо — лизосомальное слияние. Морфологически в лимфоузлах формируется ―первичный бруцеллезный комплекс‖ с формированием гранулем Новицкого с преобладанием крупных эпителиоидных клеток. Из разрушенных макрофагов в лимфоузлах бруцеллы попадают в кровь, распространяются по организму и поражают лимфатическую систему, печень, селезенку, нарушаются функции опорно — двигательного аппарата, нервной и половой систем.

Болезнь может иметь длительное хроническое течение (по сути — хрониосепсис). В патогенезе бруцеллеза имеет значение цикличность процессов, связанных с повторными проникновениями бруцелл в кровь из очагов с развитием местной воспалительной и общей реакций, на формирование которых существенное влияние оказывает специфическая сенсибилизация (реакция ГЗТ). Существенное значение в патогенезе, кроме аллергической перестройки и интоксикации, имеет преимущественное вовлечение в инфекционный процесс тех или иных органов и тканей.

Лабораторная диагностика:

1.материал для исследования: абортированный плод с оболочками, желудок, печень, почки плода, молоко и др.

2.Микроскопия:

24

3.Культивирование:

o посев на питательные среды – мясо-пептонный печеночный бульон (МППБ), мясо-пептонный печеночно- глюкозо-глицериновый агар (МППГГА), печеночно-глюкозо-глицериновый бульон и агар (МГГБ и МГГА) с 10%-ной глюкозой и 2-3% - ным глицерином.

Лечение:

Антибиотикотерапия: Тетрациклин,стрептомицин, доксициклин, рифампицин, гентамицин — только при остром бруцеллѐзе, в сочетании с препаратами, проникающими внутриклеточно,бисептол, нетилмицин.

Наиболее эффективны в лечении бруцеллѐза - фторхинолоны (ципрофлоксацин, норфлоксацин, офлоксацин), самый эффективный из них — флероксацин.

Специфическая профилактика:

В очагах козье-овечьего бруцеллеза применяют живую бруцеллезную вакцину ЖБВ. Разработана химическая бруцеллезная вакцина, которая отличается от живой вакцины более низкой реактогенностью

Эпидемиология:

Наиболее частым источником инфекции для человека является мелкий рогатый скот — козы и овцы. Второстепенным источником инфекции служат кошки, собаки, верблюды, олени, грызуны, у которых также обнаружены бруцеллезные микробы. Больные животные выделяют бруцелл с мочой, испражнениями, молоком. Особенно много бруцелл содержится в выделениях во время абортов и родов у животных. Больной человек для окружающих не представляет опасности. Из путей передачи инфекции на первом месте стоит контактный путь. Заражение человека может произойти при уходе за больными животными. Второй путь передачи инфекции — через инфицированное сырое молоко, творог, брынзу, приготовленные из сырого молока, а также через мясо больного бруцеллезом животного. Третий сравнительно редкий путь распространения бруцеллеза воздушно-пылевой (при обработке шерсти больных животных).

Инкубационный период длится 2 — 3 недели с колебаниями от одной недели до 2 месяцев.

Патогенез:

Ворота — микротравмы кожи, слизистые оболочки органов пищеварения и респираторного тракта. На месте ворот и в лимфатических путях регионарных лимфоузлов изменений нет. Лимфаденопатия при бруцеллѐзе является генерализованной, что свидетельствует о гематогенной диссеминации микробов. Размножение и накопление в лимфоузлах

— периодически в крови. Выраженная аллергическая перестройка организма, резко выраженая гиперчувствительность замедленного типа сохраняется длительное время после очищения организма от возбудителя. Бруцеллѐз отличается склонностью к хроническому течению. Формируется иммунитет, но не длительный (через 3—5 лет возможна реинфекция). На проявления бруцеллѐза существенно влияет и вид бруцелл, вызвавших заболевание. Наиболее тяжѐлое течение бруцеллѐза — мелитенсис, остальные вызывают более лѐгкие формы.

6. Туляремия. Биологические свойства возбудителя. Диагностика. Профилактика.

Возбудитель туляремии — Francisella tularensis.

чувствительного животного, а потом делают посев на питательные среды, так как при первичном посеве на питательных средах возбудитель туляремии не растет.

o Питательные среды должны содержать дополнительные факторы роста: кровь, лецитин и цистин. o сравнительно устойчив во внешней среде.

