Коферментные функции в трансаминазах выполняет активная форма витамина b6.
В трансаминазной реакции он действует как переносчик аминогрупп в двухступенчатой реакции. Пиридоксальфосфат (ПФ) вначале выполняет функции акцептора аминогруппы от аминокислоты-донора, образуя пиридоксаминфосфат, во второй половине реакции эта аминогруппа переносится на альфа-кетокислотный акцептор, регенерируя пиридоксальфосфат.
Клиническое значение определения активности трансаминаз.
Для клинических целей наибольшее значение имеют две трансаминазы: АлАТ и АсАТ.
АсАТ
АСП + альфа-КТК --------------> ЩУК + ГЛУ
АлАТ
АЛА + альфа-КТК ------------- > ПВК + ГЛУ
В сыворотке крови здоровых людей активность этих трансаминаз в среднем составляет 15-20 Е, по сравнению с десятками и сотнями тысяч единиц во внутренних органах и тканях. Поэтому органические поражения при острых и хронических заболеваниях, сопровождающихся деструкцией клеток, приводит к выходу АсАТ и АлАТ из очага поражения в кровь и их активность в крови возрастает. Наибольшая активность АлАТ приходится на печень, а АсАТ на миокард. Поэтому определение активности АлАТ в сыворотке крови используется для ранней диагностики болезни Боткина, а также ее безжелтушных форм. Высокая активность фермента поддерживается 10-15 дней, затем постепенно снижается. Степень увеличения активности АлАТ коррелирует со степенью тяжести болезни.
Определение активности АсАТ используется для ранней диагностики инфаркта миокарда. Причем увеличение активности наблюдается через 24-36 часов и снижается на 3-7 сутки при благоприятном исходе. При повторном инфаркте наблюдается новый пик увеличения активности АсАТ, поэтому этот тест используется не только для диагностики заболевания, но и для проверки эффективности лечения.
Для дифференциальной диагностики гепатита и инфаркта миокарда используются
коэффициент Де Ритиса:
АсАТ
К = ----------- = 1,5 - 2 (в норме).
АлАТ
Если К > 2 (возрастает активность АсАТ) -- инфаркт миокарда.
Если К < 0,6 (возрастает активность АлАТ) -- болезнь Боткина.
Непрямое окислительное дезаминирование
Как уже упоминалось, все аминокислоты (кроме глутаминовой кислоты) могут окисляться и дезаминироваться только непрямым путем (т. е. через дополнительную стадию трансаминирования).
Непрямое окислительное дезаминирование = трансаминирование + прямое окислительное дезаминирование. (Непрямое окислительное дезаминирование необходимо, т. к. L-оксидазы а/к работают только при pH = 10, а pH организма = 7,4).
Почти все природные аминокислоты сначала реагируют с альфа-кетоглутаратом в реакции трансаминирования с образованием глутамата и соответствующей кетокислоты. Глутамат далее подвергается окислительному дезаминированию под действием глутаматдегидрогеназы.
Таким образом, непрямое окисление – это окисление, когда аминокислоты подвергаются дезаминированию через стадию образования глутамата.
2. Аммиак, пути его образования и механизмы токсичности.
Пути образования аммиака:
Дезаминирование аминокислот
Дезаминирование биогенных аминов
Дезаминирование пуриновых оснований
Дезаминирование пиримидиновых оснований
Дезаминирование амидов аминокислот (аспарагина и глутамина)
Токсичность аммиака:
1. NH3 в тканях протонирован (NH4+), т. е. он связывает H+ и тем самым изменяет КЩБ.
2. NH3 вступает в реакции "насильственного" аминирования альфа- кетокислот, тем самым извлекает из ЦТК важнейшие субстраты и вызывает низко-энергетический сдвиг, т. е. состояние близкое к гипоксическому.
3. NH4+ изменяет соотношение ионов Na+ и K+, т. к. близок к ним по физико-химическим свойствам; следовательно, нарушается водно-электролитный баланс.
4. Обладает нейротоксичностью (изменяет мембранный потенциал нейронов).
5. Способен ингибировать биосинтез белка.
Концентрация NH3 в плазме 25 - 40 мМ/л. При накоплении аммиака возникает кома, нечленораздельная речь, иногда смерть. Аммиак - этиологический фактор почечной недостаточности.