40. Иммуноблотинг (вестерн-блотинг). Проведение и учет результатов. Варианты применения метода.
41. Радиоиммунный анализ, сущность, способы постановки, методы учета и оценки реакций.
42. Количественное определение числа В-лимфоцитов методом розеткообразования.
43. Количественное определение основных классов иммуноглобулинов в биологических жидкостях.
44. Методы определения циркулирующих иммунных комплексов.
45. Аллергия. Классификация аллергенов. Фазы протекания аллергических реакций.
Аллергия ( allos + ergon, в переводе- другое действие) - состояние патологически повышенной чувствительности организма к повторному введению антигена. Антигены, вызывающие аллергические состояния, называют аллергенами. Аллергическими свойствами обладают различные чужеродные растительные и животные белки, а также гаптены в комплексе с белковым носителем.
Аллергические реакции - иммунопатологические реакции, связанные с высокой активностью клеточных и гуморальных факторов иммунной системы (иммунологической гиперреактивностью). Иммунные механизмы, обеспечивающие защиту организма, могут приводить к повреждению тканей, реализуясь в виде реакций гиперчувствительности.
Классификация Джелла и Кумбса выделяет 4 основных типа гиперчувствительности в зависимости от преобладающих механизмов, участвующих в их реализации.
По скорости проявления и механизму аллергические реакции можно разделить на две группы - аллергические реакции (или гиперчувствительность) немедленного типа (ГНТ) и замедленного типа (ГЗТ).
Основные классы аллергенов:
•пыльцевые аллергены;
• аллергены условно патогенных микроорганизмов и грибов (плесеней);
•эпидермальные аллергены;
•ингаляционные аллергены;
•пищевые аллергены;
•аллергены насекомых;
•промышленные аллергены;
•парфюмерные вещества;
•бытовые аллергены;
•лекарственные аллергены и др.
46. Реакции гиперчувствительности немедленного типа (анафилактические реакции, цитотоксические реакции, реакции, обусловленные иммунными комплексами). Аллергены. Патогенетические схемы развития клинические проявления.
Аллергические реакции гуморального (немедленного) типа обусловлены главным образом функцией антител классов IgG и особенно IgE (реагинов). В них принимают участие тучные клетки, эозинофилы, базофилы, тромбоциты. ГНТ делят на три типа. По классификации Джелла и Кумбса к ГНТ относятся реакции гиперчувствительности 1, 2 и 3 типов, т.е. анафилактическая (атопическая), цитотоксическая и иммунных комплексов.
ГНТ характеризуется быстрым развитием после контакта с аллергеном (минуты), в ней участвуют антитела.
Тип 1. Анафилактические реакции - немедленного типа, атопические, реагиновые. Они вызываются взаимодействием поступающих извне аллергенов с антителами класса IgE, фиксированными на поверхности тучных клеток и базофилов. Реакция сопровождается активацией и дегрануляцией клеток- мишеней с высвобождением медиаторов аллергии (главным образом гистамина). Примеры реакций типа 1 - анафилактический шок, атопическая бронхиальная астма, поллиноз.
Тип 2. Цитотоксические реакции. В них участвуют цитотоксические антитела (IgM и IgG), которые связывают антиген на поверхности клеток, активируют систему комплемента и фагоцитоз, приводят к развитию антитело- зависимого клеточно- опосредованного цитолиза и повреждения тканей. Пример- аутоиммунная гемолитическая анемия.
Тип 3. Реакции иммунных комплексов. Комплексы антиген- антитела откладываются в тканях (фиксированные иммунные комплексы), активируют систему комплемента, привлекают к месту фиксации иммунных комплексов полиморфноядерные лейкоциты, приводят к развитию воспалительной реакции. Примеры- острый гломерулонефрит, феномен Артюса.
I тип – медиаторный, анафилактический (опосредованный IgE).
Возникает на экзогенные Т-зависимые антигены.
Аллергены – лекарственные, пыльцевые, бактериальные, инсектные антигены.
Путь проникновения – парентеральный, ингаляционный, алиментарный.
Проявления:
Анафилотоксия – возникает чаще на лекарственные препараты, укусы пчел – резкое снижение АД, симптомы удушья, судороги, потеря сознания при анафилотоксическом шоке. При местной анафилотоксии – те же симптомы, но наступают медленно. Атопии – при наследственной предрасположенности, болеет только человек.
а. бронхиальная астма;
b. крапивница (шоковый орган – эпителий кожи и эндотелий сосудов
II тип – цитотоксический
– развивается на простые химические вещества, компоненты клеточной мембраны, неклеточные структуры.
Условие возникновения – много аллергена, аллерген прикрепляется к клеткам (например, к эритроцитам).
Шоковые клетки – чаще всего клетки крови, эндотелий сосудов, гепатоциты, эпителий почек.
Когда аллерген прикрепляется к клеткам, то их поверхность становится антигенно – чужеродной, возникает гуморальный иммунный ответ, синтезируются Ig G и M, разрушаются клетки, аллерген исчезает. Это явление получило название антителозависимой цитотоксичности.
Проявления реакции ГНТ II типа:
гемолитическая анемия;
лейкопения;
тромбоцитопения; гломерулонефрит; иммунный тиреоидит; поражения печени, сердца.
III тип -иммунокомплексный.
Эти аллергические реакции развиваются в тех случаях, когда организм длительное время подвергается воздействию избытка аллергена.
Подобные ситуации возможны при персистирующей инфекции, развитии аутоиммунных процессов или часто повторяющемся контакте с внешним аллергеном.
В основе механизма этого типа реакций лежит образование нерастворимых комплексов АГ-АТ, которые способны длительное время циркулировать в крови или концентрироваться в определённых тканях, прежде всего на эндотелии сосудов. Накопление иммунных комплексов на поверхности сосудистого эндотелия влечёт за собой ряд событий, основные из них:
агрегация тромбоцитов, которая сопровождается образованием микротромбов и освобождением вазомоторных аминов; активация комплемента с образованием анафилатоксинов, вызывающих освобождение медиаторов из тучных клеток;
фагоцитоз нейтрофилами иммунных комплексов, но последние ввиду своей токсичности, разрушают нейтрофилы,поэтому высвобождаются лизосомальные ферменты, вызывающие тканевые повреждения.