
Экзаменационный билет №10
1. В аналитическую лабораторию Центра сертификации для получения сертификата качества поступила горца птичьего трава, фасованная в пачки по 100 г.
Для проведения аналитического контроля и заключения о качестве сырья были отобраны пробы и проведен их анализ. В ходе исследований установлено, что внешние признаки и микроскопия соответствуют стандарту. В сырье было определено содержание золы общей, золы, нерастворимой в 10% кислоте хлористоводородной, органической и минеральной примесей как соответствующее стандарту. Содержание действующих веществ составило 0,5%, влажности - 15%), частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм - 6%, частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм - 13%.
Проанализируйте полученные результаты и сделайте заключение о качестве травы горца птичьего и возможности ее дальнейшего использования в производстве. Поясните свое решение.
Какими НД руководствуются при принятии решения о качестве сырья?
С помощью какой методики было определено содержание действующих веществ? Поясните с учетом физико-химических свойств вещества, используемого для стандартизации.
Ответ
Трава горца птичьего Неrbа Роlygoni avicularis
Горец птичий Роlygonum aviculare
Семейство: гречишные - Ро1уgonaceae
При принятии решения о качестве сырья следует руководствоваться Фармакопеей СССР 11 издания. Проанализировав полученные результаты можно сказать о недоброкачественности сырья, так как согласно ГФ ХI влажность в сырье может составлять не более 13%, а в аналитической пробе №2 влажность15%; так же частиц, проходящих сквозь сито диаметром 0,5мм должно быть не более 10%, в анализируемое сырье — 13%. Для дальнейшего применения сырье нужно досушить и удалить измельченное сырье, просеяв его через сито 0,5 мм.
Трава содержит дубильные вещества, флавоноиды, соли кремневой кислоты.
Применение в медицине. Из травы горца птичьего готовят настои, экстракты и галеновые препараты, которые применяют как мочегонное средство при мочекаменной болезни, как кровоостанавливающее при маточных кровотечениях на почве атонии матки, а также при кишечных и геморроидальных кровотечениях.
Согласно ГФ-XI для количественного определения суммы флавоноидов в лекарственном сырье используют спектрофотометрический метод. Он основан на способности флавоноидов или окрашенных компонентов поглощать монохроматический свет при определенной длинне волны.
Этапы определения суммы флавоноидов:
1. Получение спиртового извлечения суммы флавоноидов.
2. Реакция образования комплекса с 2-% спиртовым раствором алюминия хлорида. При добавлении 2-5% спиртового раствора алюминия хлорида образуются хелатные комплексы за счет водородных связей, возникающих между карбонильной и оксигруппой, желтого цвета с желто-зеленой флюоресценцией.
3. Измерение оптической плотности. Оптическую плотность раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют следующий раствор: 4 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 каплю разведенной хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора 95% спиртом до метки.
4. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на авикулярин и абсолютно сухое сырье в процентах вычисляют по формуле(см. ГФ-XI).
2. В аналитическую лабораторию фармацевтического предприятия поступили ампулы и флаконы с раствором лекарственного вещества, имеющего следующую химическую структуру и не отвечающие требованиям НД по разделу « Описание» - наблюдалось пожелтение раствора.
Дайте обоснование возможным изменениям лекарственного вещества при приготовлении лекарственной формы.
Приведите русское, латинское и рациональное название препарата. Охарактеризуйте физико-химические свойства (внешний вид, растворимость, спектральные и оптические характеристики) и их использование для оценки качества.
В соответствии с химическими свойствами предложите реакции идентификации и методы количественного определения. Напишите уравнения реакций.
Ответ
ГЛЮКОЗА
Ответ
простой сахар, в состав которого входят шесть атомов углерода (гексоза)
Описание. Бесцветные кристаллы или белый мелкокристаллический порошок без запаха, сладкий на вкус. Растворим в воде (1:1, 5), трудно - в спирте.
