Министерство здравоохранения Республики Беларусь

Учреждение образования «Гомельский государственный медицинский университет»

Кафедра биохимии

А. И. Грицук, в. Т. Свергун, а. Н. Коваль

БИОХИМИЯ

практикум

Темы занятий

занятие 1 Вводное занятие. Современные биохимические методы исследования

Занятие 2 Строение и функции белков

занятие 3 Ферменты-1. Строение и функции белков. Строение, свойства, номенклатура и классификация ферментов.

занятие 4 Ферменты-2. Механизм действия ферментов

занятие 5 Ферменты-3. Медицинская энзимология

ЗАНЯТИЕ 6 Биологическое окисление-1. Цикл Кребса. Пути потребления кислорода в организме.

занятие 7 Биологическое окисление-2. Тканевое дыхание. Окислительное фосфорилирование. Микросомальное и перекисное окисление.

занятие 8 Контрольное занятие по разделам «Введение в биохимию», «Энзимология и биологическое окисление».

Гомель 2013

1. Введение в биохимию

Занятие 1

Вводное занятие. Современные биохимические методы исследования

Цель занятия: знакомство с правилами внутреннего распорядка на кафедре биохимии, с правилами работы в химической лаборатории и правилами техники безопасности. Знакомство основными методами биохимических исследований.

Структура занятия

1. Теоретическая часть

1. Ознакомление с правилами внутреннего распорядка на кафедре биохимии и правилами работы в химической лаборатории. Проведение инструктажа по технике безопасности. Знакомство со структурой курса биохимии.

2. Биохимия как фундаментальная медико-биологическая наука. Значение биохимии в подготовке врача.

3. Характеристика основных биохимических методов, используемых в эксперименте и клинике:

а) на уровне целого организма:

• наблюдение за организмом:

  • при удалении органа;

  • изменении диеты (голодание или усиленное питание);

  • приеме лекарств;

  • введении специфических ядов и токсинов;

• наблюдения за человеком и животными со специфическими заболеваниями;

• использование ЯМР-спектроскопии и др.;

б) перфузия изолированного органа;

в) использование тканевых срезов;

г) использование целых клеток;

д) использование гомогенатов;

е) выделение изолированных клеточных органелл;

ж) метод субфракционирования клеточных органелл;

з) выделение метаболитов и ферментов;

и) клонирование генов, кодирующих ферменты и другие белки.

2. Практическая часть

   1. Применение Международной системы единиц (СИ) в международной лабораторной практике.

   2. Особенности работы в биохимической лаборатории.

   3. Инструктаж по технике безопасности.

   4. Устройства и приборы, применяемые в биохимической лаборатории. Правила работы с ними.

Задачи

1. Согласно термина «биохимия», в живых организмах изучается:

1. переход количества в качество;

2. взаимодействие живых организмов с веществом;

3. превращения вещества и энергии;

4. количественный состав;

5. качественный состав?

(ответ: г, д)

2. Для изучения остаточного азота в плазме крови необходимо избавиться от белков, осаждением их трихлоруксусной кислотой. К какому этапу исследования относится эта процедура?

1. выделение изолированных клеточных органелл;

2. метод субфракционирования клеточных органелл;

3. выделение метаболитов и ферментов;

4. клонирование генов, кодирующих ферменты и другие белки.

(ответ: в)

3. Катаболизм белков сопровождается синтезом в печени мочевины CO(NH₂)₂. Среднее содержание азота в белке 16%. Какое количество мочевины (моль) может образоваться при катаболизме 175 г белка?

(ответ: 175*0,16/14/2=1 моль)

4. Большинство биохимических показателей концентрации веществ выражается в единицах СИ моль/л. Почему для концентрации белка в сыворотке крови (65-85 г/л) не используются эти единицы?

(ответ: из-за гетерогенности белков сыворотки крови)

Применение Международной системы единиц (СИ) в международной лабораторной практике

Для усвоения данного материала используются учебные пособия и таблицы единиц СИ.

Особенности работы в биохимической лаборатории

Студенты знакомятся с правилами проведения занятий и правилами работы в биохимической лаборатории.

Инструктаж по технике безопасности

Студенты знакомятся с инструкциями по технике безопасности и пожаробезопасности, получают дополнительный инструктаж от преподавателя и расписываются в журнале техники безопасности.

Лабораторные работы

Лаборатоpная работа. Устройства и приборы, применяемые в биохимической лаборатории. Правила работы с ними.

Студенты под руководством преподавателя знакомятся с проведением исследований в биохимической лаборатории, а также с правилами пользования пипетками, центрифугой, термостатом, фотоэлектроколориметром и рефрактометром.

Работа с микропипетками включает ряд навыков и умений: сменять наконечник, правильно использовать 2 упора хода поршня (первый упор – для точного отмеривания заданного количества, второй упор – для внесения образца в пробирку или колбу). Перед внесением пробы убедиться, что в отобранном образце нет пузырьков воздуха. В пипетках с вариабельным объемом требуемый объем устанавливается путем вращения лимба с цифровым индикатором.

Рекомендуемая литература

Основная

1. Биохимия: Учебник для вузов / Под ред. Е.С. Северина. – 4-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. – С. 69-73.

2. Филиппович, Ю. Б. Основы биохимии. – 4-е изд. – М.: Агар, 1999. – С. 15-22.

3. Марри, Р. и др. Биохимия человека: в 2-х т.: Пер. с англ., М.: Мир, 2004. – Т.1: С. 16-20.

Занятие 2

Строение и функции белков

Цель занятия: Изучить структуру и физико-химические свойства белков. Научиться определять содержание общего белка в плазме крови биуретовым методом.

Исходный уровень знаний и навыков

Студент должен знать:

1. Основные правила техники безопасности при работе в химической лаборатории.

2. Строение и классификацию альфа-аминокислот.

3. Кислотно-основные свойства аминокислот. Реакции на их функциональные группы.

4. Уровни структурной организации белка.

5. Особенности строения пептидной связи.

6. Качественные реакции на белки и пептиды.

7. Комплексные соединения (комплекс меди в биуретовой реакции).

Студент должен уметь:

1. Проводить качественные реакции на белки и пептиды.

Структура занятия