Диагностика:

Используют:

1.Аллергический

25

Тулярин(взвесь убитых туляремийных микробов в изотоническом растворе хлорида натрия с глицерином) вводят внутрикожно или накожно на внутреннюю поверхность предплечья. Положительная реакция появляется через 24—28 ч в виде покраснения и припухлости

2.Серологический

o реакция агглютинации, которая становится положительной на 2-й неделе заболевания. Диагностическим считают титр антител 1 : 100.

o Через 7—10 дней реакцию ставят повторно; увеличение титра антител подтверждает диагноз. С начала 3-й недели заболевания ставят кровяно-капельную реакцию агглютинации. Для этого на предметное стекло наносят толстую каплю крови больного и каплю дистиллированной воды, которая лизирует эритроциты крови, а затем добавляют туляремийный диагностикум. При наличии антител в крови появляются крупные хлопья, что соответствует титру сыворотки 1 : 100.

o Чувствительным методом серологической диагностики является постановка РПГА, в которой антитела выявляются раньше, чем в реакции агглютинации. В качестве антигена используют туляремийный эритроцитарный диагностикум (взвесь формалинизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных туляремийным антигеном).

3.Биологический

Выделить микроб от больного путем посевов патологического материала на питательные среды не удается. Поэтому используют биологический метод. Материал — пунктат из бубонов, гнойное отделяемое язв., кровь и др., предварительно смешанный с изотоническим раствором хлорида натрия, вводят подкожно морским свинкам или белым мышам. Погибших животных вскрывают, готовят мазки-отпечатки из разных органов и делают посевы на специальные питательные среды для выделения чистой культуры и последующей ее идентификации.

Для обнаружения туляремийных микробов у грызунов, павших от туляремии, используют микроскопический, микробиологический, серологический (реакция преципитации с преципитирующей туляремийной сывороткой, реакция нейтрализации антител) и биологический методы исследования.

Профилактика

Среди общих профилактических мероприятий - истребления грызунов.

Для специфической профилактики используют туляремийную живую вакцину Эльберта — Гайского. Вакцинируют те группы населения, которые подвергаются риску заражения (сельскохозяйственные рабочие, охотники, рыбаки и др.). Однократная накожная вакцинация создает прочный иммунитет на 5 лет, после чего проводят ревакцинацию.

7. Зоонозные инфекции. Аллергодиагностика. Специфическая профилактика.

Зоонозные инфекции — инфекционные заболевания, передающиеся человеку от животных. К ним относятся сибирская язва, бруцеллез, ящур, туберкулез, листериоз, туляремия и многие другие. Причиной заболевания человека может быть употребление мяса и молока от больных животных, яиц больной птицы.

Аллергодиагностика

Аллергодиагностика может проводиться как in vitro, так и in vivo(подкожные инъекции анатоксином, АГ м\о) Препараты:

1.Аллергодиагностика туляремии в вопросе 6.

2.Аллергодиагностика сибирской язвы

Ставится на внутренней поверхности предплечья - внутрикожно вводят 0,1 мл антраксина. При положительной реакции через 24 ч появляются гиперемия и инфильтрат.

3.Аллергодиагностика бруцеллеза

широко используют кожно-аллергическую пробу (реакция Бюрне). Бруцеллин (фильтрат 3-недельной бульонной культуры бруцелл) вводят внутрикожно в предплечье в дозе 0,1 мл. При положительной реакции через 24—48 ч возникают покраснение и инфильтрат

4.Аллергодиагностика туберкулеза

внутрикожную пробу с туберкулином (реакция Манту) и накожную пробу Пирке. У инфицированных микобактериями на месте введения туберкулина образуются покраснение и припухлость.

Специфическая профилактика:

o Спец. Проф. Туляремии в 6 вопросе

o Для специфической профилактики используют живую сибиреязвенную вакцину

o Для специфической профилактики бруцеллеза используют живую вакцину, приготовленную из авирулентного штамма 19 ВА Br. abortus. Иммунитет после вакцинации сохраняется 1—2 года

o Используют живую вакцину БЦЖ. Эту вакцину вводят новорожденным однократно внутрикожно на наружную поверхность левого плеча. Ревакцинацию проводят через 7—12 лет и в дальнейшем 4 раза через 3—6 лет. Иммунитет развивается через 3—4 нед и сохраняется 1 — 17,2 года.

8. Зоонозные инфекции. Природно-очаговые инфекции. Особо-опасные инфекции. Карантинные инфекции. Примеры.

