ЗАНЯТИЕ 2ТЕМА: ПРАВИЛА РАБОТЫ СМИКРООРГАНИЗМАМИ.

няют водно-спиртовый 1:10 фуксин, метиленовую синьку и сафранин.

При простой окраске микробные тела воспринимают цвет применяемой краски так же интенсивно, как и ядра клеток; в то же время цитоплазма и весь фон мазка (если это не мазок из чистой культуры) окрашиваются в тот же цвет, но несколько бледнее. Обычно фуксином 1:10 красят 10–30 с., а метиленовой синькой – 2–10 мин. Фуксин и генцианвиолет окрашивает мазки более интенсивно. А при окраске метиленовой синькой получаются нежные, более изящные препараты.

Восприятие окраски зависит не только от свойств красок, но и от свойств подвергаемых окраске микробов.

Для окраски мазков пользуются растворами красок или красящей бумагой. Простота приготовления, удобство применения, а также возможность хранения красящих бумаг в течение неограниченно долгого времени явились основанием для широкого их использования при ра з- личных способах окраски.

Окраска мазков растворами красителей. На высушенный и фиксиро-

ванный препарат пипеткой наносят краситель в таком количестве, чтобы он покрывал весь мазок. При окраске мазков концентрированными растворами красителей (карболовый фуксин Циля, карболовый генциановый или кристаллический фиолетовый) окрашивание производят через фильтровальную бумагу, задерживающую частицы красителя: на фиксированный мазок кладут полоску фильтровальной бумаги и на нее наливают раствор красителя.

Окраска мазков красящей бумагой. На высушенный и фиксированный препарат наносят несколько капель воды, кладут окрашенные бумажки величиной 2×2 см. В течение всего времени прокрашивания бумага должна оставаться влажной и плотно прилегать к поверхности стекла. При подсыхании бумагу дополнительно смачивают водой. Продолжительность окрашивания мазка определяется методом окраски. По окончании окраски бумагу осторожно снимают пинцетом, а мазок промывают водопроводной водой и подсушивают на воздухе или фильтровальной бумагой.

Мазок после обсушивания фильтровальной бумагой должен быть совершенно сухим, в противном случае при соприкосновении оставшейся влаги с кедровым маслом образуется эмульсия и при микроскопии получится неясное изображение.

Задание

Освоить методику приготовления прижизненных и постоянных препаратов, окрашенных простыми красителями.

Планвыполненияработы

1. Приготовить и просмотреть с иммерсионным объективом прижизненные препараты культуры бактерий, окрашенные метиленовым синим.

ЗАНЯТИЕ 2ТЕМА: ПРАВИЛА РАБОТЫ СМИКРООРГАНИЗМАМИ.

2.Приготовить и просмотреть с иммерсионным объективом постоянный препарат культуры бактерий, окрашенный фуксином.

3.Сделать зарисовки.

Вопросыдлясамостоятельногоконтроля

1.Что такое «асептика»? Почему нужно ее соблюдать при работе с микроорганизмами?

2.Какая посуда используется для выращивания микроорганизмов?

3.Как правильно держать пробирку с микроорганизмами и петлю?

4.Какие свойства микроорганизмов исследуются на прижизненных и постоянных препаратах?

5.Как приготовить препарат «раздавленная капля»?

6.Какими методами проводится фиксация микроорганизмов на предметном стекле?

7.Какие красители используют для окраски микроорганизмов? Для каких целей используют сложные методы окраски?

8.Сколько времени требуется для окрашивания мазка фуксином или метиленовым синим?

9.Как приготовить и зафиксировать мазок из культуры микроорганиз-

мов?

10.Почему необходимо хорошо просушить мазок для иммерсионной микроскопии?