
- •Міністерство аграрної політики України
- •Вступ Діагностичне значення дослідження крові
- •Взяття крові у тварин
- •1. Фізичне дослідження крові
- •1.1. Визначення відносної густини крові
- •1.2. Визначення швидкості осідання еритроцитів (шое)
- •1.3. Визначення величини гематокриту
- •1.4. Визначення швидкості згортання крові
- •1.5. Визначення ретракції кров’яного згустку
- •1.6. Визначення осмотичної резистентності еритроцитів
- •1.7. Визначення кислотної резистентності еритроцитів
- •2. Морфологічне дослідження крові
- •2.1. Підрахунок кількості еритроцитів
- •Підрахунок еритроцитів пробірковим методом м.П. П’ятницького (Ніколаєва)
- •2.2. Підрахунок кількості лейкоцитів
- •Підрахунок лейкоцитів за методом п’ятницького (Ніколаєва)
- •2.3. Підрахунок еритроцитів та лейкоцитів на гцмк-3
- •2.4. Підрахунок кількості тромбоцитів
- •2.5. Підрахунок кількості клітин крові у птиці
- •2.6. Лейкограма
- •2.7. Гематологічний профіль
- •Гематологічний профіль с.П. Гоженка
- •Гематологічний профіль г.В. Домрачева
- •3. Хімічне дослідження крові
- •3.1. Визначення у крові вмісту гемоглобіну
- •Визначення вмісту гемоглобіну гемоглобінціанідним методом
- •3.2. Визначення індексів “червоної” крові
- •3.3. Визначення резервної лужності і кислотної ємності крові
- •Титрометричний метод визначення кислотної ємності сироватки або плазми крові (за а.О. Кудрявцевою і в.Ф. Коромисловим)
- •Визначення резервної лужності крові дифузійним методом за допомогою здвоєних колб (за і.П.Кондрахіним)
- •3.4. Визначення загального білка і білкових фракцій
- •3.5. Визначення загальної кількості імуноглобулінів
- •Визначення загальної кількості імуноглобулінів у сироватці крові
- •Визначення загальної кількості імуноглобулінів у молозиві
- •3.6. Колоїдно-осадові проби
- •Сулемова проба (за Грінстедом)
- •Проба з розчином міді сульфату (за Постніковим в.С.)
- •Формолова проба
- •3.7. Визначення білірубіну в сироватці крові
- •Визначення білірубіну за методом Бокальчука
- •Визначення білірубіну у сироватці крові за модифікованим методом Ієндрашика, Клеггорна і Грофа
- •3.8. Визначення загального кальцію у сироватці крові Комплексонометричний метод (за Луцьким д.Я.)
- •Визначення загального кальцію в реакції з кальційарсеназо (ііі)
- •3.9. Визначення неорганічного фосфору в сироватці крові
- •Визначення неорганічного фосфору за реакцією з аскорбіновою кислотою
- •Визначення неорганічного фосфору за методом уф-детекції фосфомолібдатного комплексу
- •3.10. Визначення активності лужної фосфатази в сироватці крові
- •3.11. Визначення каротину в сироватці крові
- •3.12. Визначення вітаміну а та каротину в сироватці крові (за методом Бессея в модифікації в.І.Левченка зі співавт., 1998)
- •3.13. Визначення глюкози у крові
- •Визначення глюкози за кольоровою реакцією з орто-толуїдином
- •Визначення глюкози у плазмі крові глюкозо-оксидазним методом
- •3.14. Визначення кетонових тіл
- •Експрес-метод-тест для визначення вмісту кетонових тіл
- •Додатки Додаток а Показники крові у клінічно здорової великої рогатої худоби
- •Додаток б Коефіцієнти перерахунку “старих” одиниць в одиниці sі і навпаки
- •Cписок літератури
- •Дослідження крові тварин та клінічна інтерпретація отриманих результатів
Взяття крові у тварин
Невелику кількість крові, необхідну для морфологічного дослідження, у тварин можна отримати із вен вушної раковини. Перед взяттям крові місце проколу вистригають, дезінфікують спиртом або ефіром. Вену перетискують ближче до основи вушної раковини, потім проколюють її під прямим кутом стерильною ін’єкційною голкою. Для створення твердої основи вухо з протилежної сторони підтримують пальцем, з накладеним на нього ватним тампоном. Для діагностики піроплазмідозів мазки готують із першої краплі крові, яка з’явилася із судини. При малому витіканні кров видавлювати не можна. У курей кров отримують із гребеня або сережки, у гусей і качок – із м’якоті ступні кінцівок, у хутрових звірів – з м’якуша пальця.