Уд. вращение от +51,5 град. до +53 град. (10%-й водный р-р). Препарат предварительно сушат при 100-105 град. до постоянного веса. Измерение угла вращения производят после прибавления в р-ру препарата 2-х капель р-ра аммиака.
Растворы – бесцветная или слегка желтоватая прозрачная жидкость.
Растворы стерилизуют при температуре + 100 'С в течение 60 мин или при температуре + 119, + 121 'С в течение 5 - 7 мин; рН растворов 3, 0 - 4, 0.
Для медицинских целей применяют изотонический (4, 5 - 5 %) и гипертонические (10 - 40 %) растворы. Изотонический раствор применяют для пополнения организма жидкостью, вместе, с тем он является источником легкоусвояемого организмом ценного питательного материала.
В аналитическую лабораторию поступил раствор глюкозы, который относится к легкоокисляющимся. При его хранении в неправильных условиях, а также при стерилизации, особенно в щелочном стекле, происходят окисление, полимеризация и карамелизация глюкозы. Наблюдается пожелтение, а иногда и побурение растворов.
Глюкоза – Glucosum
Подлинность: с реактивом Феллинга. К 4-5 мл. раствора прибавляю 1 мл. реактива Фелинга и нагревают до кипения. Образуется кирпично-красный осадок.
Не
ГФ:1)Реакция серебряного зеркала. Основана
на наличии альдегидной группы и
Чистота: удельное вращение – правовращающая, в ФС допускается интервал (указ. концентрация раствора, растворитель). Прозрачность, цветность, кислотность, общедопустимые: хлориды, сульфаты, кальций. Недопустимые: барий, декстран КО: не проводится.
Количественное определение:
Для инъекций рефрактометрическое определение. Содержание глюкозы в процентах (Х) вычисляют по формуле:
(п - по) х 100
Х = ---------------- ,
0,00142 х 100
где п - показатель преломления раствора,
по - показатель преломления воды,
0,00142 - фактор показателя преломления раствора безводной глюкозы.
Не ГФ: Обратная йодометрия. В щелочной или карбонатной среде. Сначала йод взаимодействует со щелочью, образуя сильный окислитель гипойодид.
J2+2NaOH
NaJO
+ NaJ
+H2O
Гипойодид окисляет глюкозу (альдегид) до кислоты (глюконовой)
+
NaIO + NaOH CH2OH (CHOH)4COOH
C+1-2e
C+3
f экв.
=
½
Реакция идет во времени, поэтому необходимо выдержать реакц. Среду до полного окисления (10-20 мин). Затем добавляют серную к-ту, гипойодид превращается в J2
2NaJO
+ NaI
+ H2SO4 3J2+Na2SO4
+ 3H2O
Йод титруется тиосульфатом натрия
J2
+
2 Na2S2O3
2NaJ
+ Na2S4O6
Индикатор – крахмал.
3. Аптека получает лекарственные средства, содержащие вещество с приведенной выше структурой, напрямую от химико-фармацевтического предприятия. Какому уровню канала товародвижения это соответствует? Какие другие каналы товародвижения могут быть использованы при доведении товаров от производителя до потребителя?
Из каких элементов складывается отпускная цена производителя?
Как в аптеке будет сформирована розничная цена на данные лекарственные средства?
Ответ
Существуют 2 основных типа логистических каналов товародвижения: прямые и косвенные.
Прямые, в которых перемещение товара от производителя к потребителю осуществляется без посредников;
Косвенные, включающие различное число посредником.
Количество посредников, участвующих в товародвижении от производителя до конечного потребителя определяет уровень канала. Так как прямые каналы не имеют посредников, то их ещё называют каналами нулевого уровня:
производитель
аптека
К косвенным каналам относятся:
а) косвенный канал (одноуровневый) :
производитель
дистрибьютер стационар
б) ещё косвенный канал (одноуровневый)
производитель
аптека покупатель
в) косвенный канал(двухуровневый):
производитель
дистрибьютер аптека
покупатель
В нашем случае аптека получает товар непосредственно от производителя, канал прямой или канал нулевого уровня.
