Извитые формы бактерий

№27

ТРЕПОНЕМЫ

1.

Spirochaetales, Spirochaetaceae, Treponema

Treponema pallidum (ssp. pallidum, endemicum, pertenue)

T. carateum

T. vincentii (возбудитель язвенно-некротической ангины)

T. macrodentinum (микрофлора ротовой полости и половых органов)

- малоустойчивы вне организма человека

- чувствительны к дезинфектантам

- долго сохраняются во влажной среде

2.

• от 8 до 14 равномерных завитков

• может образовывать L-формы и цисты (свёрнутые в шар трепонемы, покрытые непроницаемой слизистой оболочкой)

• по Романовскому-Гимзе – в бледно-розовый цвет (поэтому бледные трепонемы)

• Спор не образуют, капсулы не имеют

• 3 периплазматических жгутика

• Также для об­наружения трепонем распространены методы серебрения по Морозову и не­гативного контрастирования по Бурри

• В клеточной стенке 40% липидов, мало нуклеопротеидов.

3.

Сложная антигенная структура. Выявлено 4 антигенные фракции: белковая, полисахаридная, 2 липидные фракции, одна из которых – фосфолипидная, идентичная кардиолипину бычьего сердца (антигенная мимикрия). Другие фракции специфические (трепонематозные).

4.

Факторы патогенности:

1. Устойчивость к фагоцитозу

2. высокая инвазивная активность

3. эндотоксин

4. липопротеины (участвуют в развитии иммунопатологических процессов)

5.

Облигатные анаэробы, мезофилы, плохо растут на искусственных средах

«Культуральные трепонемы» - теряют вирулентность, патогенность и иммуногенность. «Тканевые трепонемы» - сохраняют вирулентность и другие свойства (лучше размножаются в яичке кролика или курином эмбрионе). Используются для накопления диагностических препаратов.

Можно культивировать на сывороточных средах с добавлением ткани яичка кролика, печёночной, мозговой ткани, в столбике полусвёрнутой лошадиной сыворотки, в глубине асцитического агара с добавлением свежей ткани кролика.

6.

Биохимические свойства изучены мало

7.

Основные методы – бактериоскопический и серологический.

Материал: отделяемое шанкра, пунктат лимфоузлов (для дифференцировки бледной трепонемы от вульгарных трепонем), соскоб сыпи при вторичном сифилисе (сифилидов).

1. Микроскопическое выявление

• микроскопия нативного препарата («висячая» или «раздавленная» капля) в тёмном поле и фазово-контрастная микроскопия для выявления морфологии и подвижности

• длительная окраска по Романовскому-Гимзе

• обработка серебрением (по Морозову)

• Негативная окраска по Бурри

2. Серологический метод диагностики сифилиса

Доказана антигенная мозаичность трепонем. В связи с этим и наличие в сыворотке крови больного соответственной множественности видов Ат (реагины, комплементсвязывающие антитела, агглютинины, иммобилизины и др.). При каждой стадии сифилиса преобладают те или иные антитела, и, следовательно, одни реакции могут быть положительными, а другие еще отрицательными. Поэтому при диагностике необходимо использовать комплекс серологических реакций (КСР):

►Реакция микропреципитации типа VDRL с кардиолипиновым антиге­ном с целью выявления антител в инактивированной сыво­ротке крови - экспресс-метод.

►РСК с трепонемным и кардиолипиновым антигеном - реакция Вассермана

►РИТ - реакция иммобилизации трепонем.

►РИП - реакция иммунного прилипания.

►РИФ - реакция иммунофлюоресценции (непрямой вариант).

►ИФА

В серологических реакциях могут наблюдаться ложноположительные результаты, которые обусловлены аутоантителами при заболеваниях с нарушением иммунитета (системная красная волчанка, ревматизм и др.) и в ряде других состояний макроорганизма, например, во время менструа­ций, за две недели до родов, после приема алкоголя, жирной пищи. По­этому серологические реакции считают вспомогательной методикой, подтверждающей данные клинической картины, и результаты других ла­бораторных исследований.

Отборочные реакции.

