- •Центральная догма молекулярной биологии
- •БИОСИНТЕЗ ДНК
- •а) Полуконсервативный
- •Эксперимент Мезельсона и Сталя
- •Центрифугирование в течение 50 – 60 часов при 100 000 g приводит к
- •Образование фосфодиэфирной связи
- •Механизм образования фосфодиэфирной связи
- •Участники реакции:
- •ОТКРЫТИЕ ДНК-ЗАВИСИМОЙ ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
- •Общая схема репликации ДНК
- •СРАВНЕНИЕ СВОЙСТВ ДНК-ПОЛИМЕРАЗ E.coli
- •ОСНОВНЫЕ КОМПОНЕНТЫ РЕПЛИСОМЫ E.coli
- •Инициация репликации (E.coli)
- •Присоединение геликазы и праймазы
- •БЕЛОК
- •CУБЪЕДИНИЧНЫЙ СОСТАВ ХОЛОФЕРМЕНТА ДНК- ПОЛИМЕРАЗЫ III E.coli
- •СТРУКТУРА РЕПЛИСОМЫ В ХОДЕ ЭЛОНГАЦИИ
- •Пространственная модель комплекса димера β-субъединицы, связанного с ДНК
- •СХЕМАТИЧЕСКОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕ КОРА ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ III
- •Коррекция ошибок ДНК-полимеразой III
- •За корректирующую активность ответственна ε- субъединица ДНК-полимеразы III
- •Удаление РНК- праймеров ДНК- полимеразой I
- •Соединение фрагментов Оказаки
- •Механизм действия ДНК-лигазы
- •Структура ori E.coli
- •Репликация с образованием θ- структуры
- •Репликация по механизму «катящегося кольца»
- •Эукариотические ДНК-полимеразы:
- •Множественные ориджины эукариот
- •МЕТАБОЛИЗМ РНК
- •1.Матричный
- •Образование фосфодиэфирной
- •ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ПРОКАРИОТ
- •ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ЭУКАРИОТ
- •Типы
- •Субъединичный состав ДНК-зависимой РНК- полимеразы E.coli
- •Субъединичная структура кора бактериальной РНК-полимеразы
- •Инициация транскрипции
- •Структура прокариотического промотора
- •РНК-полимераза
- •σ-факторы E.coli
- •Элонгация
- •Кор бактериальной РНК-полимеразы в комплексе с ДНК и вновь синтезирующейся РНК
- •Первичная структура:
- •Rho-независимая терминация транскрипции
- •Rho-зависимая
- •Фолдинг РНК в процессе транскрипции
- •2006 г. Нобелевская премия по химии присуждена Роджеру Корнбергу (Roger Kornberg)
- •ДНК-зависимые РНК-полимеразы эукариот
МЕТАБОЛИЗМ РНК
•ДНК-зависимый синтез РНК – транскрипция
•Ферментативный аппарат транскрипции –
ДНК-зависимая РНК-полимераза
• Этапы транскрипции: инициация, элонгация,
терминация
•Процессинг РНК
•Регуляция экспрессии генов на уровне
транскрипции
1.Матричный
процесс
2.Образуются Уотсон-Криковские пары
ДНК
A T G C
││││ │││ │││
U A C G
РНК
РНК-продукт не остается комплементарно связанным с матрицей;
по окончании синтеза двойная спираль восстанавливается;
одноцепочечная РНК высвобождается;
синтезированные РНК – копии ограниченных Участков ДНК
Образование фосфодиэфирной |
||
|
связи: |
|
Растущая |
|
|
цепь |
|
|
РНК (NMP)n + NTP |
|
(NMP)n+1 + PPi |
|
||
OH |
|
|
РНК-полимераза
OH РНК-полимераза
U
UTP
OH
ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ПРОКАРИОТ
•Матричные РНК (мРНК) – короткоживущие посредники в процессе переноса информации от ДНК к белку
•Рибосомные РНК (рРНК) – компонент рибосом и рибонуклеопротеиновых частиц
•Транспортные РНК (тРНК) – доставка аминокислот к рибосомам
ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ЭУКАРИОТ
•Гетероядерные РНК– предшественники мРНК (mRNA)
•Рибосомные РНК (rRNA)
•Транспортные (tRNA)
•Малые ядерные (snRNA) – компоненты сплайсосомы и др.функции
•Малые ядрышковые РНК (snoRNA) –
процессинг рРНК и тРНК
•МикроРНК (miRNA) – напр., индукция и супрессия опухолей
•Малые интерферирующие РНК (siRNA), ассоциированные с повторами
Типы |
Относительное |
S |
Число |
бактериальной |
содержание |
|
нуклео- |
РНК |
% |
|
тидов |
рРНК |
80 |
23, |
16, 5 |
3700, 1700 |
|
|
|
|
120 |
тРНК |
15 |
|
4 |
75 |
мРНК |
5 |
Гетерогенна |
Субъединичный состав ДНК-зависимой РНК- полимеразы E.coli
Субъединичная структура кора бактериальной РНК-полимеразы
Обозначения:
α – белый β’ – розовый β – голубой ω - белый
Консервативные участки β и β’ - зеленый
Инициация транскрипции
Не нужна затравка
Синтез начинается с определенного нуклеотида (+1)
Начало синтеза
определяется
промотором
За узнавание промотора ответственна σ-субъединица
Направление синтеза 5’→3’