Зоонозные инфекции — инфекционные заболевания, передающиеся человеку от животных. К ним относятся:

Причиной заболевания человека может быть употребление мяса и молока от больных животных, яиц больной птицы.

26

Природно-очаговые инфекции-инфекционные болезни, существующие в природных очагах в связи со стойкими очагами инфекции и инвазии, поддерживаемыми дикими животными. К ним относятся:

переносчики, животные-доноры и реципиенты — более или менее постоянные члены биоценозов определенного географического ландшафта.

Особо опасные инфекции(ООИ) - группа острых заразных заболеваний человека, к-рые:

1)способны к внезапному появлению, быстрому распространению и массовому охвату населения;

2)характеризуются тяжелым течением и высокой летальностью.

В группу ООИ включают:

Карантинные болезни - условное название группы инфекционных заболеваний, отличающихся высокой заразительностью (контагиозностью) и часто заканчивающихся смертью. Среди них:

9. Кандидоз. Биологическая характеристика возбудителя. Диагностика. Принципы лечения и профилактика.

Кандидоз (кандидомикоз) – хроническое заболевание, вызываемое дрожжеподобными грибами рода Candida, характеризующееся поражением слизистой оболочки, кожных покровов, внутренних органов, имеющее тенденцию к генерализации и септическому течению, особенно при иммунодефицитах.

Овалтные почкующиеся дрожжевые клетки, псевдогифы и септированные гифы.

Аэробы, факультативные анаэробы.

Ф-ры патогенности:

Протеазы

Поверхностные интегриноподобные молекулы для адгезии к экстрацеллюлярным матриксным белкам

Ростковые трубки

Пути передачи: Контактный Алиментарный

Формы кандидоза:

1.Поверхностный кандидоз слизистой оболочки, кожи, ногтей.

2.Хронический (гранулематозный)

3.Висцеральный

4.Системный (диссеминированный)

Диагностика: Исследуемый материал:

В зависимости от характера и локализации поражения: мокрота, соскоб с кожи или слизистых оболочек, ногтевые чешуйки, кровь, ликвор, моча, желчь, фекалии, пунктаты из закрытых полостей, отделяемое свищей, биопсированный и секционный материал.

1.Микроскопия:

Наличие псевдомицелия в материале на фоне почкующихся дрожжеподобных бластопор.

27

2.Микологический (культуральный)

Посев материала на среду Сабуро, сусло-агар. Колонии беловато-кремовые, выпуклые, круглые.

3.Серологические реации РА, РСК, РП

Результат является положительным при увеличении титра соответствующих антител в 4 и более раз. Для большей надежности исследование на кандидоз проводят 2-3 реакции.

ИФА Кожно-аллергические пробы

Профилактика:

Контроль асептики, стерильности инвазивных процедур в ЛПУ.

10.Актиномикоз — хроническое заболевание, вызываемое различными видами актиномицетов.

Морфология и биологические свойства:

1.одноклеточный, тонкий, ветвящийся мицелий, в виде прямых палочек 2.встречаются короткие палочки и кокки, колбовидные и шаровидные вздутые клетки. 3.спор не образуют 4.грамположительны

5.на плотных питательных средах актиномицеты образуют гладкие или слегка бугристые колонии тестообразной консистенции, бесцветные.

6.растут при 35—37°С

7.факультативные анаэробы.

Устойчивость. Во внешней среде устойчивы, выдерживают нагревание до 60°С в течение часа.

Патогенез и клиника. Источник инфекции: почва Мезанизм передачи-контактный Путь передачи-раневой

1 Повреждѐнная кожа, слизистые 2 на месте проникновения возникают плотные, деревянистой консистенции, малоболезненные инфильтраты — узлы, кожа над

которыми вначале синюшная, а затем багровая.

3 Инфильтраты размягчаются, нагнаиваются и вскрываются с образованием долго не заживающих свищей Биохимическая активность. Хемоорганотрофы. Ферментируют углеводы с образованием кислоты без газа, продукты

ферментации — уксусная, муравьиная, молочная и янтарная кислоты. Наличие каталазы и способность восстанавливать нитраты в нитриты, индол не образуют.

Диагностика.

Микроскопическому исследованию подвергают гной из свищей, мокроту, мочу, пунктаты инфильтратов, кусочки органов из трупов. Из исследуемого материала выбирают желтоватые комочки, помещают на предметное стекло в каплю 10— 20% щелочи, слегка подогревают и микроскопируют. Для актиномикоза характерно наличие каменисто-плотных комочков, хрустящих, как песок, при надавливании и содержащих внутри друзы.