Велику кількість крові у великих тварин (коні, велика і дрібна рогата худоба, свині, верблюди) беруть із яремної вени. У свиней, крім цього, кров можна взяти із великих судин вуха, орбітального синуса або із хвостової вени. В останньому випадку кінчик хвоста вистригають, а потім гострим скальпелем роблять надріз його вентральної поверхні. У собак та інших м’ясоїдних кров отримують із судин кінцівок, у кролів – з вушної, птахів – з підкрилової вен. Для попередження гемолізу кров має поступати в пробірку по стінці.
Для отримання сироватки кров беруть у чисту суху пробірку або інший посуд і ставлять у тепле місце. Якщо ретракція не відбулася, тоді тонкою скляною паличкою (краще голкою для аортопункції) відділяють згусток від стінки пробірки. Рідку частину крові центрифугують при 3000 обертах протягом 10–15 хв. Для одержання плазми необхідно запобігти згортанню крові. З цією метою до неї додають антикоагулянти (табл. 1). Потім кров центрифугують при 3000 обертах 15 хвилин, або при 1500 об/хв – 20–30 хв. Для підрахунку еритроцитів стабілізовану кров можна зберігати в холодильнику при +4 °С протягом 72 год, для підрахунку лейкоцитів і приготування мазків – не більше 24 год.
Таблиця 1 – Антикоагулянти та їх дози (в розрахунку на 10 мл крові)
Назва |
Одиниця вимірювання |
Кількість |
Натрію цитрат 5 %-ний розчин натрію цитрату Натрію оксалат Калію оксалат 20 %-ний водний розчин натрію або калію оксалату 10 %-ний розчин натрію фториду 10 %-ний розчин трилону Б 0,5 %-ний розчин гепарину |
мг мл мг мг мл мл краплі мл |
30–50 1 15 15 0,3–0,5 0,3–0,5 6–8 0,3–0,4 |
У практиці ветеринарної медицини проводять фізичне, хімічне, морфологічне, серологічне і бактеріологічне дослідження крові.
1. Фізичне дослідження крові
1.1. Визначення відносної густини крові
Відносна густина крові характеризує відношення між щільними складовими крові і водою. Вона залежить від вмісту в крові гемоглобіну, білків та солей. Найбільш простий метод визначення (за Гаммершлягом) полягає в опусканні краплі крові у суміш хлороформу і бензолу (20:50). При однаковій відносній густині крові і суміші крапля займає середнє положення в циліндрі. Потім ареометром вимірюють відносну густину суміші.
Метод Філіпсабільш надійний. Для його виконання готується основний розчин міді сульфату з відносною густиною 1,1 (159,6 г солі розчиняють в 1 л води). Потім у кількох циліндрах готуються робочі розчини з відносною густиною, близькою до густини крові: 1,030; 1,035; 1,040; .... 1,060. Для приготування розчину з відносною густиною 1,040 необхідно відміряти у циліндр 40 мл основного розчину міді сульфату і 60 мл дистильованої води; 1,045 – відповідно 45 і 55 мл і т.д. Рідини необхідно перемішувати. Потім у кожний циліндр з приготовленим розчином піпеткою обережно опускають 1–2 краплі свіжої крові досліджуваної тварини і відмічають той із них, у якому крапля буде знаходитися протягом 3–5 с у середній частині циліндра (не спливати і не опускатись на дно). Відносна густина досліджуваної крові буде відповідати густині рідини в цьому циліндрі (табл. 2).
Таблиця 2 – Відносна густина крові здорових тварин, г/см3 або кг/л
Вид тварин |
Коливання |
Велика рогата худоба Вівці, кози Коні Свині Собаки Кролі Кури |
1,045 – 1,055 1,047 – 1,055 1,045 – 1,055 1,042 – 1,060 1,044 – 1,056 1,048 – 1,060 1,039 – 1,057 |
Збільшеннявідносної густини спостерігається при поліцитемії, згущенні крові внаслідок втрати води, що спостерігається при діареях різної етіології, поліурії, утворенні ексудатів і транссудатів, блюванні, надмірному потінні;зменшенняє характерною ознакою анемій різної етіології, кахексії, гідремії.