2.3 Цитогенетические (кариотипические) методы

Цитогенетические методы используются, в первую очередь, при изучении кариотипов отдельных индивидов. Кариотип человека довольно хорошо изучен. Применение дифференциальной окраски позволяет точно идентифицировать все хромосомы. Общее число хромосом в гаплоидном наборе равно 23. Из них 22 хромосомы одинаковы и у мужчин, и у женщин; они называются аутосомы. В диплоидном наборе (2n=46) каждая аутосома представлена двумя гомологами. Двадцать третья хромосома является половой хромосомой, она может быть представлена или X или Y–хромосомой. Половые хромосомы у женщин представлены двумя X–хромосомами, а у мужчин одной X–хромосомой и одной Y–хромосомой.

Изменение кариотипа, как правило, связано с развитием генетических заболеваний.

Благодаря культивированию клеток человека in vitro можно быстро получить достаточно большой материал для приготовления препаратов. Для кариотипирования обычно используют кратковременную культуру лейкоцитов периферической крови.

Цитогенетические методы используются и для описания интерфазных клеток. Например, по наличию или отсутствию полового хроматина (телец Барра, представляющих собой инактивированные X—хромосомы) можно не только определять пол индивидов, но и выявлять некоторые генетические заболевания, связанные с изменением числа X—хромосом.

2.4 Биохимические методы

Все многообразие биохимических методов делится на две группы.

а). Методы, основанные на выявлении определенных биохимических продуктов, обусловленных действием разных аллелей. Легче всего выявлять аллели по изменению активности ферментов или по изменению какого—либо биохимического признака;

б). Методы, основанные на непосредственном выявлении измененных нуклеиновых кислот и белков с помощью гель—электрофореза в сочетании с другими методиками (блот—гибридизации, авторадиографии).

Использование биохимических методов позволяет выявить гетерозиготных носителей заболеваний. Например, у гетерозиготных носителей гена фенилкетонурии изменяется уровень фенилаланина в крови.

2.5 Методы генетики мутагенеза

Мутационный процесс у человека у человека, как и у всех других организмов, ведет к возникновению аллелей и хромосомных перестроек, отрицательно влияющих на здоровье.

Генные мутации. Около 1% новорожденных заболевают вследствие генных мутаций, из которых часть вновь возникшие. Темп мутирования различных генов в генотипе человека неодинаков. Известны гены, которые мутирует с частотой 10^–4 на гамету на поколение. Однако большинство других генов мутируют с частотой, в сотни раз меньшей (10^–6). Ниже приведены примеры наиболее частых генных мутаций у человека:

Типы и названия мутаций	Частота мутаций (на 1 млн. гамет)
Аутосомно—доминантные
Поликистоз почек	65...120
Нейрофиброматоз	11...100
Множественный полипоз толстой кишки	10...50
Аномалия лейкоцитов Пельгера	9...27
Несовершенный остеогенез	7...13
Синдром Марфана	4...6
Аутосомно—рецессивные
Микроцефалия	27
Ихтиоз (не сцепленный с полом)	11
Рецессивные, сцепленные с полом
Мышечная дистрофия Дюшена	43...105
Гемофилия А	37...52
Гемофилия В	2...3
Ихтиоз (сцепленный с полом)	24

Хромосомные и геномные мутации в абсолютном большинстве возникают в половых клетках родителей. Один из 150 новорожденных несет хромосомную мутацию. Около 50% ранних абортов обусловлено хромосомными мутациями. Это связано с тем, что одна из 10 гамет человека является носителем структурных мутаций. Возраст родителей, особенно возраст матерей, играет важную роль в увеличении частоты хромосомных, а возможно, и генных мутаций.