Основными элементами цены, в т. ч. и производителя, являются себестоимость и прибыль. Производитель, зная затраты, непосредственно связанные с изготовлением конкретного вида продукции, добавляет к ним определённую долю косвенных затрат (например, по аренде помещений, оборудованию, коммунальных платежей, содержание управленческого персонала и др.) и устанавливает желаемую величину рентабельности ( уровня прибыли).
Кроме того, в структуру цены включаются отдельные виды налогов, например, налог на добавленную стоимость (НДС), акцизы, взимаемые с отдельных видов продукции, например спиртосодержащей.
Структура цены производителя:
|
НДС (акцизы) |
III уровень |
|
Уровень прибыли |
II уровень |
Себестоимость |
Косвенные затраты |
I уровень |
Прямые затраты |
Структура цены оптовой и розничной организации:
Оптовая
ц |
НДС, акцизы |
НДС, акцизы |
Розничная
ц |
Надбавка оптового звена |
Надбавка розничного звена |
||
Цена покупки (без НДС) |
При
формировании оптовой или розничной
цены торговая организация использует
ещё определённую надбавку к цене покупки.
Порядок ценообразования лекарственных средств регламентируется Федеральным законом № 61-ФЗ от 12 апреля 2010 года «Об обращении лекарственных средств», Постановлением Правительства РФ от 29.10.2010 № 865 «О государственном регулировании цен на лекарственные препараты, включенные в Перечень ЖНВЛП».
Правительством введена государственная регламентация цен производителя на ЖНВЛП (жизненно необходимые и важнейшие лекарственные препараты). Это означает, что заводы-производители должны регистрировать свою цену и эта цена не должна быть выше цен, зарегистрированных в Государственном реестре цен в рублях на отечественные препараты, и в рублях и в валюте на импортные. Выше зарегистрированных цен производитель не может отпустить эти товары. МЗ и СР РФ издало распоряжение перечень ЖНВЛП на 2012год от 7 декабря 2011 г. N 2199-р. Данный Перечень применяется в 2013 году (Распоряжение Правительства РФ от 30.07.2012. № 1378-р)
Цены на ЖНВЛП формируют с учетом региональных торговых надбавок.
В соответствии с Постановлением Правительства РФ от 29.10.2010 г. № 865 «О государственном регулировании цен на лекарственные препараты, включенные в Перечень ЖНВЛП», Управлением по регулированию тарифов, энергосбережению и размещению государственного заказа Пензенской области утвержден приказ от 20.04.2010 г. N 13 «Об установлении предельных оптовых и предельных розничных надбавок к ценам на жизненно необходимые и важнейшие лекарственные средства на территории пензенской области
Ценовые группы
|
Предельный размер оптовых надбавок к фактическим отпускным ценам производителей, % |
Предельный размер розничных надбавок к фактическим отпускным ценам производителей, % |
до 50 руб. включительно |
20 |
20 |
свыше 50 руб. до 500 руб. включительно |
15 |
19,5 |
свыше 500 руб. |
12 |
19 |
Кроме того, согласно Налогового кодекса РФ, лекарственные средства облагаются налогом на добавленную стоимость (НДС) в размере 10%.
Лекарственные средства, не вошедшие в перечень ЖНВЛП, реализуются по свободным рыночным ценам.
4-5. Обоснуйте выбор растворителя, используемого для производства инъекционной лекарственной формы указанного вещества.
Предложите состав инъекционного раствора, указанного вещества. Дайте обоснование необходимости стабилизации, технологическим условиям приготовления и соблюдению условий хранения в аптечных и заводских условиях.
Дайте сравнительную характеристику стабилизаторам и объясните механизмы их действия.
