- •Центральная догма молекулярной биологии
- •БИОСИНТЕЗ ДНК
- •а) Полуконсервативный
- •Эксперимент Мезельсона и Сталя
- •Центрифугирование в течение 50 – 60 часов при 100 000 g приводит к
- •Образование фосфодиэфирной связи
- •Механизм образования фосфодиэфирной связи
- •Участники реакции:
- •ОТКРЫТИЕ ДНК-ЗАВИСИМОЙ ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
- •Общая схема репликации ДНК
- •СРАВНЕНИЕ СВОЙСТВ ДНК-ПОЛИМЕРАЗ E.coli
- •ОСНОВНЫЕ КОМПОНЕНТЫ РЕПЛИСОМЫ E.coli
- •Инициация репликации (E.coli)
- •Присоединение геликазы и праймазы
- •БЕЛОК
- •CУБЪЕДИНИЧНЫЙ СОСТАВ ХОЛОФЕРМЕНТА ДНК- ПОЛИМЕРАЗЫ III E.coli
- •СТРУКТУРА РЕПЛИСОМЫ В ХОДЕ ЭЛОНГАЦИИ
- •Пространственная модель комплекса димера β-субъединицы, связанного с ДНК
- •СХЕМАТИЧЕСКОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕ КОРА ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ III
- •Коррекция ошибок ДНК-полимеразой III
- •За корректирующую активность ответственна ε- субъединица ДНК-полимеразы III
- •Удаление РНК- праймеров ДНК- полимеразой I
- •Соединение фрагментов Оказаки
- •Механизм действия ДНК-лигазы
- •Структура ori E.coli
- •Репликация с образованием θ- структуры
- •Репликация по механизму «катящегося кольца»
- •Эукариотические ДНК-полимеразы:
- •Множественные ориджины эукариот
- •МЕТАБОЛИЗМ РНК
- •1.Матричный
- •Образование фосфодиэфирной
- •ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ПРОКАРИОТ
- •ПРОДУКТЫ ТРАНСКРИПЦИИ ЭУКАРИОТ
- •Типы
- •Субъединичный состав ДНК-зависимой РНК- полимеразы E.coli
- •Субъединичная структура кора бактериальной РНК-полимеразы
- •Инициация транскрипции
- •Структура прокариотического промотора
- •РНК-полимераза
- •σ-факторы E.coli
- •Элонгация
- •Кор бактериальной РНК-полимеразы в комплексе с ДНК и вновь синтезирующейся РНК
- •Первичная структура:
- •Rho-независимая терминация транскрипции
- •Rho-зависимая
- •Фолдинг РНК в процессе транскрипции
- •2006 г. Нобелевская премия по химии присуждена Роджеру Корнбергу (Roger Kornberg)
- •ДНК-зависимые РНК-полимеразы эукариот
Центральная догма молекулярной биологии
РЕПЛИКАЦИЯ
ТРАНСКРИПЦИЯ
сплайсинг
ТРАНСЛЯЦИЯ
БЕЛКИ
БИОСИНТЕЗ ДНК
• Доказательства полуконсервативного способа репликации ДНК (Meselson, Stahl,
1958)
•Уравнение синтеза ДНК
•Ферментативный аппарат репликации ДНК
а) Полуконсервативный
б) Консервативный
в) Дисперсный
Эксперимент Мезельсона и Сталя
в
Центрифугирование в течение 50 – 60 часов при 100 000 g приводит к формированию градиента плотности CsCl и образованию полос ДНК
Увеличение плотности
Градиент:
1,66 – 1,76 г/см3
Центрифугирование в течение 50 – 60 часов при 100 000 g приводит к формированию градиента плотности CsCl и образованию полос ДНК
1е поколение: вся
тяжелая/легкая
2е поколение: 2 тяжелые/легкие 2 легкие/легкие
3е поколение: 2 тяжелые/легкие 6 легкие/легкие
Исходная ДНК:
тяжелая/тяжелая
Репликация
Репликация
Репликация
Образование фосфодиэфирной связи
5’
4’
3’
¨
5’
4’
3’
1’
2’
1’
2’
5’
4’ |
1’ |
|
3’ |
||
2’ |
||
|
5’
4’ 1’ 3’ 2’
Механизм образования фосфодиэфирной связи
ДНК-полимераза
Участники реакции:
2. Затравка 3’-ОН (праймер)
ОН
1. Матрица |
3. Нуклеозидтрифосфаты |
|
|
4. ДНК-зависимая ДНК -полимераза |
ОТКРЫТИЕ ДНК-ЗАВИСИМОЙ ДНК-ПОЛИМЕРАЗЫ
Arthur Kornberg |
Severo Ochoa |
1959: Нобелевская премия в области физиологии и медицины
Систематическое название:
Трехмерная структура фрагмента Кленова ДНК-полимеразы I
Дезоксинулеозид-трифосфат:ДНК-дезоксинуклеотидил-трансфераза
(ДНК-направляемая)
EC 2.7.7.7 DNA-directed DNA polymerase