9. Цветные реакции

На Белки:

БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ, цветная р-ция на биурет, к-рую осуществляют, прибавляя к щелочному р-ру последнего разб. водный р-р солиСu²⁺ (обычно CuSO₄). При этом р-р окрашивается в интенсивный фиолетовый цвет благодаря образованию комплексного соед. В условиях Б. р. белки дают фиолетовую окраску, что использовалось для их качеств. и количеств. анализа. 

МИЛЛОНА РЕАКЦИЯ, цветная качеств. р-ция на белки и фенолы. При добавлении к р-ру белка реактива Миллона [р-р HgNO₃ и Hg(NO₃)₂ в разб. HNO₃, содержащей примесь HNO₂] образуется белый осадок денатурир. белка. При стоянии (быстрее при нагр. до 50 °С) осадок окрашивается сначала в розовый или желтый, а затем в пурпурно-красный цвет. Красное окрашивание обусловлено образованием ртутных солей нитрофенолов, благодаря присутствию в белке остатков тирозина. Присутствие в белке остатковтриптофана дает буро-красное окрашивание.

КСАНТОПРОТЕИНОВАЯ РЕАКЦИЯ, цветная качеств. р-ция на белки. Для ее осуществления к р-ру белка прибавляют конц. HNO₃ до тех пор, пока не прекратится образование осадка, к-рый при нагр. окрашивается в желтый цвет. Окраска возникает в результате нитрования ароматич. колец аминокислотных остатков белка (тирозина и триптофана).

ПАУЛИ РЕАКЦИЯ, цветная р-ция на белки, содержащие остатки тирозина и(или) гистидина (а также на эти аминокислоты), к-рую осуществляют смешиванием р-ра белка со свежеприготовл. р-ром n-диазобензолсульфокислотой в присут.

АДАМКЕВИЧА РЕАКЦИЯ (р-ция Адамкевича - Гопкинса), цветная р-ция на производные индола, содержащие заместитель в положении 3, в т. ч. на остатки триптофана в пеп-тидах и белках. Для осуществления р-ции в-во растворяют в глиоксиловой к-те и добавляют каталитич. кол-во H₂SO₄. Продукт р-ции имеет фиолетово-синюю окраску. 

На аминокислоты:

НИНГИДРИНОВАЯ РЕАКЦИЯ, цветная р-ция на a-аминокислоты, к-рую осуществляют нагреванием последних в щелочном р-ре избытканингидрина. Образующееся соед. II имеет фиолетово-синюю окраску (l_макс 570 нм). Пролин и гидроксипролин, у к-рых нет a-аминогруппы, в р-ции снингидрином образуют производное желтого цвета (l._макс 440 нм). Н. р. неспецифична, т. к. окрашенный продукт с нингидрином дают также NH₃ и др. соед., содержащие аминогруппу (в т.ч. белки и пептиды). Однако р-ции с этими соед. осуществляются без выделения СО₂ (Н.р. с выделением СО₂ специфична только для a-аминокислот).

Р-цию используют для колориметрич. количеств. определения a-аминокислот, в т. ч. в автоматич. аминокислотных анализаторах.

БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ, цветная р-ция на биурет, к-рую осуществляют, прибавляя к щелочному р-ру последнего разб. водный р-р солиСu²⁺ (обычно CuSO₄). При этом р-р окрашивается в интенсивный фиолетовый цвет благодаря образованию комплексного соед. (ф-ла I, М⁺ - катион щелочного металла). В р-цию, подобную биуретовой, вступают многие в-ва, содержащие в молекуле не менее двух амидных группировок, аминогидроксиэтиленовую группу —CH(NH₂)CH(OH)—, амиды и имиды аминокислот и нек-рые др. соединения. Продукты р-ции в этом случае имеют фиолетовую или синюю окраску

ПАУЛИ РЕАКЦИЯ, цветная р-ция на белки, содержащие остатки тирозина и(или) гистидина (а также на эти аминокислоты), к-рую осуществляют смешиванием р-ра белка со свежеприготовл. р-ром n-диазобензолсульфокислотой в присут. Na₂CO₃.

САКАГУЧИ РЕАКЦИЯ, цветная р-ция на аргинин и др. монопроизводные гуанидина, дающие ярко-красное окрашивание в щелочной среде при взаимод. с a-нафтолом и гипохлоритом или гипобромитом Na. С. р. можно использовать для идентификации аргинина в смеси аминокислот при проведении бумажной хроматографии. Для этого хроматограмму вначале опрыскивают 0,01%-ным р-ром a-нафтола в 95%-ном этаноле, содержащем 5% мочевины (этот р-р перед употреблением сильно подщелачивают сухим NaOH). После просушивания хро-матограммы ее опрыскивают 5%-ным водным р-ром NaBrO.

С. р. пригодна также для количеств. определения аргинина.