- •Центральная догма молекулярной биологии
- •БИОСИНТЕЗ ДНК
- •а) Полуконсервативный
- •Эксперимент Мезельсона и Сталя
- •Центрифугирование в течение 50 – 60 часов при 100 000 g приводит к
- •Образование фосфодиэфирной связи
- •Механизм образования фосфодиэфирной связи
- •Участники реакции:
- •ОТКРЫТИЕ ДНК-ЗАВИСИМОЙ ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
- •Общая схема репликации ДНК
- •СРАВНЕНИЕ СВОЙСТВ ДНК-ПОЛИМЕРАЗ E.coli
- •ОСНОВНЫЕ КОМПОНЕНТЫ РЕПЛИСОМЫ E.coli
- •Инициация репликации (E.coli)
- •Присоединение геликазы и праймазы
- •БЕЛОК
- •CУБЪЕДИНИЧНЫЙ СОСТАВ ХОЛОФЕРМЕНТА ДНК- ПОЛИМЕРАЗЫ III E.coli
- •СТРУКТУРА РЕПЛИСОМЫ В ХОДЕ ЭЛОНГАЦИИ
- •Пространственная модель комплекса димера β-субъединицы, связанного с ДНК
- •СХЕМАТИЧЕСКОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕ КОРА ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ III
- •Коррекция ошибок ДНК-полимеразой III
- •За корректирующую активность ответственна ε- субъединица ДНК-полимеразы III
- •Удаление РНК- праймеров ДНК- полимеразой I
- •Соединение фрагментов Оказаки
- •Механизм действия ДНК-лигазы
- •Структура ori E.coli
- •Репликация с образованием θ- структуры
- •Репликация по механизму «катящегося кольца»
- •Эукариотические ДНК-полимеразы:
- •Множественные ориджины эукариот
- •МЕТАБОЛИЗМ РНК
- •1.Матричный
- •Образование фосфодиэфирной
- •ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ПРОКАРИОТ
- •ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ЭУКАРИОТ
- •Типы
- •Субъединичный состав ДНК-зависимой РНК- полимеразы E.coli
- •Субъединичная структура кора бактериальной РНК-полимеразы
- •Инициация транскрипции
- •Структура прокариотического промотора
- •РНК-полимераза
- •σ-факторы E.coli
- •Элонгация
- •Кор бактериальной РНК-полимеразы в комплексе с ДНК и вновь синтезирующейся РНК
- •Первичная структура:
- •Rho-независимая терминация транскрипции
- •Rho-зависимая
- •Фолдинг РНК в процессе транскрипции
- •2006 г. Нобелевская премия по химии присуждена Роджеру Корнбергу (Roger Kornberg)
- •ДНК-зависимые РНК-полимеразы эукариот
Общая схема репликации ДНК
5’ SSB-белки
Фрагменты оказаки |
|
||
|
1 |
|
|
Полимераза |
2 |
Геликаза |
|
|
3 |
|
|
Отстающая цепь |
+ |
|
|
|
|
Инициаторные белки |
|
|
|
|
3’ |
|
праймаза |
|
Пары оснований |
Полимераза III |
5’ |
||
|
|
’ |
|
3 |
|
|
’ |
|
5 |
|
РНК-праймер
3’
РНК-праймеры замещаются ДНК-полимеразой I, разрывы
соединяются ДНК-лигазой
Лидирующая цепь
СРАВНЕНИЕ СВОЙСТВ ДНК-ПОЛИМЕРАЗ E.coli
ДНК-полимеразы IV и V (1999) вовлечены в необычные формы репарации ДНК
ОСНОВНЫЕ КОМПОНЕНТЫ РЕПЛИСОМЫ E.coli
БЕЛОК |
ФУНКЦИЯ |
МОЛ.ВЕС |
|
|
kDa |
Инициация репликации |
|
|
Dna A |
Инициаторный белок |
52 |
Геликаза (Dna B) |
Расплетание двойной цепи |
300 |
Dna C |
«Загрузчик» геликазы |
29 |
HU |
Гистон-подобный белок |
19 |
SSB |
Связывает одноцепочечную ДНК |
75,6 |
Праймаза (Dna G) |
Синтез РНК-праймера |
60 |
ДНК-топоизомераза II |
Снятие торсионного стресса при |
400 |
|
расплетании |
|
Dam-метилаза |
метилирование GATC в oriC |
32 |
Инициация репликации (E.coli)
OriC:
Связывание инициаторного белка dnaA c ДНК
Присоединение геликазы и праймазы
БЕЛОК |
ФУНКЦИЯ |
МОЛ.ВЕС |
|
|
kDa |
Элонгация репликации |
|
|
Геликаза (Dna B) |
Расплетание двойной цепи |
300 |
SSB |
Связывает одноцепочечную ДНК |
75,6 |
ДНК-полимераза III |
Элонгация вновь образующейся цепи |
|
α |
полимеразная активность |
130 |
ε |
корректирующая 3’-5’- экзонуклеазная |
27 |
β |
скользящий зажим |
40 |
δ |
загрузчик зажима (clamp loader) |
32 |
γ |
|
52 |
τ |
димеризация кора |
71 |
χ |
Взаимодействие с SSB-белками |
16,6 |
ψ |
Взаимодействие с γ и χ субъединицами |
15,2 |
θ |
? |
10 |
ДНК-полимераза I |
удаление РНК-праймеров |
103 |
ДНК-лигаза |
соединение разрывов в отстающей цепи |
74 |
ДНК-топоизомераза II |
Снятие торсионного стресса при |
400 |
|
расплетании |
|
CУБЪЕДИНИЧНЫЙ СОСТАВ ХОЛОФЕРМЕНТА ДНК- ПОЛИМЕРАЗЫ III E.coli
СТРУКТУРА РЕПЛИСОМЫ В ХОДЕ ЭЛОНГАЦИИ
Ф |
Ф |
Пространственная модель комплекса димера β-субъединицы, связанного с ДНК
СХЕМАТИЧЕСКОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕ КОРА ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ III
большая бороздка ДНК
«большой палец» (“thumb”)
Поступающие
дезоксирибонуклеозид
трифосфаты
связывание
ДНК
“palm”
матрица
матрица
праймер
праймер
«ладонь»
(“palm”)
«пальцы» (“fingers”)