Ответ
Указанная химическая структура лекарственного вещества соответствует глюкозе. Латинское название Glucosum, Glucosa. В медицинской практике она может использоваться во многих лекарственных формах. Особенно часто используется раствор глюкозы в виде:
Изотонических растворов для внутривенного введения;
Стерильных растворов 50% концентрации для интраамнеального введения;
Инфузионных растворов в виде раствора Рингера - Локка;
В растворах для внутреннего применения для новорожденных детей в виде 5%, 10%, 50% концентрации;
В растворах для поения новорожденных в концентрации 5% с кислотой аскорбиновой 1% концентрации;
Раствора 5% концентрации в смеси с калием хлоридом 0,5%, 1% концентрации для внутреннего применения для взрослых;
Растворов для внутреннего применения взрослым 10%, 20%, 40%, 50% концентрации.
Изотонические растворы глюкозы 5% концентрации применяются для наполнения организма жидкостью, как источник энергии для поддержания жизненно важных функций организма.
Гипертонические растворы повышают осмотическое давление крови, усиливают переход жидкости из ткани в кровь, при этом усиливаются обменные процессы, антитоксическая функция печени, сократительная деятельность сердечной мышцы, расширяются сосуды, увеличивается диурез.
При приготовлении растворов глюкозы необходимо знать физико-химические свойства препарата:
Молекула глюкозы содержит кристаллизационную воду, что выражается в виде влажности 9,8 - 10,4%, поэтому её надо брать в большем количестве, чем указано в прописи, с учетом влажности по формуле (а • 100)/ 100-10;
Субстанция «Глюкоза для инъекций» должна выдерживать требование апирогенности в виде 5% раствора (тест-доза мл на 1кг массы животного). Раствор глюкозы не выдерживает воздействия высоких температур;
На стадии термической стерилизации без добавления стабилизатора происходит деструкция глюкозы, раскрытие цикла и образование ациклической молекулы, затем идет дегидратация, окисление даже при незначительном содержании кислорода в воде и в воздухе под пробкой. Процесс окисления глюкозы ускоряется от щелочности стекла, при хранении на свету. Поэтому используют стабилизатор Вейбеля состава: Натрия хлорид депирогенизированный 0,26
0,1 М раствор кислоты хлористоводородной 5 мл на 1л раствора глюкозы независимо от концентрации.
Удобнее пользоваться свежеприготовленным проанализированным раствором Вейбеля: Натрия хлорид 5,2 раствор кислоты хлористоводородной (8,3%) 4,4 мл воды для инъекций до 1 л. Натрия хлорид способствует циклизации глюкозы, блокирует альдегидную группу в ациклической активной форме, т.е. препятствует окислению глюкозы. Кислота хлористоводородная, создавая кислую среду, замедляет окисление глюкозы при рН = 3,0 - 4,1 количество 5-оксиметил фурфурол а минимально.
Стабилизатора Вейбеля надо брать 5% от объема глюкозы. Растворы глюкозы являются питательной средой для микроорганизмов, поэтому нужно использовать глюкозу сорта «Для инъекций» свободной от пирогенных веществ. В качестве растворителя следует использовать апирогенную воду для инъекций. Растворы глюкозы 5% и 10% обязательно проверяют на отсутствие пирогенных веществ (Lal – тест), в основу которого положена способность пирогенов образовывать гель с мезатоном амебоцитов краба-меченосца.
В промышленном производстве растворы очищают от пирогенных веществ ультрафильтрацией, используя мембранный фильтр «Владипор» с размером пор способных задерживать более 99% пирогенов. Например, требуется изготовить раствор:
Recipe: Solutionis Glucosi 5% - 10ml
Sterilisetur!
D.t.d. N 20
Signa: Для внутривенного введения.