Эти реакции используются для обследования лиц, подлежащих перио­дическим медицинским осмотрам на венерические болезни, больных сома­тическими заболеваниями и других контингентов. При изолированном при­менении эти реакции не являются диагностическими, в связи с чем на основании их позитивности диагноз сифилис не устанавливают, обследованного направляют к дерматовенерологу. Обычно с этой целью используют реак­цию микропреципитации с сывороткой больного (качественная и количественная методика), также РНГА (как вариант – микрогемаагглютинация с бледными трепонемами – МГА-ТР). Реакцию микроагглютинации учитывают через несколько минут по просветлению жидкости и появлению хлопьев.

Диагностические подтверждающие реакции при сифилисе.

Используется комплекс серологических реакций КСР:

►Реакция Вассермана с двумя антигенами - кардиолипиновым и трепонемным,

►р-ция микропреципитации типа VDRL,

►РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем)

►РИФ.

При разных формах сифилиса специфич­ность и чувствительность реакций неодинаковы!

Стандартная реакция Вассермана (РВ) ставится в трех рядах пробирок с использованием двух антигенов: кардиолипинового - неспецифического и трепонемного антигена - специфического.

Принцип реакции: кардиолипиновый антиген КЛАГ позволяет выявить реагины – аутоантитела к веществу митохондриальных мембран. В качестве КЛАГ используют спиртовой экстракт бычьего сердца, обогащённого холестерином и лецитином. В качестве специфического антигена используют экстракт из бледных трепонем, обработанных ультразвуком. Для индикации используют гемолитическую систему из эритроцитов барана и гемолитической кроличьей сыворотки

Специфи­ческие антитрепонемные AT (если они есть в сыворотке обследуемого) вступают в соединение со специфическим АГ (или КЛАГ вступает в соединение с реагинами сыворотки). Образовавшийся ИК связывает комплемент – РСК+ (гемолиз отрицательный).

РИТ для определения антитрепонемных антител. С этой целью исполь­зуют сыворотку больного, живые тканевые трепонемы, комплемент. Реак­цию ставят в стерильных пробирках и через 20 часов инкубациив термостате оценивают в темном поле результаты по проценту обездвиженных трепо­нем. Если обездвижены более 50% трепонем, реакция положительная, 31-50% - слабоположительная, меньше — отрицательная.

РИФ (непрямая): на препарат с фиксированными трепонемами нано­сят сыворотку больного, антитела связываются, после инкубации и промы­вания добавляют АТС, меченную ФИТЦ. При положительной реакции на­блюдается свечение трепонем.

РИП: вирулентные тканевые трепонемы сенсибилизируют сывороткой больного в присутствии комплемента и эритроцитов. При наличии антител в сыворотке больного трепонемы в комплексе с антителами, комплементом и эритроцитами исчезают из надосадочной жидкости в результате прилипания и осаждения.

Используют также РПГА с трепонемным эритроцитарным диагностикумом, ИФА с трепонемным антигеном.

Неспецифические тесты (с кардиолипиновыми антигенами)

• РСК (Вассермана)

• РП на стекле (предварительное обследование)

• РНГА (экспресс-диагностика)

Специфические тесты (с трепонематозными антигенами)

• РСК (Вассермана)

• реакция иммобилизации

• РИФ

• ИФА

8.

Общая характеристика заболевания

• циклическое

• стадии (периоды) не всегда сменяются последовательно

• образование L-форм и цист

Сифилис: периоды

Инкубационный - От 10 до 90 суток (в среднем – 24 дня)

1. Первичный сифилис (2-3 месяца, серонегативный, серопозитивный)

После проникновения в ткани спирохеты размножаются, частично гибнут, выделяют эндотоксин, вызывая местное воспаление. У входных ворот возникает уплотнение, инфильтрат, в центре которого образуется безболезненная язва со скудным серозным отделяемым – «твёрдый шанкр» (первичная сифилома). Постепенно твёрдый шанкр рубцуется. Через 5-10 дней - региональный лимфаденит (место вторичной локализации трепонем). Из лимфоузлов возбудитель проникает в кровь и органы. В первые 3 недели серологические реакции отрицательны, с 4-ой недели они становятся позитивными

2. Вторичный сифилис (через 6-7 недель после появления шанкра)

Фаза генерализованной инфекции с поражением внутренних органов и ЦНС. Характерны высыпания на коже и слизистых (вторичный «свежий» сифилис). Под влиянием ИС спирохеты гибнут → исчезновение высыпаний → латентный период. Часть трепонем сохраняется в ЛУ и внутренних органах. При снижении ИС может развиваться вторичный рецидивирующий сифилис (рецидивирующая сыпь).

