- •1. Сущность материалистических и идеалистических представлений в биологии.
- •2. Определение сущности жизни. Свойства и уровни организации живого.
- •1) Определение сущности жизни
- •2) Свойства живого
- •3) Уровни организации живого
- •3. Доклеточные и клеточные формы жизни.
- •Доклеточные формы жизни — вирусы и фаги
- •Клеточные организмы
- •4. Правила проведения световой микроскопии биологических объектов.
- •5. Технологии приготовления временных и постоянных препаратов биологических объектов для проведения световой микроскопии.
- •1) Временные препараты
- •2) Постоянные препараты
- •6. Химический состав клеточного вещества. Микро и макро- элементы.
- •1. Макроэлементы
- •3. Ультрамикроэлементы
- •7. Строение и функционирование эукариотической клетки. Организация цитоплазматического аппарата
- •Строение эукариотической клетки.
- •2)Организация цитоплазматического аппарата
- •8. Белки, их роль в жизнеобеспечении клеток и организмов
- •Функции белков в организме
- •Вопрос 9. Органоиды соматических клеток, их строение и назначение
- •Вопрос 10. Клеточная теория. Методы изучения клеток
- •Методы изучения клеток.
- •11. Клеточное ядро, его организация, назначение. Ядерный хроматин.
- •12.Строение и функции клеточных мембран.
- •13.Нуклеиновые кислоты. Днк, её строение и роль в клетке.
- •14.Рибонуклеиновые кислоты, их виды, строение, назначение.
- •15.Органические вещества в клетках, их назначение.
- •16.Минеральные вещества в клетках, их роль, назначение. Осмотические процессы в растительных и животных клетках.
- •17.Биосинтез белков в клетках.
- •18.Энергетический обмен в клетках.
- •19.Организация наследственного аппарата в эукариотических клетках. Геном соматической клетки.
- •20.Ген,генотип,гомо и гетерозиготность. Генетическая обусловленность фенотипа.
- •21.Генетический код, его свойства:
- •22. Строение хромосом, их типы, классификация в кариотипе человека.
- •23.Хромосомная теория т. Моргана.
- •24. Деление соматических клеток. Хар-ка фаз митоза.
- •25. Половые клетки человека, их строение. Типы строения яйцеклеток.
- •26.Репродукция живого. Классификация способов размножения.
- •27. Овогенез и сперматогенез.
- •28. Митоз, его биологическое значение.
- •Биологическое значение митоза
- •29. Мейотическое деление, его особенности, характеристика стадий профазы 1.
- •30. Мутации наследственного аппарата. Их классификация.Факторы, вызывающие мутации наследственного аппарата
- •Классификация мутаций
- •31 . Факторы мутагенеза наследственного аппарата.
- •32. Включения в эукариотических клетках, их виды, назначение.
- •33. Изменчивость, её виды в человеческих популяциях
5. Технологии приготовления временных и постоянных препаратов биологических объектов для проведения световой микроскопии.
1) Временные препараты
Для изучения растительных объектов с помощью светового микроскопа необходимо приготовить микропрепарат. Микропрепараты, не предназначенные для длительного хранения, называются временными. Изучаемый объект помещают на предметное стекло в каплю воды, глицерина, раствора, реактива или красителя и накрывают покровным стеклом. Такие препараты можно хранить в течение нескольких дней, поместив во влажную атмосферу.
2) Постоянные препараты
Постоянные препараты готовятся по специальным методикам, обеспечивающих их хранение в течение десятков лет. К постоянным препаратам относятся мазки, тотальные препараты и срезы. Мазки используются при изучении клеток крови, культур микроорганизмов, изолированных тканевых клеток. Тотальные препараты представляют собой отдельные прозрачные и тонкие объекты
Учебные срезы можно сделать вручную, с помощью бритвы. Однако качественные срезы с заданной толщиной 10...22 микрометра обычно изготавливают с помощью специальных приборов – микротомов. Такие срезы часто называют микротомными препаратами. Для получения более тонких срезов (0,01...0,05 мкм, или 10...50 нанометров) используют ультрамикротомы.
Кратко рассмотрим основные этапы приготовления постоянных препаратов.
1. Фиксация материала. Сразу после окончания фиксации производится промывка материала или водой (после водных фиксаторов), или 80%-ным спиртом (после спиртовых фиксаторов). Количество смен промывных жидкостей – не менее 3. Время – до 24 часов.
2. Обезвоживание в спиртах возрастающей концентрации. Параллельно происходит уплотнение материала. Последовательное перемещение материала через ряд растворов называется проводка. После водных фиксаторов используется 8 смен спирта: 20%, 40%, 80%, две смены по 96%, две смены по 100%. После спиртовых фиксаторов – 4 смены спирта : две смены по 96% и две смены по 100%. В каждой смене материал выдерживается по 1 часу.
3. Просветление. Это пропитывание материала растворителем парафина – ксилолом (бензолом, хлороформом). Образец помещается на 1 час последовательно в каждый из последующих растворов: 3 части спирта + 1 часть ксилола, затем 2 части спирта + 2 части ксилола, затем 1 часть спирта + 3 части ксилола, затем две смены ксилола.
4. Заливка в парафин. Это замещение ксилола парафином. Образец помещают в смесь ксилола и парафина при температуре 55...57 градусов и оставляют в термостате при этой температуре до полного испарения ксилола (от нескольких часов до нескольких суток). Затем при температуре 55...57 градусов производится проводка через парафин I (6...12 часов), парафин II (6...12 часов) и заливка в парафин III. Парафины I, II, III отличаются только чистотой: парафин III – это окончательная среда, которая должна обладать наибольшей чистотой. В итоге получаются парафиновые блоки, в которых заключены образцы материала. Эти блоки можно резать в любом направлении.
5. Окрашивание срезов. Парафиновые срезы наклеивают на чистое предметное стекло. В качестве клея можно использовать смесь белка куриного яйца с глицерином (в соотношении 1 : 2) с добавлением антисептика (тимола или фенола). Обычно производят депарафинирование срезов. Для этого стекла с наклеенными срезами проводят через ксилол, спирты убывающей концентрации (100%, 96%, 80%, 70%) и дистиллированную воду. Время нахождения в каждой среде – 2...3 минуты. Далее окрашивают согласно методикам.
6. Обезвоживание и просветление окрашенных срезов. Выполняется путем проводки через спирты возрастающей концентрации, а затем через ксилол.
7. Заключение в среды (заливка). Для длительного хранения препаратов их необходимо заключить в среду, предохраняющую препарат от окисления воздухом и от поражения грибками. Для заливки используются специальные смолы (канадский бальзам, пихтовый бальзам), которые растворяют в ксилоле до консистенции жидкого меда. Каплю такого раствора наносят на срез и покрывают покровным стеклом.