Согласно приказу №214 состав раствора:
Объем = 1000 мл
Глюкозы безводной - 50,0
Кислоты хлористоводородной 0,1М до рН 3,0 - 4,1
Натрия хлорида 0,26
Воды очищенной до 1000 мл
V=1000 мл
Рабочая пропись (с мерной колбой в/флаконе):
Объем = 200 мл
Воды для инъекций до 200 мл
Глюкозы с 10% влаги 10,0
Стабилизатора Вейбеля 10 мл
V=200 мл
Рабочая пропись (без мерной колбы Куо (водной глюкозы) = 0,69):
Объем одной дозы = 10 • 20 = 200 мл
Объем раствора во флаконе = 10,5 мл,
Объем 20 доз = 210 мл
Глюкозы с 10% влаги для номинального объема 10 • 100/100 - 10=11,1, для объема 210 мл = 11,65
Стабилизатора Вейбеля 10,5 мл
Воды для инъекций 210 мл- (10,5+ 8) = 191,5мл
V=210мл
Приготовление
Готовить в асептическом блоке массо-объемным методом. В стерильную емкость отмерить воды апирогенной для инъекций 191,5 мл, растворить 11,65 глюкозы с влажностью 10%, добавить стабилизатор Вейбеля 10,5 мл, растворить все смешиванием, отдать на анализ. После положительного анализа раствор профильтровать, проверить на чистоту, подготовить к стерилизации, написать на бирке или алюминиевом колпачке «Sol. Glucosi 5% Дата, время, подпись приготовившего».
Простерилизовать при t= 120°С - 8 мин, после чего проверить на чистоту, целостность стекла, анализ повторный в отдельном флаконе. Оформить к отпуску «Для инъекций» с синим сигнальным цвета с надписью «Sol. Glucosi 5%» с указанием номера анализа, номера серии, дату, подписи приготовившего, проверившего, расфасовавшего.
Изготовил -
Расфасовал по 10,5 мл №20 -
Проверил-
Отпустил-
Срок годности 30 суток до вскрытия
В растворах 5%, 10%, 50% концентраций для поения новорожденных нельзя использовать стабилизатор, поэтому стерилизуют при t = 120°С, используется свежеприготовленным.
6. При получении антибиотиков в процессе ферментации в питательной среде возможно избыточное или недостаточное содержание указанного вещества (см. формулу).
• Как в этом случае можно оптимизировать условия ферментации для получения максимального количества целевого продукта?
Ответ
D-Глюкоза - C6H12O6, - моносахарид, важный углевод. Слово «глюкоза» происходит от греческого γλυκύς (сладкий). Используется клетками как источник энергии. Углеводное питание – обязательный компонент питательных сред практически в любом биотехнологическом производстве, в частности, в производстве антибиотиков.
Источниками углерода являются:
-
кукурузная мука (60-70% крахмала)
-
крахмал
-
сахар
-
лактоза
-
глюкоза
-
гидрол
-
патока (отходы сахарного производства)
Для промышленного производства антибиотиков-пенициллинов используют культуру плесневого гриба Penicillium chrysogenum и питательную среду, содержащую кукурузный экстракт, гидрол, лактозу и минеральные соли.
Вместо кукурузного экстракта можно использовать арахисовую муку, жмыхи, муку из хлопковых семян и другие источники; возможность широкого использования продуктов растительного происхождения обусловлена тем, что у P. chrysogenum имеются сильные протеолитические ферменты. В качестве углеводов часто используют сахарозу или смесь лактозы с глюкозой в соотношении 1:1. Глюкоза может снижать биосинтез антибиотика; на средах, содержащих лактозу или сахарозу (в условиях депрессии), биосинтез антибиотика идёт активнее.
Углеродкатаболитная репрессия является одним из механизмов, воздействующих на биосинтез вторичных метаболитов. Известно, что глюкоза – лучший источник углерода и энергии для любых организмов. Однако, показано, что продукты катаболизма глюкозы подавляют синтез ферментов, существенных за продукцию лактамов, аминогликозидов и др. Глюкоза, фруктоза, сахароза и галактоза в питательной среде снижают биосинтез антибиотиков. Медленно утилизирующиеся полисахариды (карахмал и др.) более благоприятны для накопления антибиотика. Не является репрессором и лактоза, которая также медленно утилизируется. Так высвобождающаяся при гидролизе лактозы глюкоза репрессирует бетагалактозидазу, в результате чего гидролиз лактозы (и появление в среде глюкозы) замедляется.