- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •V семестра специальная микробиология. Вирусология.
- •2. Принципы самостоятельного изучения частной медицинской микробиологии
- •3. Изучение вопросов патогенеза инфекционных заболеваний
- •4. Принципы терапии инфекционных заболеваний
- •Микробиологический диагноз
- •В о з б у д и т е л я :
- •Аллергическим ретроспективная
- •1. Общая характерстика гноеродных кокков
- •2. Стафилококки
- •Дифференциация стафилококков
- •4. Стрептококки
- •Грамнегативные кокки
- •6. ГонококКовая инфекция
- •Лекция 13. Спирохеты
- •2. Treponema
- •Лечение.
- •3. Патогенные лептоспиры
- •4. Патогенные боррелии
- •Лекция 14. Клостридии
- •1. Патогенные клостридии
- •2. Клостридии столбняка
- •Клостридии ботулизма
- •5. Работы сотрудников кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Одесского государственного медицинского университета по проблеме патогенеза клостридиальных инфекций
- •Лекция № 15. Вибрионы
- •1. Холерный вибрион
- •Лекция № 16. Возбудители зоонозных инфекций
- •1. Бруцеллы
- •2. Возбудитель туляремии
- •3. Иерсинии
- •4. Возбудитель чумы
- •6. Возбудитель сиБиРСкой язвы
- •7. B. Cereus
- •Лекция № 17. Коринебактерии. Микобактерии
- •2.Недифтерийные коринеформные бактерии
- •3. Микобактерии
- •2. Возбудитель туберкулеза
- •3. Возбудитель лепры
- •Лекция № 18. Эшерихии. Шигеллы.
- •1. Семейство enterobacteriaceae
- •2. Escherichia
- •3. Shigella
- •4. Лабораторная диагностика эшерихиозов и дизентерии
- •1. Сальмонеллы брюшного тифа в паратифов
- •Дифференциация сальмонелл
- •Серологическая классификация сальмонелл
- •2. Сальмонеллы - возбудители гастроэнтероколитов (сальмонеллезов)
- •Лекция № 20. Риккетсии. Хламидии. Микоплазмы
- •1. Общая характеристика хламидий
- •2. Хламидийные инфекции у человека
- •3. Микоплазмы
- •5. Кардинальные особенности вирусов
- •6. Принципы культивирования вирусов
- •6. Природа и происхождение вирусов
- •1. Инфекционные свойства вирусов
- •2. Особенности вирусНой инфекцИи
- •3. Иммунитет при вирусных инфекциях
- •4. Иммунопрофилактика вирусных заболеваний
- •Вирусные вакцины для широкого применения
- •5. Химиопрофилактика и химиотерапия вирусных заболеваний
- •2. Ортомиксовирусы
- •2. Ортомиксовирусы Ортомиксовирусы
- •Номенклатура
- •Полиовирусы
- •5. ПарвовирусЫ
- •РетровИрусы.
- •1. Вирусы гепатитов
- •4. Другие вирусы гепатитов
- •5. Онкогенные Вирусы
- •Днк-содержащие онкогенные вирусы
- •Poxvirus
- •Онкогены
- •Вирус иммунодефицита человека (вич)
- •3. Персистентная генерализованная лимфаденопатия (пгл):
- •Лабораторный диагноз
- •2. Безопасность
4. Лабораторная диагностика эшерихиозов и дизентерии
Лабораторная диагностика эшерихиозов. Материалом для лабораторной диагностики эшерихиозов и других коли-инфекций. служат испражнения больных, отделяемое из зева и носа, трупный материал (кровь, желчь, печень, селезенка, легкие, содержимое тонкого и толстого кишечника, гной).
Посев исследуемого материала производят на плотные питательные среды (Эндо, Левина, Мак Конки и др.), параллельно делают посевы для выделения тифозно-паратифозной и дизентерийной групп бактерий на среды Плоскирева и висмут-сульфитагар. При подозрении на септический процесс сеют кровь для обогащения в бульон, а затем высевают на плотную среду. Выделенные чистые культуры идентифицируют по морфологическим, куль туральным, биохимическим, серологическим и биологическим свойствам
Принадлежность выделенных эшерихий к патогенным сероварам соответствующих О-групп устанавливают в реакции агглютинации после разрушения кипячением К-антигена исследуемой культуры. Реакция агглютинации ставится с ОК и О-сыворотками.
Для ускоренной идентификации выделенных культур или исследуемого материала применяют метод иммунофлюоресценции с использованием группоспецифических меченых сывороток. Он позволяет получить предварительный ответ через 1 - 2 ч.
Для серологической диагностики коли-энтеритов начиная с третьего-пятого дня заболевания применяют реакцию непрямой гемагглютинации. Положительным ответом считают нарастание титра антител в динамике заболевания.
Для обнаружения фактора адгезии ЭПКП можно проводить изучение прикрепления культур микроорганизмов к клеткам линии HEp-2 и исследования с помощью ДНК-зондов, но они доступны лишь некоторым лабораториям.
При лабораторной диагностике инфекций ЭТКП проводят обнаружение энтеротоксинов. В качестве стандартных методов обнаружения термолабильного энтеротоксина (ТЛТ) приняты исследования на культуре клеток надпочечников мыши и яичников китайских хомячков, но к токсину чувствительны и другие линии клеток, в том числе и клетки почек обезьян Vero. Добавление клеток к надосадку культуры, содержащей ТЛТ или холерный токсин, приводит к морфологической реакции, которая может быть выявлена при микроскопии. Реакция может быть расценена как стимулирующая или «цитотоническая», в отличие от цитотоксического эффекта надосадка ВТКП на клетки Vero. Для обнаружения ТЛТ доступен также широкий набор иммунологических методов, включая иммуноферментный анализ и твердофазный радиоиммунный анализ.
