Лечение.
Лечение больных токсической метгемоглобинемией проводят специфическими лекарственными средствами – аскорбиновой кислотой и метиленовым синим.
Прием внутрь аскорбиновой кислоты (по 0,15—0,3 г 3 раза в день) уже в течение первых дней снижает концентрацию метгемоглобина в крови до 10% от общего количества гемоглобина. Далее переходят на поддерживающие дозы (0,05—0,1 г 3 раза в день) в течение длительного времени (2—3 месяца); при этом необходимо делать перерывы в приеме лекарства продолжительностью 2—4 недели. Метиленовый синий при внутривенном введении оказывает быстрый эффект и уже через 1 час относительная концентрация метгемоглобина в крови уменьшается до 1 % и ниже. Его применяют в виде препарата «Хромосмон», вводят внутривенно медленно из расчета 1 мл на 1 кг массы тела или в капсулах (по 100 мг) 3—4 раза в день.
При отравлении нитратами по показаниям применяют сердечные, десенсибилизирующие средства, кровопускание, оксигенотерапию, гормонотерапию, мочегонные, витамины и др.
Для лечения профессиональной метгемоглобинемии применяются никотинамид и пиридоксин.
Для лечения сельскохозяйственных животных при нитратно-нитритной интоксикации с наличием метгемоглобинемии вводят внутривенно метиленовую синь в дозе 1 г на 100 кг массы животного в виде 1 % раствора, приготовленного на изотоническом растворе натрия хлорида (0,9%) или глюкозы (5%). При необходимости через 5—8 часов инъекцию повторяют. Эффективным средством является также хромосмон — 1 % раствор метиленовой сини на 25% растворе глюкозы, который вводят внутривенно из расчета 1 мл на 1 кг массы животного. При внутривенном введении растворов необходимо избегать попадания указанных средств под кожу.
Наряду с внутривенным введением раствора метиленовой сини хороший терапевтический эффект дает парэнтеральное введение 5% раствора аскорбиновой кислоты в дозе 10 мг на 100 кг массы животного. Кроме того, при подострых или хронических отравлениях необходиммо применять витамин А и обволакивающие средства.
В крайне тяжелых случаях сначала следует парэнтерально ввести на 100 кг массы животного 2 мл 5 % раствора эфедрина гидрохлорида, 3 мл цититона (0,15% раствор цитизина) и 2 мл 10% раствора коразола, а затем при улучшении общего состояния целесообразно ввести внутривенно раствор метиленовой сини.
Дпя ускорения восстановления нитратов в конечные нетоксичные продукты жвачным животным дают внутрь раствор патоки или сахара, разведенную молочную или уксусную кислоту в общепринятых дозах. В конце первых или на вторые сутки применяют лечебные средства против атонии преджелудков(сульфат натрия, настойка черемицы и др.).
Методы определения.
Для определения нитратов в природных и очищенных водах применяется большое количество методов при относительно высоком содержании нитратов в исследуемом растворе:
1) колориметрический метод с фенолсульфоновым реактивом при содержании нитратов 0,5—50 мг/л;
2) колориметрический метод с салицилатом натрия при содержании нитратов 0,1—20 мг/л;
3) колориметрический метод с реактивом—бруцином при содержании нитратов 1—20 мг/л;
4) метод восстановления нитратов сплавом Деварда до аммиака, рекомендуемый к применению при содержании нитратов свыше 5 мг/л с последующей отгонкой аммиака;
5) полярографический метод при содержании нитратов 5—10 мг/л.
Разработан метод прямого определения нитратов, основанный на восстановлении нитратов до нитритов гидразином в щелочной среде при температуре 28° С в присутствии ионов меди в качестве катализатора. Присутствующие в растворе нитриты предварительно удаляют добавлением мочевины или азида натрия. Определению нитритов мешают катионы, которые выпадают в осадок в виде гидроокисей при подщелачивании. Их мешающее влияние устраняется предварительным фильтрованием пробы через Nа-катионит.
Взвешенные вещества удаляются фильтрованием. Чувствительность метода 0,002 мг нитрата в пробе. Максимальная ошибка ±10%.
Газохроматографический метод определения нитратов в воде основан на переводе иона нитрата в нитробензол при реакции с бензолом в присутствии катализатора. Количество нитробензола определяется на газовом хроматографе с детектором по электронному захвату. Предварительно установлено, что для проведения конверсии нитрата в нитробензол оптимальное соотношение вода—бензол—катализатор (концентрированная серная кислота) равно 1:3:3. Вместо бензола для анализа можно использовать другие ароматические углеводороды, например, толуол. Газохроматографическое определение осуществляли на приборе «Газохром 1106» с электронно-захватным детектором. Использовали стеклянную колонку (150Х0,4 см), заполненную силанизированным хроматоном (зернение 0,2—0,25 мм) с 5% неопентилгликольсукцината. Температура колонки 150° С, испарителя 200° С, детектора 180° С, скорость газа-носителя (азота особо чистого) 70 мл/мин. Чувствительность метода 0,05 мг/л азота нитратов. Относительная ошибка определения нитратов не превышает 3%. Время хроматографического анализа — 2 минуты.