Исходы вторичного периода:

- 25 % - выздоровление

- 25 % - переход в латентную фазу (длится от 3 до 30 лет)

- 50 % - переход в третичный период

3. Третичный сифилис

При отсутствии лечения (обычно через 3-4 года). В кожных покровах, ЦНС, костях формируются гранулемы – гуммы, которые склонны к распаду и рубцеванию, что серьёзно нарушает работу органов (висцеральный сифилис).

4. Нейросифилис (четвертичный сифилис)

При неадекватном лечении у части больных (через 8-15 лет)

Врождённый сифилис: условия возникновения

◘ Инфицирование плода во вторую половину беременности

◘ Инфицирование ребёнка при прохождении через родовые пути больной женщины

Часто выкидыши и мертворождения. В случае рождения ребёнка клинические проявления могут быть сразу (ранний врождённый сифилис) либо в возрасте 5-15 лет (поздний). Ранняя форма – сыпь, поражения внутренних органов (печень, селезёнка) и ЦНС (менингиты, энцефалиты). Поздняя форма – триада Хатчинсона (паренхиматозный кератит, «бочкообразные зубы» и глухота от поражения лабиринта).

9.

ИИ – человек (в первичной и вторичной стадии)

МП – контактный (чаще – половой). Дополнительный механизм передачи трансплацентарный (начиная с 5 месяца беременности) и трансфузионный

Входные ворота – повреждённая кожа и слизистые оболочки

10.

• Иммунитет нестойкий, нестерильный.

• Восприимчивость к сифилису у человека высокая

• КИО и инфекционная аллергия → гранулемы (фиксация), ГИО не эффективен

Профилактика неспецифическая:

• постоянный половой партнёр

• выявление и лечение больных

• обследование доноров, беременных (лечение в первую половину беременности), групп риска (наркоманов, лиц, практикующих промискуитет)

Специфическая не разработана

Антибиотики пенициллинового ряда

Бытовые трепонематозы:

Фрамбезия (тропический сифилис) – тропические страны Африка, Индия, Индонезия, центральная Америка – T.pertenue

Пинта (хронический трепонематоз) – эндемичные очаги в прибрежных районах центральной и южной Америки, Экв. Африки, южной Азии – T. carateum

Беджель (невенерический или эндемичный сифилис) – хронический генерализованный спирохетоз – эндемичные очаги в Африке, на Балканах, в Турции, на Аравийском полуострове, в Индии, Пакистане, Австралии и Гаити - T.endemicum (bejel)

Пути заражения:

Фрамбезия – контактный (очень редко половой) через повреждённые кожные покровы, может передаваться мухами

Пинта – как при фрамбезии

Беджель – контактный, через повреждённые кожные покровы, наиболее часто болеют дети 2-10 лет

Клинические проявления:

• фрамбезия – как при сифилисе; прогноз благоприятный, хотя может затягиваться до 30 лет, развивается стойкий постинфекционный иммунитет

• пинта – появление на коже красных или сине-фиолетовых пятен с последующим формированием на их месте очагов депигментации; может развиваться полиаденит, реже – поражения внутренних органов, нервной системы и костей

• беджель – как при вторичном и третичном сифилисе (но поражения внутренних органов не развиваются)

№28

БОРРЕЛИИ

1.

► Возбудитель эпидемического возвратного тифа

• Borrelia recurrentis (размножается в гемолимфе платяных вшей)

►Возбудители клещевых спирохетозов (эндемических возвратных тифов), переносчики клещи-орнитодорины

• B. duttoni

• B. uzbekistanica

• B. persica

• B. caucasica и др.

Друг от друга отличаются антигенной структурой

►Возбудитель болезни Лайма (переносчики - иксодовые клещи) - B. burgdorferi

2.