Многие энтеротоксигенные штаммы Esch. coli продуцируют только термостабильный энтеротоксин, и важно включать исследования на образование ТСТ при любом исследовании на энтеротоксигенность. К сожалению, обычные тесты трудоемки и требуют длительного времени. Впоследствии стал доступным ИФА с моноклональными антителами, специфичными к ТСТ.
Были разработаны методы генных радиоизотопных или биотиновых зондов для выявления ТСТ и ТЛТ в пробах испражнений, пищевых продуктов или воды, содержащих ЭТКП.
Оригинальный тест на энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП) – глазной тест на морских свинках. Микроорганизмы вводят в коньюнктивальный мешок морских свинок и наблюдают в течение 7 дней развитие коньюнктивита. Можно использовать также метод культуры клеток, в котором к монослою клеток HEp-2 или HeLa добавляют суспензии микроорганизмов. После соответствующего времени клетки тщательно исследуются на присутствие внутриклеточных организмов.
Содержание ВТКП в микрофлоре фекалий может быть незначительным, часто – менее 1 %, так, что выбор и исследование отдельных колоний не всегда могут обнаружить присутствие ВТКП. Были разработаны ДНК-зонды на гены ВТ1 и ВТ2, и при использовании таких зондов в тестах гибридизации, проверяют несколько сотен колоний из каждой пробы фекалий, что дает значительное увеличение в чувствительности.
В то время как 95 % Esch. coli ферментируют сорбит, ВТКП О157 не расщепляют сорбит через 24 ч, и это свойство используется для их выявления, например, применением например сорбитол-МакКонки агара для первичного культивирования с последующей реакцией агглютинации иммунной сывороткой против О157. Образование Веро-токсина подтверждают, исследуя цитотоксический эффект штаммов на клетках Vero. Подтверждение инфекции ВТКП может быть также получено выявлением нарастания титров ВТ-нейтрализующих антител или или антител против липополисахарида О157 в сыворотках больных
Лабораторная диагностика дизентерии. Успех лабораторного исследования во многом зависит от правильности взятия испражнений и посева их на элективно-дифференциальную среду у постели больного с последующей отправкой чашек в лабораторию.
В условиях стационара испражнения собирают на поверхности бумажной тарелки или салфетки, которые вкладывают в судно, предварительно промытое проточной водой или, лучше, кипятком, высушенное и не содержащее дезинфицирующих веществ. Наилучшим способом является взятие фекалий тампоном непосредственно из прямой кишки. Посев производят немедленно после получения испражнений. Отбирают частицы кала, содержащие гной и слизь, и засевают тампоном на чашки со средой Плоскирева, которые помещают в термостат при 37°С на сутки. Выделенную чистую культуру идентифицируют по биохимическим и серологическим данным.
РЕКОМЕНДОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА
1. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія : підручник для студ. Вищ. Мед. Навч. заклад. / За редакцією В.П.Широбокова/ Видання 2-е. – Винниця : Нова книга, 2011. – 952 с.
2. Протченко П.З. Загальна мікробіологія, вірусологія та імунологія. Вибрані лекції: Навч. посібник . – Одеса: Одес. Держ. мед. ун-т, 2002. – 298 с.
3. Пятк³н К. Д., Кривоше¿н Ю.С. М³кроб³олог³я. - К : Высшая школа, 1992. - 432 с.
Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. - М : Медицина, 1983. - 312 с.
4. Борисов Л.Б., Козьмин-Соколов Б.Н., Фрейдлин И.С. Руководство к лабораторным занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / под ред. Борисова Л.Б. – Г. : Медицина, 1993. – 232 с.
5 Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник под ред. А.А.Воробьева. – М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 691 с.
6. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология /ред. Л.Б. Борисов, А.М. Смирнова. - М: Медицина, 1994. - 528 c.
Лекция 19. САЛМОНЕЛЛЫ
Род Salmonella назван именем американского исследователя Д.Сальмона, который вместе со Смитом в 1885 г описал первого представителя рода - Salmonella choleraesuis.
Род сальмонелл включает 65 групп (около 2000 сероваров) Сальмонеллы паразитируют в организме домашних и диких животных, птиц, рыб, рептилий, некоторые из них являются патогенными и для человека. Среди них - возбудители брюшного тифа и паратифов и около 700 сероваров, вызывающих у людей и животных гастроэнтероколит - сальмонеллез.
Международным номенклатурным комитетом род сальмонелл подразделен на четыре подрода.
Подрод I - S. kauffmanni - включает большую часть патогенных для человека сальмонелл серологических групп А, В, С, D, Е.
Подрод II - S. salamae - отличается от первого подрода способностью разжижать желатин и ферментировать малонит натрия.
Подрод III - S. arizonae ферментирует (медленно) лактозу и индифферентен к дульциту, обнаруживается у птиц, рептилий и млекопитающих. У человека S. arizonae выделен при лихорадочных состояниях с явлениями диареи и гастроэнтерита, эти заболевания за последние годы значительно участились.
К IV подроду - S houtenau - отнесены атипичные в биохимическом отношении сальмонеллы II подрода, они ферментируют салицин и растут в присутствии цианида калия, к которому чувствительны все патогенные для человека энтеробактерии.