Для выявления анаэробных актиномицетов посев исследуемого материала производят в высокий столбик 1—2% сахарного агара, который заливают вазелиновым маслом и выращивают при 37°С. Аэробные актиномицеты культивируют на чашках с агаром.

Антитела в сыворотке крови больного определяют в РСК, в качестве антигена используя поливалентный актинолизат. РСК положительна в 80—88% случаев актиномикоза. Внутрикожные аллергические пробы ставят с актинолизатом, результаты учитывают через сутки. У больных с тяжелыми формами и при пониженной реактивности они могут быть отрицательными. Профилактика и лечение. Предупреждение актиномикоза связано с санацией и гигиеной полости рта, лечением кариозных зубов, пиореи и различных воспалительных процессов слизистой оболочки полости рта и миндалин. Важна также профилактика травм кожи, особенно стоп у жителей сельской местности. Наилучшие результаты лечения получены при комбинированном применении актинолизата и антибиотиков: пенициллина, стрептомицина, тетрациклинов. Используют витаминотерапию и переливание крови.

11. Плесневые грибы – это разнообразные грибы, формирующие ветвящиеся мицелии без крупных плодовых тел.(

Aspergillus, Penicillium, Botrynis, Monilia, Trichoderma. )

1.Плесень относится к микромицетам.

2. Это грибы микроскопического размеры.

3. общее строение плесневых грибов:

-мицелий в виде тонких, ветвящихся гиф -гифы гриба располагаются на поверхности или внутри субстрата, на котором поселился гриб

4.размножение

5.Клетки плесневых грибов не имеют хлорофилла, в связи с чем, этим грибам требуются для питания готовые органические вещества. Плесневые грибы питаются путем всасывания органических веществ.

28

Плесневые грибы широко распространены в природе, они развиваются практически повсеместно. Большие колонии растут на питательных средах при высокой температуре и повышенной влажности, причем рост плесени не ограничен при условии наличия пищи. Плесневые грибы отличаются неприхотливостью к среде обитания и пище.

Диагностика:

Микроскопический метод. Мокроту в стерильную чашку Петри и рассматривают на черном фоне для обнаружения мелких частиц (комочков). Комочки могут быть гнойные, гнойно-слизистые, гнойно-кровянистые. Размеры комочков варьируют по величине в пределах 0,3-3 мм в диаметре, цвет их может быть серым, желтоватым, зеленоватым. Для приготовления нативных микропрепаратов отдельные комочки переносят бактериологической петлей в каплю спирта с глицерином, либо в каплю 10% раствора КОН. Накрывают покровным стеклом, и микроскопируют при малом и большом увеличениях микроскопа. Бактериологический. Мокроту (отобранные комочки) переносят бактериологической петлей или пастеровской пипеткой на среду Сабуро. Место посева отмечают карандашом с обратной стороны дна чашки Петри.(всегда в 3х местах) Засеянные чашки Петри помещают в термостат крышкой вверх. Температура 37 градусов, 4-5 суток. После определенного срока инкубации засеянные чашки просматривают и при обнаружении спороношения определяют культуру гриба.

В случае наличия роста мицелиального гриба на плотных средах культуру его определяют из этого посева, при отсутствии роста на Сабуро гриб изучают со среды обогащения. Для этого культуру гриба пересевают еще раз на дифференциальную плотную среду Чапека и в дальнейшем идентифицируют.

12) Возбудитель - условно-патогенный дрожжеподобный Cryptococcus neoformans (совершенная форма - Fibbasidielia neoformans). Среди грибов рода Cryptococcus только два вида патогенны для человека и вызывают криптококкоз - С. neoformans (основной возбудитель) и С. laurentii (спорадические заболевания).

Морфология Гриб имеет форму круглых, реже овальных дрожжевых клеток размером 6-13 мкм, иногда до 20 мкм, которые окружены

капсулой, размер которой может достигать 5-7 мкм, а иногда превышает поперечник вегетативной клетки. Капсула состоит из кислого полисахарида, ее размеры находятся в прямой зависимости от вирулентности штамма. Инвазивные формы представлены дрожжевыми клетками, окруженными большой капсулой, придающей им значительные размеры (до 25 мкм).

