Оценка санитарного состояния почвы по основным микробиологическим показателям

Характеристика почвы	Коли-титр	Перфрингенс-титр	Количество термофильных бактерий в 1 г почвы	Титр нитрифицирующих бактерий
Чистая	1,0 и выше	0,01 и выше	102 - 103	0,1 и выше
Загрязненная	0,9-0,01	0,009-0,0001	103 - 105	0,01- 0,001
Сильно загрязненная	0,009 и ниже	0,00009 и ниже	От 105 до 4х106	0,0001 и ниже

Прямое обнаружение патогенных микробов в почве проводят только при расследовании вспышек инфекционных заболеваний. В качестве косвенных показателей возможного загрязнения почвы патогенными бактериями используют санитарно-показательные микроорганизмы: бактерии группы кишечной палочки, Cl. perfringens, бактерии из рода Proteus, термофильные бактерии.

Наличие в почве бактерий группы кишечной палочки свидетельствует о ее фекальном загрязнении. В загряз­ненных участках почвы коли-титр составляет 1·10־⁴, тогда как в чистых почвах коли-титр может быть равен 1 и выше. Обнаружение Cl. perfringens в почве также указыва­ет на ее фекальное загрязнение.

Методы определения состава и активности почвенных микроорганизмов.

Для оценки деятельности почвенной биоты используют показатель биологической активности почвы. Почвенная биота – это совокупность живых организмов, населяющих почву. В их число входят: бактерии, грибы, актиномицеты, водоросли, микроскопические животные, а также лишайники и зеленая растительность, имеющая в почвах свою корневую зону. Обычно, чем плодороднее почва, тем в ней больше содержится живых организмов, и тем разнообразнее они по видовому составу.

Биологическую активность почвы определяют следующими способами:

- подсчетом общего количества почвенных микроорганизмов.

- определением количества отдельных физиологических групп микроорганизмов, например, нитрифицирующих или целлюлозоразлагающих бактерий. Появление нитрифицирующих бактерий (нитрификаторов) указывает на развитие процесса самоочищения, так как они завершают цикл разложения азотсодержащих соединений, превращая аммиак в азот. При свежем фекальном загрязнении нитрификаторов не будет, поскольку субстрат для их развития отсутствует. В ходе жизнедеятельности микроорганизмов, разлагающих органические вещества, образуется аммиак, что приводит к развитию нитрификаторов.

- определением выделяемого почвой диоксида углерода – биохимический способ определения биологической активности почвы.

Чем интенсивнее выделение углекислого газа из почвы, тем активнее происходят в ней биологические процессы, тем лучше условия для возделывания сельскохозяйственных культур и выше их потенциальная урожайность.

Выделение углекислого газа из почвы в приземный слой атмосферы называют дыханием почвы. Интенсивность дыхания почвы зависит от ее свойств, гидротермических условий, характера растительности, агротехнических мероприятий. Выделение диоксида углерода почвой усиливается при ее окультуренности в связи с активизацией биологических процессов и улучшением условий аэрации. Уменьшение выделения углекислого газа почвой (снижение биологической активности) может ухудшить поступление кислорода в почву, что, в свою очередь, будет способствовать образованию токсичных веществ.

Отбор проб производят с квадратного участка (не менее 5x5 м) из 5 точек - из каждого угла и центра квадрата («метод конверта»). Образцы забирают в условиях асептики с глубины 20-30 см. Объем образцов 1 кг.

Периодичность контроля. Периодичность контроля зависит от контролируемых объектов, но не реже 1 раза в год. При изучении динамики самоочищения почвы на загрязненных территориях пробы берут в течение первого месяца после загрязнения еженедельно, в последующие месяцы - 1 раз в месяц в течение вегетационного периода до завершения активной фазы самоочищения.

Санитарная оценка воды по микробиологическим показателям

Среди объектов, подлежащих микробиологическому контролю, важнейшее место отводится исследованию воды.

В соответствии с действующими нормативными документами контролю подлежат:

вода питьевая (центрального и местного водоснабжения);

вода плавательных бассейнов;

вода открытых водоёмов;

сточные воды;

вода для приготовления инъекционных растворов и глазных капель.

Предупредительный надзор осуществляют при:

решении вопросов водоснабжения и канализации населенных территорий;

санитарной оценке бассейнов, пляжей, мест коллективного отдыха.

Текущий санитарный надзор осуществляют при:

оценке качества питьевого водоснабжения населенных мест;

оценке санитарного состояния поверхностных вод для установления степени влияния биологического загрязнения на способность воды к самоочищению;

контроле над обеззараживанием сточных вод;

обнаружении санитарно-показательных и патогенных микроорганизмов по эпидемическим показаниям для выявления возможного пути передачи инфекционных заболеваний.

