Задача 2 Исследование действия кураре на сокращение мышц
Для работы необходимы:горизонтальный миограф, универсальный штатив, кимограф, стимулятор, электроды, переключатель, набор препаровальных инструментов, 0,1%-ный раствор миорелаксина, раствор Рингера.
Объект исследования – лягушка.
Проведение работы. Подготавливают лягушку к опыту так же, как указано в работе 2. Регистрируют сокращение икроножной мышцы на кимографе и определяют пороговые величины раздражающего тока для седалищного нерва и непосредственно для икроножной мышцы (см. работу 2). В лимфатический мешок лягушки вводят миорелаксин (0,1–0,3 мл). Сразу после введения препарата проводят стимуляцию седалищного нерва с частотой 1 Гц при силе раздражающего тока, втрое превышающей пороговую величину. Записывают сокращение мышцы на кимографе и наблюдают постепенное снижение амплитуды сокращения. По окончании сокращения мышцы увеличивают амплитуду одиночных стимулов и вновь добиваются сокращения, отмечая при этом параметры раздражающего тока. В процессе эксперимента убеждаются в том, что икроножная мышца перестает сокращаться при любых величинах раздражающего тока. Затем переходят к прямому раздражению мышцы. Для этого переставляют раздражающие электроды непосредственно на мышцу, убрав предварительно усиление ручкой грубой и плавной регулировки амплитуды импульсов. Устанавливают на стимуляторе пороговую величину раздражающего импульса для мышцы (ее определили в начале опыта) и включают раздражение. Плавно увеличивая амплитуду раздражающего тока, добиваются сокращения мышцы и отмечают в протоколе пороговую величину импульса. Убеждаются в том, что несмотря на введение миорелаксина при прямом раздражении мышцы пороговая величина стимула изменилась незначительно. Увеличивают амплитуду раздражающих импульсов и наблюдают увеличение амплитуды сокращения мышцы. Затем вновь наносят раздражение на седалищный нерв и убеждаются, что мышца не сокращается.
Результаты работы и их оформление. Зарисуйте схему опыта задачи 2 и вклейте в тетрадь записи, полученные при прямом и непрямом раздражении мышцы. Сформулируйте выводы на основе полученных результатов.
Определение скорости проведения возбуждения по нерву
Регулируя скорость развертки и силу раздражения седалищного нерва, добиваются, чтобы на экране осциллографа регистрировались артефакт раздражения и ПД. Включение отметки времени позволяет измерить время от момента нанесения раздражения до начала возникновения ПД. По формуле V = S/T можно рассчитать скорость распространения возбуждения по нерву V, поскольку мы знаем длину нервного ствола между раздражающими и отводящими электродами S, а также время Т, в течение которого возбуждение, возникшее под стимулирующими электродами, распространяется до участка, где находятся регистрирующие электроды.
Скорость распространения возбуждения по нерву неодинакова для волокон, составляющих нервный ствол. Время от момента нанесения раздражения до начала развития каждого последующего компонента сложного ПД позволяет определить скорость распространения возбуждения во всех группах волокон. Данная работа может быть проведена на нервно-мышечном препарате лягушки, однако в таком случае трудно установить детали составного ПД нервного ствола, а скорость распространения возбуждения определяется приблизительно.
Для работы необходимы:установка для регистрации ПД нерва кошки (усилитель переменного тока, катодный осциллограф, стимулятор), раздражающие и регистрирующие электроды, набор препаровальных инструментов, нембутал, раствор Рингера.
Объект исследования – кошка.
Проведение работы. Проверяют готовность аппаратуры к работе. Аппаратура должна быть смонтирована по схеме, представленной на рис. 91. После наркотизации животного нембуталом (40 мг/кг) отпрепаровывают седалищный нерв на максимальную длину и накладывают на него стимулирующие и отводящие электроды, расположив их на максимальном расстоянии друг от друга. При этом следят за тем, чтобы электроды не касались окружающих тканей. Измеряют расстояние между стимулирующими и отводящими электродами, получают численное значение величины S.
Рис. 91. Схема установки для определения скорости распространения
возбуждения по нерву(опыт Гассера и Эрлангера):
S– расстояние от стимулирующих до отводящих электродов;Т – время, в течение которого возбуждение проходит по миелинизированньм волокнам путьS;
А (,,), В, С – потенциалы разных групп волокон
Далее опыт проводят так же, как описано в работе 13. Добиваются, чтобы на экране осциллографа были видны одновременно артефакт раздражения и ПД нерва. Измеряют циркулем интервал от артефакта раздражающего тока до начала восходящей фазы ПД нерва. Включают калибратор времени и определяют численное значение Т, т. е. время прохождения волной возбуждения расстояния между стимулирующими и отводящими электродами. Затем вычисляют скорость проведения возбуждения по нерву, пользуясь приведенной выше формулой. Аналогичным способом определяют скорость проведения возбуждения по всем группам волокон (А, В, С), входящих в состав нервного ствола.
Результаты работы и их оформление. Оформите протокол опыта. Проанализируйте полученные кривые, обратив особое внимание на временные параметры. Рассчитайте по формуле скорость проведения возбуждения, исходя из электрографической картины ПД. Определите различные параметры отдельных компонентов ПД (длительность, амплитуду, латентный период, скорость распространения возбуждения) и сделайте соответствующие выводы.
Р а б о т а 15