Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

вирусология шпоры / реакуия диффузной прецепитации в геле и ее использование в вирусологи

.doc
Скачиваний:
455
Добавлен:
18.06.2015
Размер:
27.65 Кб
Скачать

Сущность РДП заключается в способности специфических противовирусных АТ сыворотки крови и специфических вирусных АГ диффундировать в толще агарового геля навстречу друг другу, в рез-те чего образуется комплекс АГ+АТ. Этот комплекс выпадает в осадок в месте образования в виде полосы преципитации. Этот рез-т указывает на положительный диагностический ответ. Если АТ не гомологичны АГ, то полоса не образуется, реакция отрицательная. Компоненты:  Исследуемый ВСМ или известный АГ;  Исследуемая сыворотка или известные АТ;  Нормальная сыворотка крови или исследуемый ВСМ для контроля;  Агар 1-1,5% (фирмы Дифко). РДП применяется для обнаружения и идентификации выделенного АГ; для обнаружения и титрования АТ в сыворотке крови; для контроля за чистотой АГ препаратов и диагностических сывороток в биологической промышленности; для определения АТ в сыворотке животных после их вакцинации. Применяют 2 модификации – макроскопический метод в чашках Петри и микроскопический метод на предметных стеклах. Макроскопический метод.  В чашки Петри по 20-25 мл МПА.  После застывания делают лунки Д=5-6 мм, между ними 4-5 мм.  В лунки вносят по капле МПА, чтобы компоненты не подтекли под агар.  Заполняют лунки компонентами по схемам: 1 – для обнаружения неизвестного АГ, 2 – для обнаружения неизвестных АТ в сыворотке крови, 3 – для титрования АТ.  Оставляют при 37 С на 24 ч, затем при комнатной Т еще 24 ч.  Учитывают результаты. При положительной РДП между гомологичными АГ и АТ образуется линия преципитации. При отрицательной РДП линия отсутствует.  Контроли: специфический АГ+ специфическая сыворотка (положительно); специф-й АГ + физраствор (отрицательно); неспецифичекий АГ + нормальная сыворотка крови (отрицательно), специфическая сыворотка + физраствор (отрицательно). В вирусологии РДП используют при гриппе, бешенстве, ящуре, аденовирусе, гепатите утят, ИНАН, КЧС.

Соседние файлы в папке вирусология шпоры