Крупные извитые формы бактерий с 3-9 неравномерными завитками различной амплитуды. 7-30 аксиальных фибрилл. Очень подвижны! Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями в отличие от других спирохет. По Романовскому-Гимзе становятся сине-фиолетовыми.

3.

Антигенная структура боррелий сложная

Внутригеномная рекомбинация → чрезвычайная вариабельность

Поэтому серологическая идентификация не имеет значения.

4.

Эндотоксин и подвижность

5.

• похожи на червей

• строгие анаэробы

• Среды с животными белками, кусочками печени, свёрнутый яичный белок. Рост скудный, видимый через 4-7 суток

• Лучше культивируются в куриных эмбрионах

6.

Мало изучена

7.

1. Лабораторная диагностика Эпидемического возвратного тифа и эндемичных клещевых тифов:

- бактериоскопия (мазок крови во время приступа)

- биопробы на морских свинках (остаются здоровы, при эндемическом возвратном тифе – больны)

- экспресс-диагностика (РИФ, ПЦР, ИФА для определения антигенов и генов возбудителя в патологическом материале

- Серодиагностика (реакция иммобилизация боррелий РИБ, ИФА, РИФ)

2. Лабораторная диагностика Болезни Лайма:

- Бактериологический (выделение культуры из ткани эритемы, крови, ликвора (трудно)

- Экспресс-диагностика - Ag в ткани эритемы (РИФ)

- Выявление Ig (иммуноблоттинг)

IgM (на 3-6 неделе после инфицирования)

IgG (через несколько месяцев после инфицирования)

- Основной метод – клинический!

8.

▓ Эпидемический возвратный тиф – антропонозное трансмиссивное заболевание, характеризующееся общей интоксикацией, волнообразной лихорадкой, поражением печени и селезёнки, иногда желтухой, менингитом, поражением других внутренних органов.

Патогенез: боррелии захватываются лейкоцитами → выход в кровь → лизис возбудителя иммуноглобулинами и выход эндотоксина → приступ лихорадки (активация макрофагов и синтез пирогенна ИЛ-1) → освобождение от преобладающего серовара → сохранение других сероваров в органах или лимфоузлах→ повторный выход в кровяное русло нового серовара → новый приступ (может быть несколько приступов в течение болезни).

◘ Во время приступа наблюдается повышение температуры, головная и мышечная боль, повреждаются паренхиматозные органы, ССС (геморрагии на коже и в органах), ЦНС. Приступ длится 5-7 дней. Затем наступает этап апирексии (5-9 дней)

▓ Клещевые спирохетозы – острое трансмиссивное природно-очаговое заболевание, протекающее в виде лихорадочных приступов (может быть 5-6 приступов) с периодами нормальной температуры. Протекает более легко, приступы более короткие.

Эндемичные очаги расположены на всех континентах, кроме Австралии. Для каждого природного очага – свой вариант возбудителя.

▓ Болезнь Лайма – системная природно-очаговая трансмиссивная инфекция, характеризующаяся кольцевой мигрирующей эритемой, лихорадкой, поражением ЦНС, ПНС, ССС, опорно-двигательного аппарата (суставов).

Фазы заболевания:

1. Локальное поражение (кольцевая мигрирующая эритема)

2. Невралгические и кардиальные расстройства (несколько недель или месяцев)

3. Артритические поражения (через несколько лет)

9.

Эпидемический тиф

ИИ - антропоноз

МП – трансмиссивный (переносчики – платяные вши). При укусе наблюдается зуд, человек при почёсывании раздавливает вошь и втирает содержимое гемолимфы в кожу

Иммунитет - нестойкий

Эндемический тиф

ИИ – грызуны

МП - трансмиссивный (переносчики – клещи из рода Ornithodorus, у которых происходит трансовариальная передача возбудителя, что обеспечивает эндемичность инфекции). На месте укуса – розовое пятно, затем образуется узелок с геморрагическим ободком, из которого боррелии поступают в кровь.

Иммунитет – стойкий.

Болезнь Лайма: эпидемиология

Источники инфекции – мелкие грызуны, олени, лоси

Переносчики – Ixodes (ареал обитания = район распространения болезни Лайма)

Механизм передачи - трансмиссивный

10.

Специфической профилактики нет. При эндемичном тифе у населения развивается естественный иммунитет в результате бытовой иммунизации. Болеют в основном приезжие.