Культуральные свойства Криптококк неприхотлив, хорошо растет на обычных средах (Сабуро, сусло-агар, МПА), оптимальной является слабокислая

или слабощелочная реакция среды. С. neoformans одинаково хорошо растет как при 25 °С, так и при 37 °С, в то время как сапрофитные криптококки не способны размножаться при 37° С. Образует типичные блестящие сочные колонии, опосредованные наличием полисахаридной капсулы. На агаре Сабуро может формировать блестящие кремово-коричневые колонии.

Биохимическая активность Низкая.

Устойчивость в окружающей среде Достаточно высокая, чувствительны к температурному воздействию.

Источник: криптококк выделен из почвы, гнезд и помета голубей, фруктовых соков, молока, масла. Механизм передачи: аэрогенный, путь передачи воздушно-пылевой.

Патогенез: с пылью криптококки попадают в лѐгкие и формируют первичный очаг воспаления в легких с вовлечением регионарных лимфатических узлов. В большинстве случаев процесс заканчивается спонтанным выздоровлением, Возможна диссеминация гриба из первичного очага в легких. Воспалительный ответ варьирует в зависимости от иммунного статуса пациента. Группу риска по диссеминированию образуют липа с нарушением функций Т-лимфоцитов. В элиминации возбудителя основную роль играют цитотоксические реакции.

Диагностика: Материалом для исследования служат мокрота, гной, соскобы язв, цереброспинальная жидкость, моча, кости, биоптаты тканей.

В нативных препаратах возбудитель, окруженный слизистой желтоватой капсулой, имеет вид округлых или яйцевидных клеток размером 2x5-10x20 мкм. Грибы легко обнаружить во влажных мазках ликвора, окрашенных тушью. Капсулу выявляют в тушевых или окрашенных по Бури-Гинсу препаратах. Гистологические препараты для выявления С. neoformans окрашивают муцикармином.

Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на сахарный агар, среду Сабуро, пивное сусло с добавлением антибиотиков. Посевы инкубируют при 37 °С, колонии формируются через 2-3 нед. На плотных средах образуются колонии от беловато-желтоватого до темно-коричневого цвета, сметанообразной консистенции, па морковнокартофельном агаре колонии гриба имеют темно-коричневую или бурую окраску. Идентификация С. neoformans проводится с учетом образования уреазы на среде Христеансена и неспособности усваивать лактозу и неорганический азот, вирулентности, роста при 37 °С

Лечение Лечение криптококкоза заключается в применении амфотерицина В и флуконазола.

Профилактика

Специфическая профилактика криптококкоза не разработана.

13) Микозы - группа острых и хронических инфекционных заболеваний, вызываемых патогенными и условно-патогенными грибами и характеризующиеся повреждением различных органов и систем.

Возбудители - одноклеточные и мицелиальные грибы, адаптированные к паразитированию в живой ткани. К патогенным грибам относятся: дерматофиты, гистоплазма; к условно-патогенным - кандида, криптококк, плесневые грибы.

Источник инфекции: человек, животные или почва Механизм передачи: контактный, аэрозольный

Патогенные грибы поражают ткани в месте входных ворот и распространяются путѐм инвазии в прилежащие ткани, реже лимфогенно и гематогенно. Условно-патогенные грибы могут входить в состав микрофлоры человека ,колонизирую кожу и слизистые или проявляя инвазивные свойста при снижении резистентности или иммунитета.

29

По преимущественной локализации поражений микозы условно можно подразделить на: поверхностные(кератомикозы, дерматофитии); глубокие с поражением внутренних органов(кандидоз, плесневые микозы, криптококкозы). Микозы как правило сопровождаются значительной аллергизацией и формированием инфекционно-гуморального и клеточного иммунитета.

Для диагностики: используют микроскопический, микологический методы, поиск АГ в крови и ликворе, серодиагностику и аллергодиагностику.

14) При помощи дрожжей (микроскопических грибов, которые имеют не развитый мицелий, а растут в виде отдельных или сцепленных вздутых клеток) производят вина, пиво, хлеб, квасят капусту, солят огурцы, делают колбасы.

ВЕвропе истинные плесени, имеющие развитый мицелий, — микроскопические грибы рода Penicillium, — используют при изготовлении сыров — французских рокфора, камамбера, бри, голубого датского, итальянской горгонцолы, английского стилтона.