Модифицирован газохроматографический метод определения нитратов в пищевых продуктах, основанный на переводе иона нитрата в нитротолуол в среде концентрированной серной кислоты. Летучие изомеры нитротолуола определяются с помощью ионизационнопламенного или электронно-захватного детекторов. При применении ионизационно-пламенного детектора чувствительность составляет 10 мг/кг иона-нитрата; при применении электронно-захватного детектора она равна 0,2 мг/кг иона нитрата. Относительная ошибка метода ниже 10%.
Для определения нитратов в овощных растениях разработан фотометрический метод на основе окисления органических веществ марганцовокислым калием и нитрования салициловой кислоты. Для анализа берут 5—10 г средней гомогенизированной пробы исследуемого продукта. Азотнокислые соли экстрагируют горячей водой.
В результате анализа получают окрашенный ярко-желтый раствор, который фотометрируют с синим светофильтром (432 ммк) в кювете 10 мм. Количество азотнокислого калия определяют с помощью калибровочной кривой. Чувствительность метода 1 мкг нитрата калия в 1 мл фотометрируемого раствора. Точность определения нитратов в растительных продуктах ±9%.
Модифицирован метод определения нитратов в овощной и бахчевой продукции с помощью реакции Грисса. При этом предусматривается очень простой способ осаждения белковых и красящих веществ с помощью слабой щелочи и 0,45% раствора сернокислого цинка. Рекомендуемая навеска образца — 5 г. Навеску 10 г рекомендуют для образцов с малым содержанием нитратов. Количество экстрагируемой жидкости 200 мл оказывается вполне достаточным для полного извлечения нитратов. Пробу колориметрируют на фотоэлектроколориметре при зеленом светофильтре или на спектроколориметре при длине волны 540 мм.
В результате модификации вышеуказанного метода появилась возможность определять нитраты во всех пищевых продуктах, рационах, а также в воде. Чувствительность метода 0,045 мкг иона нитрата на 1 мл колориметрируемого раствора или 1,2 мг/кг продукта и 0,05 мг/л воды. Относительная ошибка метода ±3,88%.
Извлечение нитратов из проб крови, патологического материала и кормов растительного происхождения, дающих при извлечении окрашенные растворы, можно проводить методом диализа.
При сравнительном изучении основных параметров четырех широко используемых методов определения нитратов в растительных продуктах оказалось, что по чувствительности они расположились в следующем порядке: метод с применением кадмиевой колонки (порог чувствительности 1,2 мг/кг продукта), салицилово-перманганатный (4 мг/кг), ксиленовый и метод «сухого восстановления» (10 мг/кг).
Относительные ошибки: метод кадмиевой колонки ±3,88%; салицилово-перманганатный ±7,90%; «сухого восстановителя» ±9,23%, ксиленовый 9,32%. Время проведения анализа (исключая время для приготовления экстракта) занимает у метода «сухого восстановителя» 10 минут, кадмиевой колонки — 30 минут, ксиленового — 40 минут, салицилово-перманганатного— 180 минут.
Метод с применением кадмиевой колонки является универсальным и дает возможность определения нитратов во всех пищевых продуктах и рационах, а также в воде. Учитывая, что этот метод обладает высокой чувствительностью и точностью, его можно рекомендовать в качестве основного метода. Метод «сухого восстановителя» является достаточно точным, быстрым и удобным для массового проведения анализов в растительном материале. Метод прост и годен для проведения анализов в полевых условиях. Поэтому его можно рекомендовать в качестве экспресс-метода.
Появление электрометрических методов анализа жидких систем позволило разработать и ввести в почвенно-агрохимическую практику экспрессные методы определения активностей различных ионов, в том числе и нитратных, непосредственно в почвенных растворах. При исследовании различных образцов почв электрометрическим методом при помощи ионоселективного мембранного электрода с NO3-функцией типа ЭИ-NОз-0S показана высокая корреляционная связь между активностью и концентрацией нитрат-ионов. Сравнение этого метода с колориметрическим методом с дисульфофеноловой кислотой показало хорошую сходимость результатов и возможность использования электрометрического метода определения нитратов при почвенно-агрохимических исследованиях.
Показано, что содержание ннитратного азота можно определять как в свежих (влажных) пробах почвы, так и воздушно-сухих пробах, полученных высушиванием свежих проб почвы при комнатной температуре, измельчением и просеиванием через сито с отверстиями диаметром 1 мм. Время хранения воздушно-сухих проб—1 месяц.
Для количественного определения нитратов в крови применяется метод, основанный на восстановлении нитратов в нитриты с помощью металлического цинка и дальнейшем фотометрическом измерении интенсивности полученного окрашенного соединения при реакции азосочетания диазотированного альфа-нафтиламина и сульфаниловой кислоты. Чувствительность метода 0,5 мкг ионов нитрата в 1 мл колориметрируемого раствора. Ошибка метода не более ±5%.
В основу метода суммарного определения нитратов и нитритов в крови положен дифениламинный способ определения азотной кислоты в водных растворах. Образование синеокрашенных продуктов при действии аниона азотной кислоты на дифениламинный реактив связано с окислением дифениламина.