Неспецифическая профилактика – уничтожение вшей (борьба с педикулёзом), дератизация, меры по предотвращения укусов.

№29

ЛЕПТОСПИРЫ

1.

Сапрофитические (водные) виды L.biflexa

Патогенные виды - L.interrogans

Долго сохраняются в заболоченной почве (до 200 суток)

2.

►Толщина 0,1 мкм

►Завитки первого порядка (как «верёвка») 12-20 завитков

►Завитки второго порядка (как S или С буквы)

►На концах – крючкообразные структуры

Слабо окрашиваются анилиновыми красителями. По Романовскому-Гимзе становятся красными

3.

Более 200 сероваров (в СНГ – 27), объединены в 38 серогрупп (в СНГ – 13)

4.

1. Эндотоксин (→ общая интоксикация и геморрагии)

2. Высокая подвижность

3. Инвазивность

4. Устойчивость к фагоцитозу (внутриклеточные паразиты, как и все остальные спирохеты)

5. Ферменты вирулентности (фибринолизин и плазмокоагулаза)

6. Малоизученные экзотоксиноподобные вещества

5.

Микроаэрофилы или аэробы, 30^оС

Жидкие и полужидкие среды с сывороткой кролика (напр. Водно-сывороточная среда Уленгута). Рост медленный через 5-7 суток. Оценивают рост при микроскопии жидкой среды в «тёмном поле» (типичных колоний не образуют)

6.

Мало изучена

7.

Патологический материал:

- кровь – 1 неделя

- моча – со 2 недели

- liquor – при менингиальных симптомах

1. Основной способ микроскопического выявления - Тёмнопольная микроскопия «раздавленной капли» и окраска по Романовскому-Гимзе

2. Культуральный метод

Среда Уленгута → микроскопия каждые 2 дня → реакция микроагглютинации и лизиса для идентификации культуры (используется поливалентная сыворотка, ставится на стекле, оценивается при микроскопии агглютината в «тёмном поле» ►при положительном результате видны клубки из лептоспир.

3. Биологический метод (внутрибрюшинно - морская свинка - потеря веса и желтуха - экссудат из брюшной полости)

4. Серологический метод

- со второй недели заболевания

- реакция микроагглютинации и лизиса (количественный вариант для определения титра) или РНГА

8.

ЛЕПТОСПИРОЗ – острое природно-очаговое зоонозное инфекционное заболевание, характеризующееся интоксикацией, миалгией, поражением почек, печени, ССС, нервной системы.

Патогенез: возбудитель от входных ворот лимфогенным и гематогенным путём распространяется по организму и благодаря наличию токсических веществ, ферментов вызывает поражение паренхиматозных органов (особенно печень, селезёнка, почки).

Патогенез поражения при лептоспирозе сосудов: механическое воздействие на эндотелий → нарушение проницаемости стенки → множественные геморрагии

Патогенез поражения при лептоспирозе печени:

- механическое повреждение гепатоцитов активно подвижными лептоспирами

- токсическое действие метаболитов и продуктов распада лептоспир → развивается желтушная форма лептоспироза (наиболее тяжёлая)

Патогенез поражения при лептоспирозе почек: избирательное депонирование лептоспир на поверхности эпителиальных клеток или в межклеточном пространстве →тяжёлое повреждение почечных канальцев → нарушение мочеобразования

Патогенез поражения при лептоспирозе ЦНС:

- непосредственное действие самих бактерий

- действие их токсинов

- действие продуктов распада бактериальных клеток → менингиальные явления

9.

Повсеместное распространение

ИИ – животные (выделяя возбудителя с мочой, инфицируют объекты внешней среды, чаще воду, также почву, пищевые продукты)

МП – водный, реже алиментарный и контактный

ВИ – слизистые, повреждённая кожа.

Иммунитет стойкий, типоспецифический.

10.

Препараты для иммунопрофилактики лептоспироза (особенно у работников животноводческих ферм):

- убитая поливалентная вакцина

- антилептоспирозный иммуноглобулин

Неспецифическая профилактика: санитарный контроль, ветеринарный надзор, дератизация, запрет на купание.

Лечение: антибиотики и иммуноглобулин.