Встранах Востока, в Японии плесени рода Aspergillus издавна применяют при производстве спиртных напитков, например рисовой водки саке, при приготовлении продуктов питания из сои, а также разнообразных соусов. А плесневый гриб Aspergillus niger — так пугающая всех чѐрная плесень — начиная с 30-х годов XX века во всѐм мире до сих пор широко применяют в пищевой и фармацевтической промышленности как основной продуцент для производства лимонной кислоты. Многие плесени используют в пищевой и других отраслях промышленности для получения ряда ферментов, органических кислот, витаминов. В пищевой промышленности фермент пектиназу (продукт плесени Penicillium glabrum) используют для улучшения качества, осветления фруктовых соков. Амилазу применяют для гидролиза крахмала, белков сои и риса.

БЛОК 5 1) Гонококки. Биологические свойства. Вызываемые инфекции. Эпидемиология. Патогенез. Клиника.

Профилактика.

Гонококки- нейссерииграмотрицательные пиогенные кокки, относящиеся к роду Neisseria, включающему 8 видов:

Neisseria meningitides, Neisseria gonorrhoeae, N. flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca, N. mucosa, N. flavescens.

Биологические свойства:

-грамотрицательные диплококки, имеют вид попарно расположенных кофейных зерен, бобов -неподвижны, не имеют жгутиков -не образуют спор

-имеют микрокапсулу (определяет адгезию и защищает клетку от фагоцитоза)

-пили имеют сродство к цилиндрическому эпителию (16 вариантов)- обеспечивают прилипание -хемоорганотрофы, лучше растут на среде, содержащей 3-10% СО2

-белки наружной мембраны клеточной стенки ( адгезины)- способствуют адгезии

-клеточная стенка содержит ЛПС, являющийся эндотоксином -гонококки требовательны к пит.средам. Растут на средах, содержащих сыворотку крови человека, асцитическую жидкость.

На плотной пит. Средепрозрачные колонии с ровными краями и блестящей поверхностью. На кровяном агаремелкие прозрачные колонии.

-биохимическая активность –слабая. Расщепляют глюкозу, протеолитической активностью не обладают. Каталаза+, оксидаза+ - Антигенная структура гонококков изменчива. Это связано с наличием многочисленных антигенных вариантов пилей,

которые формируются в процессе развития инфекции.

Вызываемые инфекции:

Гонококковая инфекция (гонорея) -инфекционное заболевание, вызываемое Neisseria Gonorrhoeaе, передаваемое половым путем с преимущественным поражением мочеполовой системы человека.Клинические формы: уретрит, цервицит (у женщин), простатит ( у мужчин), гонококковая ангина, проктит, конъюнктивит ( у детей).

Другие гонококковые инфекции (абсцесс мозга, эндокардит, менингит, миокардит, перикардит, перитонит, пневмония, сепсис, поражение кожи.)

Эпидемиология:

Гонореей болеет только человек. Источник инфекции-больной человек. Пути передачи:

1) половой контакт-основной путь.

2)через инфицированные родовые пути материбленнорея (поражение конъюнктивы глаз)

3) Заражение в быту практически невозможно. Это объясняется тем, что вне организма гонококк довольно быстро гибнет. Кроме того, чтобы заразиться, нужно, чтобы в организм попало немало гонококковых бактерий.

Патогенез и клиника:

Гонореяострое, гнойно-воспалительное заболевание, сопровождающееся миграцией большого количества лейкоцитов в очаг воспаления. Гонококки, попав в организм, прикрепляются с помощью пилей и адгезинов к эпителиальным клеткам слизистых оболочек уретры, половых органов, конъюнктивы глаз, глотки, прямой кишки. Размножаются внутриклеточно, в том числе в лейкоцитах(незавершенный фагоцитоз). При гибели м.о. выделяется эндотоксин.

Инкубационный периодот 2 до 5 дней После перенесенного заболевания иммунитет не формируется. Во время заболевания в сыворотке появляются АТ, не обладающие защитными свойствами.

Профилактика:

Иммунопрофилактика не разработана. Основа профилактических мероприятийправильное половое воспитание, исключение случайных связей, использование презервативов.

2) Гонорея. Формы инфекции. Особенности диагностики. Принципы лечения. Профилактика.

Гонорея- острое, антропонозное, гнойно-воспалительное заболевание, передающееся половым путем, характеризующееся гнойным воспалением слизистых оболочек преимущественно мочеполовой системы. Возбудитель гонореигонококкNeisseria gonorrhoeae, относится к семейству Neisseriaceae.

30