Отбор проб. Для отбора проб питьевой воды используют стерильные флаконы ёмкостью 500 мл. Предварительно проводят обжигание водопроводных кранов пламенем и пропускают воду в течение 10-15 мин при полностью открытом кране.

Пробы воды из бассейнов в ходе их эксплуатации отбирают не менее чем в двух точках с 25-30 см от поверхности в количестве одного литра.

Методика исследования. Общее микробное число (общее количество бактерий в 1 см3 воды) позволяет оценить уровень микробного загрязнения воды. Исследуемую воду вносят по 1 мл в стерильные чашки Петри с питательной средой и подсчитывают число выросших колоний. Данный показатель вычисляют путём суммирования среднего арифметического числа бактерий, дрожжей и плесневых грибов и выражают в КОЕ/мл.

Определение колиформных бактерий. Колиформные бактерии – это грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие оксидазной активностью и сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа при 37 оС в течение 24-48 часов. Термотолерантные колиформные бактерии сбраживают лактозу с образованием газа при 44,5 оС в течение 24 часов. Термотолерантные колиформные бактерии быстро отмирают во внешней среде, поэтому их обнаружение свидетельствует о свежем фекальном загрязнении воды.

Для определения колиформных бактерий в питьевой воде используют метод мембранных фильтров. Исследуемую воду (3 пробы по 100 мл) пропускают через бактериальные фильтры из нитроцеллюлозы, которые затем помещают на среду Эндо и инкубируют при 37 оС 24 часа. Подсчитывают количество выросших лактозоположительных колоний.

Определение коли-фагов (бактериофагов E. coli). Наличие фагов бактерий группы кишечных палочек является косвенным показателем возможного присутствия энтеровирусов в исследуемой пробе воды. Коли-фаги вызывают лизис E. сoli, что можно наблюдать по образованию зон лизиса (бляшек) на посеве бактериальной культуры. Исследуемую пробу воды (100 мл) нагревают до 35-44 оС и разливают по 20 мл в стерильные чашки Петри. Затем в каждую чашку заливают по 20 мл засеянного культурой E. сoli питательного агара и аккуратно перемешивают. Через 18 часов инкубации подсчитывают и суммируют все бляшки, образовавшиеся на чашках Петри. Таким образом, получают количество бляшкообразующих единиц (БОЕ) в 100 мл воды.

Санитарная оценка воздуха по микробиологическим показателям

Санитарно-микробиологические показатели воздуха нормируются в зависимости от типа и назначения помещения.

Исследование воздуха на наличие микроорганизмов осуществляют седиментационными или фильтрационными методами.

Седиментационный метод Коха основан на спонтанном оседании бактериальных частиц и капель под действием силы тяжести на поверхность питательной среды открытой чашки Петри. При этом читается, что в соответствии с формулой В.Л.Омелянского на поверхность плотной питательной среды в чашке Петри площадью 100 см² за 10 минут оседает такое количество бактерий, которое содержится в 10 л воздуха.

При фильтрационных методах отбор проб воздуха осуществляется с помощью различных приборов и аппаратов. В частности при использовании аппарата Кротова отбор проб воздуха (по 100 л ) производится над двумя чашками Петри с мясо-пептонным агаром. Посевы культивируют 48 часов при 37 ^оС. После инкубации подсчитывают число колоний на питательной среде и вычисляют количество бактерий в исследуемом воздухе.

Основные показатели санитарного состояния воздуха:

• ОМЧ воздуха – количество колониеобразующих единиц в 1 м³ воздуха;

• присутствие золотистого стафилококка, α- и β- гемолитических стрептококков;

• присутствие дрожжеподобных и плесневых грибов;

• присутствие патогенных микроорганизмов.

• В воздухе особо чистых помещений лечебных учреждений (операционных, родильных залов, боксов для ожоговых больных и недоношенных детей и т.п.) общее количество микроорганизмов в 1 м³ воздуха не должно превышать 200 КОЕ. Золотистый стафилококк, α- и β- гемолитический стрептококк, дрожжеподобные и плесневые грибы должны отсутствовать.

Обеззараживание воздуха закрытых помещений проводят разными способами: УФЛ-аэроионизаторами, вентиляцией.

Контрольные вопросы по теме занятия:

1. Распространение микробов в природе.

2. Микрофлора почвы.

3. Микрофлора воды.

4. Микрофлора воздуха.

5. Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах.

6. Методы определения санитарно-показательных микроорганизмов.

Литература для подготовки к занятию:

Основная литература:

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под ред. А.А. Воробьева. М., 2004.

Дополнительная литература:

1. Л.Б. Борисов. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2002.

2. О.К. Поздеев. Медицинская микробиология. М., ГЭОТАР-МЕДИА, 2005.

3. Медицинская микробиология. Справочник. Под ред. В.И. Покровского и О.К. Поздеева. М., ГЭОТАР-МЕД, 1998.